氣相法檢測(cè)α-乙?；?α-氯-γ-丁內(nèi)酯的含量

袁曉路，黃齊華，李凱，張 濤

（安徽國(guó)星生物化學(xué)有限公司，安徽省雜環(huán)化學(xué)實(shí)驗(yàn)室，安徽馬鞍山243000）

α-乙酰基-α-氯-γ-丁內(nèi)酯是合成農(nóng)藥殺菌劑丙硫菌唑的重要中間體。丙硫菌唑主要用于防治谷類、麥類和豆類等作物的病害，其以殺菌活性強(qiáng)、高藥效、低毒性、低殘留的優(yōu)點(diǎn)吸引了研究人員的廣泛關(guān)注。隨著丙硫菌唑?qū)＠磳⒃跉W美到期，國(guó)內(nèi)掀起了一股建設(shè)生產(chǎn)丙硫菌唑的熱潮。因此建立丙硫菌唑的中間體α-乙?；?α-氯-γ-丁內(nèi)酯的檢測(cè)方法十分必要。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 實(shí)驗(yàn)儀器

色譜儀：氣相色譜島津GC-2014C;檢測(cè)器:氫火焰離子化（FID）檢測(cè)器；色譜工作站：N2000雙通道色譜工作站；色譜柱：10%SE-30（45 m×0.32 mm×0.5μm）非極性填充柱。

1.2 氣相色譜操作條件

色譜柱的柱溫為80℃～230℃程序升溫，初始溫度80℃的停留時(shí)間為5.0 min，升溫速率為15.0℃/min，當(dāng)氣化室溫度為230℃，停留時(shí)間是15 min，檢測(cè)器的溫度為 260℃。色譜柱總壓力（N2）200 kPa，載氣（N2）壓力為 80 kPa；助燃?xì)猓諝猓?0 kPa；燃?xì)猓℉2）55 kPa，分流比為1∶1。進(jìn)樣體積為2.0μL；保留時(shí)間：丙酮約為4.3 min，α-乙酰基-α-氯-γ-丁內(nèi)酯約為13.0 min。丙酮和α-乙酰基-α-氯-γ-丁內(nèi)酯的試樣色譜圖如圖1。

1.3 試劑

α-乙?；?α-氯-γ-丁內(nèi)酯（99.5%）標(biāo)準(zhǔn)樣品；α-乙?；?α-氯-γ-丁內(nèi)酯自制樣品；丙酮（99.9%）溶劑。

圖1 α-乙?；?α-氯-γ-丁內(nèi)酯試樣色譜圖

1.4 測(cè)定步驟

（1）制備標(biāo)準(zhǔn)溶液

稱取0.05 g（精確至0.0002 g）α-乙酰基-α-氯-γ-丁內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)樣品置于100 mL容量瓶中，用丙酮溶解并稀釋至刻度，搖勻。

（2）制備試樣溶液

稱取0.01 g（精確至0.0002 g）α-乙?；?α-氯-γ-丁內(nèi)酯自制樣品置于100 mL容量瓶中，用丙酮溶解并稀釋至刻度，搖勻。

（3）不同標(biāo)準(zhǔn)樣品的配制

用移液管分別移取 1.0、3.0、6.0、8.0、10.0 mL 標(biāo)準(zhǔn)液于10.0 mL容量瓶中，用丙酮溶劑稀釋，搖勻，靜置，編號(hào)順序依次為1號(hào)、2號(hào)、3號(hào)、4號(hào)、5號(hào)。

（4）測(cè)定

在上述操作條件不變和色譜基線平穩(wěn)的狀態(tài)下，連續(xù)注入標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液，直至連續(xù)兩針標(biāo)準(zhǔn)溶液的響應(yīng)值峰面積小于1.5%后，按照樣品順序1～5號(hào)，依次從低到高濃度進(jìn)樣。待測(cè)樣品試樣溶液最后連續(xù)注入數(shù)次，直至試樣溶液的連續(xù)兩次圖譜峰面積小于1.5%。

（5）計(jì)算

將標(biāo)準(zhǔn)溶液和試樣溶液的α-乙?；?α-氯-γ-丁內(nèi)酯圖譜峰面積分別取平均值，試樣中的α-乙?；?α-氯-γ-丁內(nèi)酯質(zhì)量分?jǐn)?shù)ω（%）按下式計(jì)算：

式中：A1為α-乙?；?α-氯-γ-丁內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)溶液峰面積的平均值；A2為α-乙?；?α-氯-γ-丁內(nèi)酯樣品溶液峰面積的平均值；m1為α-乙?；?α-氯 -γ-丁內(nèi)酯標(biāo)樣質(zhì)量，g；m2為 α-乙?；?α-氯 -γ-丁內(nèi)酯試樣質(zhì)量，g；φ 為 α-乙?；?α-氯-γ-丁內(nèi)酯標(biāo)樣的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜柱的選擇

本實(shí)驗(yàn)首先對(duì)非極性SE-30、弱極性SE-54、強(qiáng)極性HP-50三種不同極性的填充柱選?。河捎讦?乙?；?α-氯-γ-丁內(nèi)酯的極性較強(qiáng)，導(dǎo)致在強(qiáng)極性HP-50柱上的保留能力嚴(yán)重，無(wú)峰形出現(xiàn)，無(wú)法進(jìn)行測(cè)定；在弱極性SE-54柱上雖有峰形出現(xiàn)，但具有少量的拖尾現(xiàn)象，可能會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性；在非極性SE-30柱上，峰形較好，無(wú)拖尾峰、小雜峰，樣品與溶劑能分離完全。因此選用10%SE-30柱作為本實(shí)驗(yàn)的色譜柱。

2.2 校準(zhǔn)曲線的繪制

采用外標(biāo)法定量，依次在氣相色譜儀GC-2014C注入1～5號(hào)不同質(zhì)量濃度（c）的標(biāo)樣溶液，按照上述操作方法測(cè)定，以α-乙?；?α-氯-γ-丁內(nèi)酯的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)圖譜峰面積（?。榭v坐標(biāo)（如表1），對(duì)二者數(shù)據(jù)進(jìn)行回歸分析，得到的線性回歸方程（如圖 2）：А=117 116.8c+102.684 2，R2=0.999 23，由此可知：α-乙?；?α-氯-γ-丁內(nèi)酯的質(zhì)量濃度為0.05～0.50 g/L時(shí)，線性關(guān)系良好。

表1 校準(zhǔn)曲線數(shù)據(jù)

2.3 精密度測(cè)定

圖2 校準(zhǔn)曲線

表2 實(shí)驗(yàn)精密度結(jié)果

在上述線性范圍內(nèi)，按照上述操作方法，準(zhǔn)確稱取α-乙?；?α-氯-γ-丁內(nèi)酯6個(gè)試樣品并分別對(duì)其測(cè)定，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表2，α-乙?；?α-氯-γ-丁內(nèi)酯的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.019 72，變異系數(shù)為0.021%。

2.4 準(zhǔn)確度測(cè)定

表3 實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確度結(jié)果

在5個(gè)α-乙?；?α-氯-γ-丁內(nèi)酯已知試樣中分別加入一定量的α-乙?；?α-氯-γ-丁內(nèi)酯的標(biāo)樣，配成一定質(zhì)量濃度的樣品溶液，按照上述操作方法進(jìn)行測(cè)定（如表3），測(cè)得平均回收率為99.9%。