初探高校屏障環(huán)境動物實驗室綜合管理措施

崔光成 秦嫘 何寶國 丁麗艷 齊紹文

（1，黑龍江省齊齊哈爾醫(yī)學院 161000；2，黑龍江省畜牧研究所 161005）

實驗動物是生命科學研究的活載體和生物材料，是 “創(chuàng)新性國家”科技、產(chǎn)業(yè)發(fā)展的戰(zhàn)略性資源[1]。生命科學研究及相關(guān)產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展對動物實驗室、實驗動物行業(yè)人才隊伍提出了更高的要求，加強建設(shè)清潔級動物實驗室和實驗動物人才隊伍建設(shè)、建立健全規(guī)范化管理是我國實驗動物事業(yè)健康、快速、可持續(xù)發(fā)展的基礎(chǔ)。隨著動物實驗在科研和教學中應用的力度不斷加大，對實驗動物平臺的質(zhì)量和要求也與日俱增，動物實驗室的管理與正確使用越來越重要。

為了創(chuàng)造更加理想的科研實驗環(huán)境，優(yōu)化動物實驗室管理方法，保證科研和教學工作的順利開展，本人結(jié)合工作經(jīng)驗對加強屏障環(huán)境動物實驗室的管理方法進行探討。

1 屏障環(huán)境動物實驗室人員的管理

與實驗動物飼養(yǎng)、實驗、實施運行管理無關(guān)的人員不得進入屏障環(huán)境；出入設(shè)施的所有人員應過專業(yè)知識和業(yè)務(wù)技能培訓 （需持有上崗證），身體健康 （要求所有人員無過敏體質(zhì)，不攜帶傳染病且每年提供合格的體檢報告），具有良好的無菌衛(wèi)生觀念，熟悉實驗動物的法規(guī)和相關(guān)標準，嚴格執(zhí)行本單位制定的各種規(guī)章制度和SOP[2]。

1.1 飼養(yǎng)人員的管理

對屏障環(huán)境內(nèi)工作的飼養(yǎng)人員的管理是屏障環(huán)境動物實驗室管理的重要環(huán)節(jié)[3]。要求每一位飼養(yǎng)人員在上崗工作之前必須參加實驗動物從業(yè)人員的上崗培訓內(nèi)容，熟悉和掌握好中心的各項規(guī)章制度，考核合格方可進入屏障環(huán)境工作。飼養(yǎng)人員要有責任心，認真謹慎對待每天的飼養(yǎng)工作，平等細心的對待實驗動物。關(guān)于飼養(yǎng)人員在屏障環(huán)境中的操作流程圖見圖1。

1.2 實驗人員的管理

因為屏障環(huán)境設(shè)施為凈化環(huán)境，無關(guān)實驗人員一律不得進入設(shè)施內(nèi)環(huán)境。動物實驗人員進入和出入屏障環(huán)境時，必須嚴格執(zhí)行進入和離開屏障環(huán)境的程序：進入屏障環(huán)境的辦公休息、洗刷消毒等外環(huán)境時，應換好已消毒的外區(qū)拖鞋，進入一更衣間必須將隨身攜帶的所有物品均放入儲藏柜中，需傳入屏障環(huán)境的物品需通過傳遞窗傳遞，不得隨實驗人員一同進入屏障環(huán)境中[4]。脫去外衣進入消毒間后消毒雙手，脫去外間拖鞋，赤腳進入二更衣間。在二更中穿好已消毒的工作服裝、戴口罩、穿拖鞋、戴手套后方可進入緩沖間，通過清潔走廊進入動物室進行實驗操作。實驗人員的流向如圖2所示。

2 屏障環(huán)境動物實驗室物品的管理

禁止任何與實驗動物飼養(yǎng)或?qū)嶒灢僮鳠o關(guān)的物品進入屏障設(shè)施。必須傳入設(shè)施的物品在傳入屏障環(huán)境內(nèi)部前必須根據(jù)屏障設(shè)施內(nèi)的環(huán)境標準接受相應消毒處理。由于高壓蒸汽滅菌鍋、渡槽和傳遞窗等設(shè)備的消毒可靠性依次降低，所以在日常工作中，凡能耐高溫高壓滅菌的物品 （如墊料、籠具、飲水瓶、某些實驗用具等）均必須經(jīng)過高壓蒸汽滅菌后方可傳入屏障環(huán)境；不能經(jīng)過高壓滅菌，可以浸泡消毒的物品 （如拖鞋或塑料容器等）應經(jīng)過消毒液浸泡方可進入屏障環(huán)境內(nèi)；對于前兩者都不適宜的物品 （如紙、筆）需經(jīng)過傳遞窗處理后傳入屏障環(huán)境內(nèi)[5]。屏障環(huán)境動物實驗室內(nèi)物品的流向路線圖見圖3。

2.1 實驗動物飼料、墊料及飼養(yǎng)人員工作服裝的管理

屏障環(huán)境中實驗動物飼料均采用60CO照射滅菌 （2.5～3.0Mrad）飼料，由傳遞窗進入屏障環(huán)境儲藏室，儲藏間內(nèi)保持低溫、干燥衛(wèi)生，飼料需要離地放置。在日常使用時根據(jù)庫存情況先使用陳料飼喂，對于過期、變質(zhì)和受污染的飼料均需及時處理并對儲藏室消毒，禁止飼喂動物過期、變質(zhì)和受污染的飼料[6]。

圖1 飼養(yǎng)人員流向圖

圖2 實驗人員流向圖

墊料是實驗動物長期且直接接觸的環(huán)境條件，其功能在于吸收、保溫和改善居住條件。既關(guān)系到實驗動動物的健康，又影響動物實驗的準確性，所以對墊料的使用和儲存應格外重視。實驗動物使用墊料需放在專用的墊料儲藏室中，且保持儲藏室的通風干燥和衛(wèi)生條件。因購買的墊料均是滅菌墊料，使用前飼養(yǎng)人員需注意墊料袋的密封性，禁止使用漏氣墊料。

飼養(yǎng)人員一般工作服主要由猴服、拖鞋、口罩和手套等組成。猴服要求每周至少清洗一次，每次傳入二更之前必須經(jīng)過高壓滅菌；拖鞋每次使用后應及時清洗消毒，再傳入二更間。而口罩和手套為一次性衛(wèi)生用品，整包通過傳遞窗傳入二更間。

圖3 屏障環(huán)境動物實驗室物品流向圖

圖4 屏障環(huán)境動物實驗室動物流向圖

2.2 屏障環(huán)境內(nèi)實驗物品流向的管理

相關(guān)實驗物品一般由進入屏障環(huán)境內(nèi)工作的實驗人員整理，所有私人物品 （如手機、飾品）等禁止帶入屏障環(huán)境，與實驗相關(guān)必須帶入屏障環(huán)境內(nèi)的物品不得隨工作人員一同進入，需通過傳遞窗進入屏障環(huán)境內(nèi)。所有進入屏障環(huán)境的實驗物品應由實驗人員做好相應的消毒記錄，并以集中保管的形式存放，盡量降低對屏障環(huán)境內(nèi)部造成污染的可能。

3 屏障環(huán)境動物實驗室動物的管理

在生命科學研究中研究目的和方法的不同，所使用的實驗動物種類和品系也不同，在實驗動物進出屏障系統(tǒng)時，造成屏障環(huán)境污染的幾率比較大，容易在飼養(yǎng)和實驗中引起實驗動物污染[7]。因此，加強實驗室動物進入和離開屏障環(huán)境的管理體系是保證屏障環(huán)境動物實驗室正常運行的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。實驗動物進出屏障環(huán)境的主要流向如圖4所示。

3.1 外來動物進出屏障環(huán)境的管理

因?qū)嶒瀯游锓N類和品系有限，如有實驗要求購進外來動物并申請進入屏障環(huán)境實驗室的實驗人員，所選擇的動物必須來源于具有生產(chǎn)許可證的正規(guī)實驗動物提供單位，且應隨動物一同提交該購進動物有效的檢驗檢疫合格證明。飼養(yǎng)人員在接收外來動物時必須檢查動物外包裝的完整性，確認無誤后方可傳入洗消室。在傳入屏障環(huán)境后需隔離飼養(yǎng)4～7d，適應性飼養(yǎng)后再移入動物實驗室內(nèi)[8]。

3.2 日常動物飼養(yǎng)管理

近幾年在省科技廳的領(lǐng)導下，黑龍江省實驗動物與動物實驗管理工作逐漸走上標準化、規(guī)范化道路，實驗動物的科學管理體系基本建立并逐漸完善[9]。參照黑龍江省頒布實施的黑龍江省實驗動物相關(guān)標準細則，中心制定了一套科學有效的操作規(guī)程和管理制度，具體包括： 《屏障設(shè)施動物實驗室管理人員操作規(guī)程》、 《動物尸體及廢棄物處置操作規(guī)程》、 《飼料、墊料及緩沖間進出口障礙設(shè)施操作規(guī)程》、 《IVC使用操作規(guī)程》、《高壓蒸汽滅菌設(shè)備操作規(guī)程》、 《純水處理設(shè)備操作規(guī)程》、《實驗動物相關(guān)廢棄物儲存管理規(guī)范》等一系列的中心管理規(guī)程。要求飼養(yǎng)人員在日常飼養(yǎng)工作中耐心謹慎的對待飼養(yǎng)工作，對更換籠具、添加飲水和飼料和高壓滅菌消毒等行為都做出明確的要求，并嚴格按照管理規(guī)范對實驗動物產(chǎn)生的廢棄物分門別類，定期清理。

4 小結(jié)

良好的屏障環(huán)境動物實驗室的管理和運行需要不斷的實踐摸索和總結(jié)，結(jié)合實際工作中遇到的問題和挑戰(zhàn)，建立一套切合實際的屏障系統(tǒng)動物實驗室的運行管理措施。為了更好的科學管理屏障設(shè)施，為生命科學實驗提供更好的實驗環(huán)境平臺，最大限度地發(fā)揮屏障環(huán)境的功效，需要不斷總結(jié)歸納實際操作中的問題，找出其中的不足并加以改進。屏障環(huán)境管理過程中會涉及到多方面的問題和考驗，其運行模式和管理方式需要不斷探討，并逐漸得到完善，以適應不斷發(fā)展的生命科學的需要。