子宮內(nèi)膜異位患者血清血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、胰島素樣生長(zhǎng)因子-I表達(dá)特征及其臨床應(yīng)用價(jià)值*

劉澤慧，楊曉杰

（1.河南省焦作市孟州市人民醫(yī)院 婦產(chǎn)科，河南 焦作 454750；2.河南省焦作煤業(yè)集團(tuán)中央醫(yī)院 婦產(chǎn)科，河南 焦作 454000）

子宮內(nèi)膜在正常情況下，生長(zhǎng)于子宮內(nèi)腔面，多種原因可使子宮內(nèi)膜生長(zhǎng)到子宮附件、子宮被覆面或機(jī)體其他部位，此種病理現(xiàn)象即稱作子宮內(nèi)膜異位癥（endometriosis, Ems）[1-3]。這種種植在異位的子宮內(nèi)膜組織不但具備內(nèi)膜間質(zhì)的圍繞且具有內(nèi)膜腺體的生長(zhǎng)，異位的內(nèi)膜組織還具有類腫瘤生長(zhǎng)之特性，多發(fā)生于30～40歲左右的女性，發(fā)病率大約在12%左右。EMs雖為良性婦科疾病，但內(nèi)膜組織由于雌、孕激素的刺激，其增殖能力很強(qiáng)并具備向周圍器官轉(zhuǎn)移的能力，從而產(chǎn)生多種病理反應(yīng)。Ems的發(fā)病機(jī)理目前雖未完全明了，但普遍認(rèn)為其與新生血管的增殖具有密切關(guān)系[4-6]。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor, VEGF），早期也稱為血管通透因子，有誘導(dǎo)血管新生的作用，集結(jié)于腹腔液中，促進(jìn)新血管的生成。類胰島素生長(zhǎng)因子-I（insulin-like growth factor-I, IGF-I）亦稱作“生長(zhǎng)激素介質(zhì)”，IGF-I是促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)、起到類胰島素效應(yīng)的因子。其在新陳代謝、內(nèi)分泌疾病、腫瘤等生理病理過(guò)程中起到重要作用，可較強(qiáng)地誘導(dǎo)血管、淋巴管的新生。本次研究旨在通過(guò)檢測(cè)患者VEGF和IGF-I于血清中的表達(dá)數(shù)值，觀察其在EMs中的表達(dá)特征及其對(duì)于EMs診斷與病情評(píng)估的價(jià)值，以為本病的臨床診斷與病情評(píng)估提供數(shù)據(jù)化支持，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2015年1月‐2016年6月收治的67例子宮內(nèi)膜異位癥的患者作為觀察組。觀察組入選患者均經(jīng)本院病理化驗(yàn)明確診斷；患者均可見(jiàn)痛經(jīng)表現(xiàn)，盆腔檢查時(shí)可見(jiàn)非活動(dòng)型囊性腫物。觀察組患者年齡為22～43歲，平均（35.42±8.22） 歲。依據(jù)美國(guó)生育協(xié)會(huì)（American Fertility Society,R-AFS）臨床分期標(biāo)準(zhǔn)對(duì)觀察組患者進(jìn)行分期[7]。觀察組患者R-AFS分期為：I～I(xiàn)I 期32例，年齡為 24～43歲，平均（35.13±8.51）歲，III～I(xiàn)V期35 例，年齡為22～43歲，平均（35.24±8.19）歲，比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t =0.937，P =0.352）。以本院同期收治的48例卵巢良性成熟畸胎瘤非EMs患者作為對(duì)照組，患者年齡為21～44歲，平均（34.96±8.53）歲。一般臨床資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞0.05），可滿足對(duì)比研究要求。兩組患者均在完全知曉本次研究?jī)?nèi)容與目的的基礎(chǔ)上自愿加入，并簽屬知情同意文件。本次研究向本院倫理委員會(huì)申報(bào)并獲得批準(zhǔn)及全程監(jiān)督。兩組入選的患者中均排除入選前6個(gè)月內(nèi)有激素應(yīng)用史者，合并其他相關(guān)內(nèi)分泌類疾病、子宮肌瘤等子宮病變、乳腺增生等疾病的患者，輸卵管結(jié)扎者及有重癥器質(zhì)性病變患者，有原蟲(chóng)病史患者，肝腎等重要臟器功能異常者。

1.2 方法

兩組患者均采集空腹外周靜脈血樣3 ml，于24～26℃無(wú)菌環(huán)境中靜置30 min，使用離心機(jī)按2 500 r/min的速度離心10 min，取得上層血清后于-80℃條件下儲(chǔ)存。檢測(cè)前于4℃條件下自然融化，如有雜質(zhì)按上述方法二次離心；試劑靜置30 min；將血清樣品與試劑分別充分混勻，按1︰50比例使用蒸餾水稀釋；按照試劑盒說(shuō)明書(shū)步驟檢驗(yàn)，將空白孔作為基準(zhǔn)調(diào)零，使用全自動(dòng)生化分析儀以免疫酶聯(lián)吸附法（enzyme linked immunosorbent assay, ELISA）測(cè)定各個(gè)樣品孔的吸光度值（OD值），得出VEGF和IGF-I的濃度，按稀釋倍數(shù)計(jì)算出樣品當(dāng)中的VEGF、IGF-I的表達(dá)水平。

1.3 觀察方法

將對(duì)照組與觀察組患者VEGF、IGF-I的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比；對(duì)比觀察組中I～I(xiàn)I期亞組與III～I(xiàn)V亞組VEGF、IGF-I檢測(cè)結(jié)果的差異。分析VEGF、IGF-I與EMs患者病情既R-AFS分期的相關(guān)性；計(jì)算VEGF、IGF-I表達(dá)水平對(duì)于子宮內(nèi)膜異位癥的診斷、臨床分期的應(yīng)用價(jià)值及尤登指 數(shù)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用SPSS 22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)處理。其中計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，對(duì)比采取t檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采取Spearman分析，診斷價(jià)值分析使用受試者工作特征曲線（receiver operating characteristic curve, ROC曲線）曲線下面積（area under curve, AUC）分析，診斷、分期臨界值使用ROC曲線尤登指數(shù)分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。AUC標(biāo)準(zhǔn)：0.5～0.7診斷價(jià)值較低，0.7～0.9診斷價(jià)值中等， ＞0.9診斷價(jià)值較高。相關(guān)性標(biāo)準(zhǔn)：0.3＜ |r| ＜0.5為低度相關(guān)，0.5＜|r| ＜0.8為中度相關(guān)，|r|≤0.8為高度相關(guān)。

2 結(jié)果

2.1 血清VEGF、IGF-I表達(dá)水平對(duì)比

觀察組患者血清VEGF、IGF-I表達(dá)水平均顯著高于對(duì)照組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 血清VEGF、IGF-I表達(dá)水平統(tǒng)計(jì)對(duì)比 （±s）

表1 血清VEGF、IGF-I表達(dá)水平統(tǒng)計(jì)對(duì)比 （±s）

組別 例數(shù) VEGF/(pg/ml) IGF-I/(ng/ml)對(duì)照組 48 117.69±30.16 77.84±11.93觀察組 67 188.25±30.42 125.49±12.19 t值 12.310 20.855 P值 0.000 0.000

2.2 不同分期對(duì)比

III～I(xiàn)V亞組患者血清VEGF、IGF-I表達(dá)水平均顯著高于I～I(xiàn)I期亞組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表2。

表2 不同分期VEGF、IGF-I表達(dá)水平對(duì)比 （±s）

表2 不同分期VEGF、IGF-I表達(dá)水平對(duì)比 （±s）

組別 例數(shù) VEGF/(pg/ml) IGF-I/(ng/ml)I～I(xiàn)I期 32 151.02±34.89 95.82±10.53 III～I(xiàn)V 期 35 202.35±37.97 139.06±9.92 t值 5.744 17.306 P值 0.000 0.000

2.3 相關(guān)性分析

臨床分期賦值：I級(jí)為1，II級(jí)為2，III級(jí)為3，IV級(jí)為4；血清VEGF、IGF-I表達(dá)水平與臨床分期間具有高度正相關(guān)性，0.8＜ r ＜1，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表3。

表3 EMs病情與VEGF、IGF-I水平相關(guān)性分析

2.4 對(duì)于EMs診斷的價(jià)值分析

血清VEGF、IGF-I檢測(cè)對(duì)于EMs診斷均具有較高診斷價(jià)值，AUC＞0.9，VEGF最佳診斷值為145.50 pg/ml，IGF-I最佳診斷值為 87.90 ng/ml，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；見(jiàn)表4，ROC曲線圖見(jiàn)圖1。

表4 ROC診斷價(jià)值分析

圖1 EMs診斷ROC曲線圖

2.5 對(duì)于EMs病情評(píng)估的價(jià)值分析

血清VEGF、IGF-I檢測(cè)對(duì)于EMs病情評(píng)估均具有較高診斷價(jià)值，AUC＞0.9，VEGF最佳診斷值為164.50 pg/ml，IGF-I最佳診斷值為107.50 ng/ ml；差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；見(jiàn)表5，ROC曲線圖見(jiàn)圖2。

表5 ROC診斷價(jià)值分析

圖2 EMs病情評(píng)估ROC曲線圖

3 討論

EMs是比較常見(jiàn)的婦科病，發(fā)病高峰為30～40 歲左右的女性。臨床主要癥狀有痛經(jīng)、性交痛，盆腔部位可捫及包塊且有壓痛等，嚴(yán)重者會(huì)導(dǎo)致不孕[8-10]。不孕女性中EMs的發(fā)病率約為29%。由于EMs具有類腫瘤樣轉(zhuǎn)移的特點(diǎn)，愈后患者復(fù)發(fā)率較高，給育齡婦女的身心帶來(lái)極大的負(fù)擔(dān)。雖然目前EMs的形成與演進(jìn)機(jī)制尚未完全明晰，但多認(rèn)為其發(fā)生與激素分泌異常、免疫功能調(diào)節(jié)異常、血管生成因素活躍有關(guān)。子宮內(nèi)膜的轉(zhuǎn)移種植、浸潤(rùn)生長(zhǎng)特性與惡性腫瘤細(xì)胞類似。子宮內(nèi)膜在異位種植且生長(zhǎng)的前提是在原有的毛細(xì)血管動(dòng)脈端或靜脈端的血管叢中生長(zhǎng)新的血管[11-13]。毛細(xì)血管外基質(zhì)的降解，血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖，形成血管芽胚，使新生血管達(dá)成聯(lián)通。EMs發(fā)病最初的病理表現(xiàn)主要為血管生成活躍，因此遏制血管異常生長(zhǎng)是臨床治療EMs的關(guān)鍵。VEGF的本質(zhì)屬于二聚體糖蛋白分子有關(guān)，可對(duì)血管的內(nèi)皮細(xì)胞形成刺激，從而發(fā)揮促使其異常分裂增殖的作用。IGF-I為肝細(xì)胞分泌形成的小分子多肽物質(zhì)，能夠顯著促進(jìn)細(xì)胞的分裂與增殖。VEGF、IGF-I均具有較強(qiáng)的促血管生成作用，因此其在EMs的形成與進(jìn)展過(guò)程均發(fā)揮重要促進(jìn)作用[14-15]。

本次研究中，觀察組VEGF、IGF-I表達(dá)水平顯著高于對(duì)照組，觀察III～I(xiàn)V亞組VEGF、IGF-I表達(dá)水平顯著高于觀察I～I(xiàn)I亞組，同時(shí)VEGF、IGF-I表達(dá)水平與臨床分期間具有高度正相關(guān)性。提示VEGF、IGF-I在EMs患者可見(jiàn)顯著升高表達(dá)，并且可隨病情進(jìn)展而進(jìn)一步升高表達(dá)。筆者對(duì)全部入選病例患者血清的VEGF、IGF-I表達(dá)水平進(jìn)行了ROC曲線分析，結(jié)果表明血清VEGF、IGF-I檢測(cè)對(duì)于EMs診斷具有較高診斷價(jià)值；本組數(shù)據(jù)表明當(dāng)血清中VEGF≥145.50 pg/ml、IGF-I≥87.90 ng/ml時(shí)結(jié)合臨床表現(xiàn)、醫(yī)學(xué)影像學(xué)檢查等可作出EMs初步診斷，通過(guò)病理檢查確診。通過(guò)對(duì)不同臨床分期患者血清的VEGF、IGF-I表達(dá)水平進(jìn)行ROC曲線分析證明，其對(duì)于EMs的病情評(píng)估具有較高的診斷價(jià)值，本組數(shù)據(jù)表明當(dāng)血清 中 VEGF≥164.50 pg/ml、IGF-I≥107.50 ng/ml時(shí)結(jié)合患者臨床表現(xiàn)等可評(píng)估為III～I(xiàn)V期EMs患者。由于本次研究共涉及67例EMs患者、48例非EMs患者，病例數(shù)較少，因此研究所得的診斷臨界值與病情評(píng)估臨界值仍有待于進(jìn)一步大數(shù)據(jù)研究校正。

綜上所述，EMs患者血清中的VEGF 和IGF-I的表達(dá)水平均可見(jiàn)明顯升高，并可隨病情進(jìn)展而進(jìn)一步升高；血清VEGF 和IGF-I表達(dá)水平的檢測(cè)對(duì)于EMs臨床診斷與病情評(píng)估均具有較高價(jià)值。鑒于血清VEGF 和IGF-I水平檢測(cè)具有較為便捷的操作性，建議將此項(xiàng)檢查作為EMs篩查、初診、病情或療效評(píng)估等的參考檢查手段應(yīng)用于臨床，以提高EMs早期診斷率，為臨床準(zhǔn)確分期、正確制定治療方案等提供數(shù)據(jù)化支持。