許亞改 周文茂 張 斌 王 琨
(1.石家莊市獸用生物制品供應(yīng)站,河北石家莊 050000;2.石家莊市畜牧獸醫(yī)技術(shù)開(kāi)發(fā)中心,河北石家莊 050000;3.石家莊市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,河北石家莊 050000)
移液器是獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室最常用的定量移液設(shè)備,用于ELISA、PCR等試驗(yàn)。為規(guī)范獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室工作人員在移液器使用過(guò)程中的操作行為,保障移液的精確性,實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,現(xiàn)結(jié)合工作經(jīng)驗(yàn)就移液器的操作規(guī)范及注意事項(xiàng)做簡(jiǎn)單介紹。
移液器使用共分為容量設(shè)定、裝配吸頭、預(yù)洗吸頭、吸液、放液、卸去吸頭等六個(gè)步驟。
容量設(shè)定分為兩個(gè)步驟,一是粗調(diào),即通過(guò)旋轉(zhuǎn)將容量值迅速調(diào)整至接近的預(yù)想值;二是細(xì)調(diào),當(dāng)調(diào)整接近預(yù)想值后,通過(guò)調(diào)節(jié)輪慢慢將容量值調(diào)至設(shè)定值。如果從大體積調(diào)為小體積,逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)旋鈕即可;如果從小體積調(diào)為大體積時(shí),需先順時(shí)針旋轉(zhuǎn)至超過(guò)設(shè)定量程的刻度,再回調(diào)至設(shè)定體積,這樣可保證量取精確度。
正確的安裝方法為旋轉(zhuǎn)安裝法,把白套筒頂端插入吸頭,輕輕用力下壓并左右小幅度旋轉(zhuǎn)。
吸液前,應(yīng)將液體吸取、排放兩到三次,讓吸頭內(nèi)壁形成一層同質(zhì)液膜,確保移液的精度和準(zhǔn)度。其次,在吸取有機(jī)溶劑或高揮發(fā)液體時(shí),揮發(fā)性氣體會(huì)在白套筒室內(nèi)形成負(fù)壓,從而產(chǎn)生漏液的情況,這時(shí)就需要預(yù)洗四到六次,讓白套筒室內(nèi)的氣體達(dá)到飽和,負(fù)壓就會(huì)自動(dòng)消失。
將按鈕按至第一停點(diǎn),使吸頭浸入液面下2-3毫米處緩慢松開(kāi)按鈕,停一秒后將吸頭提離液面,貼壁停留2-3秒使管尖外側(cè)的液滴滑落(具體浸入深度根據(jù)盛放液體的容器大小靈活掌握)。
將吸頭貼到容器內(nèi)底部并保持10°~40°傾斜,平穩(wěn)按到第一停點(diǎn),停一秒再按到第二停點(diǎn)排除剩余液體。按住按鈕,同時(shí)提出移液器,松開(kāi)按鈕,彈出吸頭。
操作完畢后,按壓移液器側(cè)面手柄將吸頭彈下。
盡量選擇最大量程最接近所吸取量的加樣器,以減少誤差,不宜用大量程的移液器移取小體積樣品。
清潔移液器可用酒精棉。主要擦拭手柄、彈射器及白套筒外部,既保持干凈,又避免了對(duì)樣品產(chǎn)生污染。
根據(jù)國(guó)標(biāo)JJG 646-2017 移液器檢定規(guī)程,檢定周期為1年,也可根據(jù)使用頻率自行確定校準(zhǔn)時(shí)間。
裝配吸頭時(shí)避免用力過(guò)猛,影響氣密性導(dǎo)致吸液不準(zhǔn),長(zhǎng)期操作易造成移液器內(nèi)零件因長(zhǎng)期撞擊而松散,甚至導(dǎo)致調(diào)節(jié)刻度的旋鈕卡住,影響使用。
2.5.1 避免吸液太快
吸液過(guò)快會(huì)產(chǎn)生反沖和氣泡影響移液的準(zhǔn)確性,還會(huì)將液體吸入活塞,造成交叉污染,甚至產(chǎn)生溶液腐蝕活塞和密封圈現(xiàn)象,導(dǎo)致漏氣。
2.5.2 吸取特殊液體時(shí)注意事項(xiàng)
(1)吸取高揮發(fā)、高腐蝕液體
吸取高揮發(fā)、高腐蝕液體后,應(yīng)將移液器拆開(kāi),用蒸餾水沖洗活塞桿及白套筒內(nèi)壁,晾干后安裝使用。避免揮發(fā)性氣體長(zhǎng)時(shí)間吸附于活塞桿表面,對(duì)活塞桿產(chǎn)生腐蝕。
(2)吸取黏度高的液體(如蛋黃、血液)
吸取黏度高的液體可將吸頭尖端剪斷一截使吸液口擴(kuò)大,先預(yù)潤(rùn)后再吸取。也可采用反相移液法:先按到第二檔,慢慢松開(kāi)按鈕,放液時(shí)松到第一檔,再?gòu)棾鰩в胁糠謿埩粢后w的吸頭。
使用完畢,將其豎直掛在移液器架上。移液器吸頭里有液體時(shí),切勿將移液器水平放置或倒置,以免液體倒流腐蝕活塞彈簧。
如移液器不使用,要把移液器的量程調(diào)至最大刻度值,使彈簧處于松弛狀態(tài)以保護(hù)彈簧。
避免吸液前后用手觸摸吸頭,造成污染。