結核感染T細胞斑點試驗在結核性腦膜炎診斷中的價值

張麗婷 張齊龍 葉琳 況衛(wèi)豐 段允和

[摘要]目的 研究結核性腦膜炎患者采取結核感染T細胞斑點試驗（T-SPOT.TB）診斷的臨床價值。方法 選取2016年3月～2017年10月我院收治的30例可疑的結核性腦膜炎患者作為研究組，另選取35例無結核原發(fā)病灶的腦膜炎患者作為對照組，均進行T-SPOT.TB試驗，觀察兩組的診斷結果。結果 所有患者經(jīng)過T-SPOT.TB試驗，診斷結果的陽性率為76.67%（23/30），明顯高于對照組的14.29%（5/35）（P<0.05）。結論 T-SPOT.TB試驗在結核性腦膜炎診斷中具有重要意義，能夠明顯提高診斷結果的準確性，快速診斷疾病。

[關鍵詞]腦膜炎；結核感染T細胞斑點試驗；結核?。辉\斷價值

[中圖分類號] R181.3 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2018）11（c）-0074-03

[Abstract] Objective To study the clinical value of T-cell spot of tuberculosis （T-SPOT.TB） in the diagnosis of tubercular meningitis. Methods A total of 30 suspected patients with tubercular meningitis treated in our hospital from March 2016 to October 2017 were selected as the research group， and 35 non-TB primary meningitis patients were selected as the control group. The T-SPOT.TB test was applied to observe its diagnosis results. Results After the T-SPOT.TB test in the cerebrospinal fluid， the positive diagnosis rate in the research group was 76.67% （23/30）， which was significantly higher than that in the control group （14.29%[5/35]）（P<0.05）. Conclusion The T-SPOT.TB test is of great importance to improve the diagnosis accuracy and make an early diagnosis of tubercular meningitis.

[Key words] Meningitis； T-cell spot of tuberculosis； Tubercular； Diagnosis value

結核性腦膜炎是指結核分枝桿菌經(jīng)過血液循環(huán)或者其他途徑進入患者腦內(nèi)，從而造成中樞神經(jīng)系統(tǒng)結核病。加之疾病極易牽連腦膜受損，同時可對腦實質(zhì)、腦動脈、脊髓以及腦神經(jīng)產(chǎn)生侵犯，成為臨床上威脅人們生命安全的主要疾病[1]。由于患者一般起病較為緩慢，大部分患者主要表現(xiàn)為間斷性頭痛，基本可以忍受，可能耽誤就診時間，甚至被誤診為其他原因所致的頭痛。若臨床上未及時采取有效治療，隨著病情不斷加重，患者可能產(chǎn)生嚴重后遺癥，甚至死亡，因此如何選擇準確有效的診斷方式成為臨床研究重點[2-3]。本研究選取我院收治的30例可疑的結核性腦膜炎患者與35例無結核原發(fā)病灶的腦膜炎患者作為研究對象，旨在探討結核感染T細胞斑點試驗（T-SPOT.TB試驗）在結核性腦膜炎患者診斷中的價值，現(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2016年3月～2017年10月我院收治的30例可疑的結核性腦膜炎患者作為研究組，另選取35例無結核原發(fā)病灶的腦膜炎患者作為對照組。研究組男19例，女11例；年齡16～72歲，平均（43.8±2.9）歲；均經(jīng)過抗結核化療后出現(xiàn)好轉(zhuǎn)或者痊愈。對照組男21例，女14例；年齡18～72歲，平均（44.1±2.8）歲；病毒性腦膜炎16例，化膿性腦膜炎14例，隱球菌性腦膜炎5例。兩組的一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），具有可比性。本研究已經(jīng)我院醫(yī)學倫理委員會批準同意。

納入標準：①研究組患者主要的臨床表現(xiàn)為頭痛、發(fā)熱等，僅MRI檢查顯示為腦積水，并伴有肉芽增生，懷疑為結核性腦膜炎[4]。②所有患者及家屬同意并自愿加入本次研究中。③資料齊全者。

排除標準：①合并嚴重心腦血管疾病者。②合并精神類疾病者，無法配合研究。③妊娠或者哺乳期婦女[5]。

1.2方法

收集所有患者的血液（5 ml），將其置于含有肝素鋰抗凝劑的試管中，嚴格按照T-SPOT.TB試驗流程，在Ⅱ級別的安全柜中完成操作。另外收集患者含有肝素鋰抗凝劑的外周靜脈血（5 ml），置于淋巴細胞分離液中（6 ml），利用密度梯度離心方式收集單個核細胞層。最后由經(jīng)驗豐富的檢驗人員在無菌操作下，將外周血細胞標本濃度調(diào)整至2.5×106個/ml的工作液待檢。

選取細胞懸液100 μl置于預包被IFN-γ的PVDF板，每個樣本均設置測試孔A、B作為陰性對照，陽性對照4個孔。其中陰性對照中僅含有細胞懸液，陽性對照中放置植物血凝素（5 UL），選擇抗原ESAT-6與CFP-10分別加入實驗孔中，記為A、B，同時放置于5%的 CO2孵箱中，溫度維持37℃，時間控制在16～24 h，最后放入顯色劑，靜置7 min，查看吸水紙的終止反應。

1.3觀察指標

利用全自動讀板儀器計算斑點，測試孔A、B的陽性判斷標準：陰性對照孔斑點數(shù)在0～5，測試孔A與B的斑點數(shù)-陰性對照組孔斑點數(shù)≥6；陰性對照孔斑點數(shù)≥6時，測試孔A與B的斑點數(shù)≥2倍陰性對照組孔斑點數(shù)。

1.4統(tǒng)計學方法

采用SPSS 18.0統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行分析，計量資料以均數(shù)±標準差（x±s）表示，采用t檢驗，計數(shù)資料采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結果

兩組外周血下T-SPOT.TB試驗陽性率比較，研究組診斷陽性23例，陽性率為76.67%，對照組診斷陽性5例，陽性率為14.29%，研究組診斷結果的陽性率高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。

3討論

近年來，我國結核性腦膜炎發(fā)生率日趨增長，臨床主要通過患者的臨床表現(xiàn)以及積液性質(zhì)進行疾病診斷，雖然取得了一定的診斷價值，但極易出現(xiàn)漏診誤診現(xiàn)象，耽誤最佳治療時間[7-8]。隨著疾病不斷進展，患者可能出現(xiàn)意識障礙、顱內(nèi)壓升高、癲癇以及截癱等，直接降低生活質(zhì)量，并嚴重威脅患者生命安全[9-10]。若臨床上未及時發(fā)現(xiàn)，可能直接影響患者治療及預后，因此如何迅速并準確判斷疾病成為醫(yī)療界研究重點。

結核性腦膜炎屬于常見的肺外結核類型，既往多采取免疫法、微生物法等進行診斷。隨著檢驗技術不斷發(fā)展與完善，常規(guī)診斷方式已經(jīng)無法滿足臨床要求，經(jīng)過多次研究后發(fā)現(xiàn)，采取T-SPOT.TB試驗診斷效果較好，主要檢測受結核菌特異性抗原刺激后，產(chǎn)生干擾素的外周血特異性T細胞情況，從而明確結合感染[11-12]。相關報道中顯示，活動性肺結核分值桿菌感染患者采取T-SPOT.TB試驗進行診斷，結果的敏感度較高[13]。但目前我國關于T-SPOT.TB試驗在結核性腦膜炎診斷中的報道較少，本研究中將外周血應用于T-SPOT.TB試驗中，結果顯示研究組診斷結果的陽性率為76.67%，高于對照組的14.29%（P<0.05），提示研究組外周血下T-SPOT.TB試驗結果的陽性率、靈敏度及特異度較高，能夠準確區(qū)別結核性腦膜炎與無結核原發(fā)病灶的腦膜炎，為患者治療方案的選擇提供保障。T-SPOT.TB試驗中將患者血液作為檢驗樣本，獲得方式較為簡便。同時從單個細胞水平檢驗，能夠快速獲得細胞周邊分泌的細胞因子，因此敏感性較高，耗時較少，臨床可快速得到結果[14-15]。另外T-SPOT.TB試驗經(jīng)過觀察效應T淋巴細胞來觀察機體中是否含有病原體，為治療效果的評估提供參考依據(jù)[16]。

綜上所述，T-SPOT.TB試驗在結核性腦膜炎診斷中具有重要意義，可進一步提高陽性率，保證診斷結果的準確，為患者治療及預后提供保障。

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