肖麗華，傅慶萍，唐芹芳，顏冬梅，金浩，孫明忠

（東南大學醫(yī)學院附屬鹽城醫(yī)院檢驗科，江蘇鹽城224001）

霍亂弧菌為革蘭陰性弧菌，棲居于海洋水產(chǎn)品及小海鮮類動物腸道和體表。根據(jù)菌體脂多糖抗原的不同，目前可將其分為210多個血清群［1］，其中O1群和O139群是引起急性腸道傳染病的病原菌，感染后可導致嚴重的腹瀉和嘔吐［2］。歷史上出現(xiàn)過的7次世界性霍亂大流行均由O1群引起。

2017年8月本實驗室從1例膽囊結石患者血培養(yǎng)中分離出霍亂弧菌O1群小川型，并經(jīng)江蘇省疾病預防控制中心確證。因為從血培養(yǎng)中檢出霍亂弧菌O1群，國內罕見［3］，現(xiàn)予以報告。

1 病例資料

患者，男，64歲，已婚，因右上腹痛伴發(fā)熱、皮膚黃染3 d就診?；颊邿o明顯誘因下出現(xiàn)右上腹持續(xù)性脹痛不適，逐漸加重，伴惡心嘔吐、畏寒發(fā)熱、尿黃、皮膚黃染，體溫最高39.0℃，大便2～3次／d，為黃色水樣便。入院時白細胞計數(shù)為13.22×109／L，中性粒細胞百分比為 93.3%，總膽紅素 93.28 μmol／L；CT檢查示膽囊結石，膽囊炎，膽總管擴張。

入院后規(guī)范采集患者血標本進行細菌培養(yǎng)，16 h后需氧瓶與厭氧瓶提示細菌生長，及時轉種至血平板、巧克力平板和麥康凱平板。24 h后血平板上見濕潤、光滑、具有綠色金屬光澤且呈β溶血的菌落生長（圖1）；麥康凱平板上見光滑、邊緣整齊、不發(fā)酵乳糖菌落生長。菌落涂片為革蘭陰性，弧形或逗點狀細菌（圖2）；挑取單個菌落制成懸滴，在鏡下呈中速或快速穿梭狀運動。全自動微生物鑒定儀VITEK-2 Compact鑒定結果為霍亂弧菌，生物編號為0425611350506201，置信度94%。玻片法血清凝集試驗（寧波天潤生物藥業(yè)有限公司）發(fā)現(xiàn)該分離株生理鹽水不自凝，O139群不凝，O1群多價凝集，小川型出現(xiàn)凝集，明確該分離株為霍亂弧菌O1群小川型。

參照臨床微生物實驗室操作規(guī)程進行藥敏試驗，該分離株對16種抗生素均敏感。左氧氟沙星的最小抑菌濃度（minimum inhibitory concentration，MIC）≤0.25μg／mL，頭孢他啶、頭孢曲松、頭孢吡肟、氨曲南、慶大霉素以及妥布霉素的MIC均≤1μg／mL，氨芐西林、氨芐西林舒巴坦和阿米卡星MIC均≤2μg／mL，哌拉西林他唑巴坦、頭孢唑林、頭孢替坦和亞胺培南均≤4μg／mL，呋喃妥因≤16μg／mL，復方新諾明≤20μg／mL。對患者行腹腔鏡下膽囊切除術后，予以環(huán)丙沙星等抗感染、保肝、補液對癥治療，生命體征平穩(wěn)，恢復良好，保肝抗炎后總膽紅素為18.74μmol／L，白細胞計數(shù)為 7.15×109／L，中性粒細胞百分比為69.9%。后續(xù)復查血培養(yǎng)3套，均未檢出細菌；同時送檢糞便標本培養(yǎng)，未檢出霍亂弧菌。

圖1 血平板菌落形態(tài)

圖2 菌落涂片革蘭染色鏡檢（×1 000）

2 討論

O1群霍亂弧菌引起菌血癥的原因至今尚不明確，目前報道的菌株大多從免疫力低下的患者血液中分離。本例從膽囊結石患者血液中分離出O1群霍亂弧菌為江蘇報道的首例，其侵入血液途徑機制尚不清楚［4］?；颊叱錾⑸L于江蘇鹽城，否認有血吸蟲疫水疫區(qū)接觸史，否認工業(yè)毒物、粉塵、放射性物質等接觸史。發(fā)病前未接觸過海水、河水，未接觸過腹瀉患者，家人也未發(fā)生過腹瀉，同時否認發(fā)病前曾生食或食用未經(jīng)煮熟的海產(chǎn)品或水產(chǎn)品，其居住地附近也未發(fā)生過水污染事件。

患者入院治療后總膽紅素逐漸下降至正常，推測黃疸的原因之一可能是O1群霍亂弧菌侵入血液。肝病或免疫力低下患者若被霍亂弧菌感染容易導致菌血癥或敗血癥。Restrepo等［5］研究指出hlyA編碼的霍亂溶血素在疾病的發(fā)生過程中可能起到一定作用，使得腸道中的霍亂弧菌通過腸黏膜侵入血液，提示霍亂弧菌的溶血能力也可能是重要的致病因素；同時，rtx編碼的細胞毒素可引起炎癥反應［6］。本例患者初入院時白細胞計數(shù)為13.22×109／L，中性粒細胞百分比93.3%，治療后白細胞計數(shù)為7.15×109／L，中性粒細胞百分比為69.9%，恢復至正常；本例患者伴有發(fā)熱而沒有嚴重腹瀉，有待于進一步研究其致瀉性毒力基因如 ctxA、ctxB、ace、cep、zot、tcpA和 cri等［7-8］。

研究發(fā)現(xiàn)不同血清群霍亂弧菌的毒力因子在外環(huán)境中容易發(fā)生轉移。大多數(shù)非致病性霍亂弧菌經(jīng)過復雜的進化和變異，可獲得毒力而有效地定殖在人類小腸并釋放腸毒素致病；同時非流行株和非產(chǎn)毒株也可感染人體引起腹瀉?；魜y弧菌毒力基因的分布特性為毒力因子的轉移提供了環(huán)境毒力貯存庫，成為霍亂持續(xù)流行的重要因素之一。