孫冬梅

摘 要：基于各種因素的影響，水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測(cè)的微生物檢測(cè)存在諸多問題，比如在分析標(biāo)準(zhǔn)，已知加入量、參比樣品等，通常都不具備或不知道，因此個(gè)人判斷常常顯得更為必要。因此為了保障水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測(cè)中微生物檢測(cè)的有效性，本文對(duì)水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測(cè)中微生物檢測(cè)的樣品采集、樣品實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)以及結(jié)果評(píng)價(jià)等方面的質(zhì)量控制進(jìn)行了論述分析，旨在加強(qiáng)對(duì)水質(zhì)環(huán)境進(jìn)行保護(hù)。

關(guān)鍵詞：水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測(cè)；微生物檢測(cè)；樣品采集；質(zhì)量控制；實(shí)驗(yàn)室；評(píng)價(jià)

近年來水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測(cè)已經(jīng)取得一定成績(jī)，常規(guī)監(jiān)測(cè)日趨成熟，水質(zhì)自動(dòng)監(jiān)測(cè)正有計(jì)劃地逐步開展。我國水環(huán)境監(jiān)測(cè)方法可以歸為三類：自動(dòng)監(jiān)測(cè)，常規(guī)監(jiān)測(cè)，應(yīng)急監(jiān)測(cè)，而水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測(cè)中的微生物檢測(cè)是其重要內(nèi)容，基于此，以下就水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測(cè)中的微生物檢測(cè)進(jìn)行了探討分析。

一、水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測(cè)中微生物檢測(cè)的樣品采集分析

水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測(cè)中微生物樣品采集主要表現(xiàn)為：（1）水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測(cè)微生物實(shí)驗(yàn)室先備齊采集微生物樣品的無菌采樣玻璃瓶。許多水體隨時(shí)間和空間會(huì)發(fā)生很大變化，必須制定出合理的采樣規(guī)劃。為保證采集的水樣必須有代表性，采樣時(shí)固定取水點(diǎn)，同一時(shí)間；采水量應(yīng)為瓶容量的80%，以便在檢驗(yàn)時(shí)充分混勻；采樣時(shí)應(yīng)直接采集，不得用水樣刷洗已滅菌的采樣瓶，并避免手指和其他物品對(duì)瓶口的玷污；采樣時(shí)不可攪動(dòng)水底的沉積物；采集管網(wǎng)水的樣品前應(yīng)對(duì)水龍頭進(jìn)行消毒，方法為用火焰在龍頭表面燒灼片刻（3～5秒），而后放水5～10分鐘。農(nóng)村生活用水部分水樣為蓄水池，需要備一個(gè)干凈的水桶，放入水池中數(shù)分鐘，盡量不取表面水，提水后將水灌入無菌瓶中，手注意不要接觸到無菌瓶口和瓶塞。

（2）水樣保存達(dá)到減緩微生物繁殖的作用。采用低溫冷藏箱來保存水樣，水樣全部采集后立即送回實(shí)驗(yàn)室；在運(yùn)輸中，玻璃容器要防止破裂，須有固定措施，防止樣品容器傾倒和樣品溢出。

二、水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測(cè)中微生物樣品實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的質(zhì)量控制分析

1、嚴(yán)格微生物樣品檢測(cè)中的實(shí)驗(yàn)設(shè)備質(zhì)量控制。主要表現(xiàn)為：第一、天平的使用應(yīng)嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，定期進(jìn)行檢定。第二、溫度計(jì)每半年校對(duì)一次，以保證培養(yǎng)箱、冰箱、冷凍箱和干燥箱都能連續(xù)準(zhǔn)確的反映操作溫度。第三、使用PH計(jì)至少要配制兩種標(biāo)準(zhǔn)緩沖液（PH4.0，PH7.0或PH10）來校準(zhǔn)PH計(jì)。第四、分析用水最好采用去離子水或蒸餾水，反對(duì)使用滲透水。第五、電熱滅菌箱應(yīng)定期（三個(gè)月）采用孢子試條或孢子懸浮液來測(cè)試其性能，確保操作準(zhǔn)確顯在160℃～180℃之間，己滅菌的器皿應(yīng)有標(biāo)志區(qū)分。第六、高壓滅菌器也應(yīng)定期采用孢子試跳或孢予懸浮液檢驗(yàn)其滅菌效果，每次使用要記錄好溫度、氣壓和滅菌時(shí)間。第七、膜濾裝置在使用前應(yīng)將部件組合起來，并檢查有無滲漏，必要時(shí)覆以硅酮，以增強(qiáng)過濾排放的效果。使用應(yīng)徹底清洗。第八、紫外燈應(yīng)每月定期擦試，每三個(gè)月一次使用紫外光度計(jì)測(cè)量紫外燈，以保持能使用紫外燈放出的紫外光在其最初放出的70%以上。第九、培養(yǎng)箱應(yīng)每天兩次檢查其使用溫度，培養(yǎng)箱應(yīng)置于室溫為16℃-27℃范圍的房間最佳。第十、所使用的玻璃器具要求完整無損，清洗后要進(jìn)行檢查，如果洗后表面有過多水珠附著，必須重洗。對(duì)于一種新的洗滌劑，使用前應(yīng)先檢驗(yàn)其是否會(huì)留下對(duì)生物有抑制性的殘留物。必要時(shí)采用溴麝香草酚蘭或其它指示劑抽樣進(jìn)行PH反應(yīng)試驗(yàn)。

2、微生物樣品檢測(cè)中的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境控制。主要表現(xiàn)為：第一、實(shí)驗(yàn)室要求有良好的通風(fēng)而且能夠避免灰塵、溫度變化，最終好能要用集中式空調(diào)，這樣一來即能減少雜菌污染，又能保證培養(yǎng)箱的穩(wěn)定操作和減輕培養(yǎng)基、分析天平的受潮問題。第二、設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)室，以要工作時(shí)使往來通行和訪客的影響能減少到最小程序?yàn)樵瓌t，并要具專門的區(qū)域供配制培養(yǎng)基和無菌操作用。第三、用光滑的最后一道漆覆蓋墻壁，使之易于清洗和消毒，地面要求使指定的材料，做到放滲水、光滑、易于清潔；工作臺(tái)高寬適當(dāng)、臺(tái)面要做到防止透水、抗腐蝕、光滑無逢。第四、保持高度標(biāo)準(zhǔn)的清潔空氣?？刹捎肦ODAC平皿、細(xì)菌密度平皿或拭抹法來監(jiān)測(cè)空氣和臺(tái)桌面。

3、水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測(cè)中的微生物樣品檢測(cè)對(duì)制成培養(yǎng)基的質(zhì)量控制。每次配制好的培養(yǎng)基應(yīng)記錄有配制人，配制日期，培養(yǎng)基名稱和配制批次、數(shù)量、滅菌溫度和所使用時(shí)間、PH值以及培養(yǎng)基中是否配有不穩(wěn)定成分等。并進(jìn)行無菌檢驗(yàn)及陽性的陰性對(duì)照培養(yǎng)檢查。

三、水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測(cè)中微生物樣品檢測(cè)及其結(jié)果評(píng)價(jià)分析

1、水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測(cè)中的微生物樣品檢測(cè)分析。微生物水樣采集后送至水質(zhì)檢測(cè)室，檢驗(yàn)中所用的一切用品必須是完全滅菌的，在滅菌前應(yīng)徹底洗滌干凈。培養(yǎng)基和稀釋液按規(guī)定要求進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。（1）檢測(cè)菌落總數(shù)的質(zhì)量控制。在接種前應(yīng)將水樣充分搖勻，是水中的細(xì)菌均勻分布于水中，水樣稀釋時(shí)應(yīng)小心沿管壁加入，不要觸及管內(nèi)稀釋液，以防吸管尖外側(cè)部分粘附的檢液混入其中，將水樣注入皿內(nèi)時(shí)，從皿側(cè)加入，不要揭去皿蓋，最后將吸管直立使水流空，并在皿底干燥處再擦一下吸管尖將余液排出，而不要吹出。為防止產(chǎn)生片狀菌落，水樣加入平皿后，在20分鐘內(nèi)向皿內(nèi)傾入營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，并立即混合均勻，皿內(nèi)瓊脂凝固后，不要放置長(zhǎng)久后才翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)，而應(yīng)于瓊脂凝固后，在數(shù)分鐘內(nèi)將平皿翻轉(zhuǎn)進(jìn)行培養(yǎng)，這樣可避免菌落蔓延生長(zhǎng)。（2）檢測(cè)大腸菌群的質(zhì)量控制。接種后搖動(dòng)試管，使水樣與乳糖發(fā)酵管混勻；乳糖發(fā)酵試驗(yàn)中常有產(chǎn)氣量少或產(chǎn)酸不產(chǎn)氣的情況，有時(shí)倒管內(nèi)雖無氣體，但在液面及管壁卻可以看到緩緩上浮的小氣泡，這時(shí)不要放棄，繼續(xù)做下一步證實(shí)實(shí)驗(yàn)。初發(fā)酵陽性則需進(jìn)一步革蘭染色和繼續(xù)接種培養(yǎng)觀察。挑取菌落數(shù)與大腸菌群的檢出率有密切關(guān)系，一定要挑取典型菌落，如無應(yīng)多挑幾個(gè)以防假陰性。

2、水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測(cè)中的微生物樣品檢測(cè)結(jié)果評(píng)價(jià)質(zhì)量控制。具體表現(xiàn)為：（1）操作方法精密度的度量。第一、從某一特種型式的一批水樣中，選出最先15個(gè)陽性水樣，做雙樣分析。第二、計(jì)算每個(gè)數(shù)據(jù)的對(duì)數(shù)，如果在任何一雙樣結(jié)果中有任一者為零，則都加1然后算對(duì)數(shù)值。第三、計(jì)算每個(gè)一雙對(duì)數(shù)的差城（用R表示），并且計(jì)算出這些差城的平均值（R）。第四、然后，取例行水樣中的10%，做雙樣分析。如果計(jì)算它們的差大于3.27R，則表示化驗(yàn)員的精密度失控制，這時(shí)就應(yīng)該否定自從上一次精密度檢查后的分析結(jié)構(gòu)。找出原因，方可繼續(xù)分析。（2）無菌性檢查。第一、每做一次試驗(yàn)，就必須用滅菌水為水樣，檢查培養(yǎng)基、濾膜、稀釋水、沖洗用水、玻璃器皿和器具的無菌性，如果有雜菌侵染，則用該材料做試驗(yàn)所得的數(shù)據(jù)應(yīng)該否定。第二、每次試驗(yàn)至少要對(duì)一個(gè)水樣做重復(fù)分析，原則上要對(duì)10%的水樣做出重復(fù)分析。第三、對(duì)多人操作的實(shí)驗(yàn)室，應(yīng)進(jìn)行對(duì)至少一個(gè)陽性水樣的平行分析，以便比較操作。

結(jié)束語

綜上所述，水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測(cè)在防治水污染、制定水環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)方面具有重要作用，并且水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測(cè)質(zhì)量保證是一種保證監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠的手段，是整個(gè)監(jiān)測(cè)過程的重要環(huán)節(jié)。在水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測(cè)中，水中微生物檢測(cè)是一項(xiàng)重要內(nèi)容，因此對(duì)水質(zhì)環(huán)境監(jiān)測(cè)的微生物檢測(cè)進(jìn)行分析具有重要意義。

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