高 蕊，鄭 暉，岳 靈，李 穎，李 瑛

（成都中醫(yī)藥大學(xué)針灸推拿學(xué)院，四川 成都 610072）

功能性腹瀉是臨床上常見(jiàn)的消化系統(tǒng)疾病。番瀉葉又叫旃那葉、瀉葉，是一種具有瀉熱行滯、通便利水功效的中藥。大量的臨床實(shí)踐證實(shí)[1]，用番瀉葉水煎劑為大鼠灌胃，能建立功能性腹瀉大鼠模型。但不少學(xué)者對(duì)用這種方法建立的功能性腹瀉大鼠模型的穩(wěn)定性尚存在爭(zhēng)議，且他們認(rèn)為長(zhǎng)期大劑量使用番瀉葉水煎劑可能會(huì)對(duì)大鼠的腸黏膜造成損傷[2-3]。在本文中，筆者主要研究用不同濃度的番瀉葉水煎劑建立功能性腹瀉大鼠模型的穩(wěn)定性。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

SPF級(jí)SD大鼠40只（購(gòu)于成都達(dá)碩實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司）。這40只大鼠均為雄性，其體重為250～300 g。

1.2 實(shí)驗(yàn)所用的藥物

取番瀉葉（購(gòu)于成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院門診中藥房）480 g，用3000 ml的清水對(duì)番瀉葉進(jìn)行浸泡（時(shí)間為30 min左右）。之后對(duì)浸泡番瀉葉的清水進(jìn)行加熱，待水沸后，繼續(xù)加熱10 min。10 min后，用無(wú)紡布過(guò)濾出番瀉葉，保留藥液。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將藥液濃縮至1600 ml，將藥液置于零下18℃的冰箱中保存。用生理鹽水將藥液配置成不同的濃度〔低濃度（0.1 g/ml）、中等濃度（0.2 g/ml）和高濃度（0.3 g/ml）〕。

1.3 動(dòng)物分組與造模方法

將40只大鼠在適宜的環(huán)境下（室溫為20℃～25℃，相對(duì)濕度為50%～70%，且保持飼養(yǎng)環(huán)境清潔、安靜）喂養(yǎng)5 d后，采用隨機(jī)數(shù)表法將這40只大鼠分為四組，即比較組（10只）、低濃度組（10只）、中濃度組（10只）和高濃度組（10只）。讓四只大鼠禁食，每天用不同濃度的番瀉葉水煎劑和生理鹽水對(duì)其進(jìn)行灌胃。用濃度為0.1 g/ml的番瀉葉水煎劑（劑量為10 ml/kg）為低濃度組大鼠灌胃，用濃度為0.2 g/ml的番瀉葉水煎劑（劑量為10 ml/kg）為中濃度組大鼠灌胃，用濃度為0.3 g/ml的番瀉葉水煎劑（劑量為10 ml/kg）為高濃度組大鼠灌胃，用生理鹽水（劑量為10 ml/kg）為比較組大鼠灌胃。持續(xù)灌胃14 d，在灌胃停止后，繼續(xù)觀察這四組大鼠的腹瀉情況14 d。

1.4 評(píng)價(jià)造模效果的方法

觀察這四組大鼠在灌胃第1天、第14天和灌胃后觀察期的第1天、第14天其稀便率、稀便級(jí)和腹瀉指數(shù)[4]。稀便率=每只大鼠每天所排的稀便量/每天的總排便量×100%。稀便級(jí)表示大鼠所排稀便的稀稠程度。根據(jù)大鼠所排稀便污染濾紙的直徑將其所排稀便分為1級(jí)、2級(jí)、3級(jí)和4級(jí)。1級(jí)：大鼠所排稀便污染濾紙的直徑＜1 cm。2級(jí)：大鼠所排稀便污染濾紙的直徑為1～2 cm。3級(jí)：大鼠所排稀便污染濾紙的直徑為3～4 cm。4級(jí)：大鼠所排稀便污染濾紙的直徑＞4 cm。腹瀉指數(shù)=稀便率×平均稀便級(jí)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

用SPSS213.0軟件對(duì)本研究中的數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，計(jì)數(shù)資料用%表示，用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，用t檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 灌胃第1天四組大鼠稀便率、稀便級(jí)及腹瀉指數(shù)的比較

灌胃第1天，低濃度組、中濃度組和高濃度組大鼠的稀便率、稀便級(jí)及腹瀉指數(shù)均高于比較組大鼠（P＜0.05）。中濃度組和高濃度組大鼠的稀便率、稀便級(jí)及腹瀉指數(shù)均高于低濃度組大鼠（P＜0.05）。中濃度組與高濃度組大鼠的稀便率、稀便級(jí)及腹瀉指數(shù)相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。詳見(jiàn)表1。

表1 灌胃第1天四組大鼠稀便率、稀便級(jí)及腹瀉指數(shù)的比較（± s ）

表1 灌胃第1天四組大鼠稀便率、稀便級(jí)及腹瀉指數(shù)的比較（± s ）

注：*與比較組相比，P＜0.05；#與低濃度組相比，P＜0.05；&與中濃度組相比，P＞0.05。

組別 例數(shù) 稀便率（%） 稀便級(jí)（級(jí)） 腹瀉指數(shù)比較組 10 0.43±0.035 0.00±0.00 0.00±0.00低濃度組 10 69.84±36.48* 1.53±0.81* 1.27±0.74*中濃度組 10 81.83±5.91*# 2.56±1.05*# 2.10±0.19*#高濃度組 10 82.25±6.99*#& 2.67±0.48*#& 2.15±0.48*#&

2.2 灌胃第14天四組大鼠稀便率、稀便級(jí)及腹瀉指數(shù)的比較灌胃第14天，低濃度組、中濃度組和高濃度組大鼠的

稀便率、稀便級(jí)及腹瀉指數(shù)均高于比較組大鼠（P＜0.05）。中濃度組大鼠的稀便率、稀便級(jí)及腹瀉指數(shù)均高于低濃度組大鼠（P＜0.05）。高濃度組大鼠的稀便率、稀便級(jí)及腹瀉指數(shù)均高于中濃度組大鼠（P＜0.05）。詳見(jiàn)表2。

表2 灌胃第14天四組大鼠稀便率、稀便級(jí)及腹瀉指數(shù)的比較（± s ）

表2 灌胃第14天四組大鼠稀便率、稀便級(jí)及腹瀉指數(shù)的比較（± s ）

注：*與比較組相比，P＜0.05；#與低濃度組相比，P＜0.05；&與中濃度組相比，P＜0.05。

組別 例數(shù) 稀便率（%） 稀便級(jí)（級(jí)） 腹瀉指數(shù)比較組 10 3.23±1.16 0.05±0.03 0.00±0.00低濃度組 10 47.88±15.41* 0.72±0.29* 0.38±0.25*中濃度組 10 56.58±23.48*# 0.92±0.62*# 0.75±0.51*#高濃度組 10 68.22±10.07*#& 1.34±0.34*#& 0.97±0.33*#&

2.3 灌胃后觀察期的第1天四組大鼠稀便率、稀便級(jí)及腹瀉指數(shù)的比較

灌胃后觀察期的第1天，低濃度組與中濃度組大鼠仍存在輕微排稀便的情況，但四組大鼠的稀便率、稀便級(jí)及腹瀉指數(shù)相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。詳見(jiàn)表3。

表3 灌胃后觀察期的第1天四組大鼠稀便率、稀便級(jí)及腹瀉指數(shù)的比較（± s ）

表3 灌胃后觀察期的第1天四組大鼠稀便率、稀便級(jí)及腹瀉指數(shù)的比較（± s ）

注：*與比較組相比，P＞0.05；#與低濃度組相比，P＞0.05；&與中濃度組相比，P＞0.05。

組別 例數(shù) 稀便率（%） 稀便級(jí)（級(jí)） 腹瀉指數(shù)比較組 10 0.00±0.00 0.00±0.00 0.00±0.00低濃度組 10 0.25±0.09* 0.00±0.00* 0.00±0.00*中濃度組 10 0.59±0.37*# 0.14±0.04*# 0.00±0.00*#高濃度組 10 0.00±0.00*#& 0.00±0.00*#& 0.00±0.00*#&

2.4 灌胃后觀察期的第14天四組大鼠稀便率、稀便級(jí)及腹瀉指數(shù)的比較

灌胃后觀察期的第14天，四組大鼠的稀便率、稀便級(jí)及腹瀉指數(shù)相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。詳見(jiàn)表4。

表4 灌胃后觀察期的第14天四組大鼠稀便率、稀便級(jí)及腹瀉指數(shù)的比較（± s ）

表4 灌胃后觀察期的第14天四組大鼠稀便率、稀便級(jí)及腹瀉指數(shù)的比較（± s ）

注：*與比較組相比，P＞0.05；#與低濃度組相比，P＞0.05；&與中濃度組相比，P＞0.05。

組別 例數(shù) 稀便率（%） 稀便級(jí)（級(jí)） 腹瀉指數(shù)比較組 10 0.00±0.00 0.00±0.00 0.00±0.00低濃度組 10 0.00±0.00* 0.00±0.00* 0.00±0.00*中濃度組 10 0.22±0.07*# 0.00±0.00*# 0.00±0.00*#高濃度組 10 0.00±0.00*#& 0.00±0.00*#& 0.00±0.00*#&

3 討論

目前，醫(yī)學(xué)研究者主要采用刺激性瀉藥、容積性瀉藥、潤(rùn)滑性瀉藥等喂服動(dòng)物（小鼠、大鼠、貓、狗等），誘導(dǎo)其腹瀉，以建立腹瀉動(dòng)物模型。番瀉葉是一種中醫(yī)常用的刺激性瀉藥，其致瀉機(jī)制主要是番瀉葉中的番瀉苷A、番瀉苷B經(jīng)胃和小腸吸收后，可在肝中分解，并進(jìn)入血液，從而可引起骨盆神經(jīng)節(jié)興奮，致使腸道功能亢進(jìn)。容積性瀉藥主要是指大黃。大黃中的大黃素可抑制Na+-K+-ATP 酶的活性，減弱小腸上皮細(xì)胞的主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)功能，影響小腸上皮細(xì)胞對(duì)葡萄糖、水和 Na+的吸收，導(dǎo)致腸腔的容積增大，從而可對(duì)腸壁造成刺激，增強(qiáng)腸道的蠕動(dòng)功能，進(jìn)而促進(jìn)排便[5]。潤(rùn)滑性瀉藥主要是指蓖麻油。蓖麻油可促進(jìn)腸黏膜前列腺素（PG）的合成，抑制腸道對(duì)水和電解質(zhì)的吸收，刺激腸道平滑肌，從而起到潤(rùn)腸通便的作用[6-8]。功能性腹瀉主要是因腸道功能亢進(jìn)所致，故本研究選用番瀉葉水煎劑為大鼠灌胃，建立功能性腹瀉大鼠模型。本研究中，用番瀉葉水煎劑灌胃的大鼠均出現(xiàn)了不同程度的腹瀉。其中，中濃度組大鼠的腹瀉程度重于低濃度組大鼠，而高濃度組大鼠的腹瀉程度重于中濃度組大鼠。這說(shuō)明用高濃度的番瀉葉水煎劑為大鼠灌胃可獲得較為理想的功能性腹瀉大鼠模型，且此模型的穩(wěn)定性較好。另外，用番瀉葉水煎劑灌胃的三組大鼠在灌胃停止后其腹瀉癥狀均消失。這與林阿素等[9]的研究結(jié)果（番瀉葉所致腹瀉的自愈性較好）基本一致。

綜上所述，用高濃度的番瀉葉水煎劑建立功能性腹瀉大鼠模型的穩(wěn)定性最佳，且在灌胃結(jié)束后大鼠的腹瀉癥狀可基本消失。