鄒艷紅　周紅林

【摘 要】 宮頸癌是女性常見(jiàn)的惡性腫瘤，99.7% 的宮頸癌的發(fā)生發(fā)展與人乳頭瘤病毒（HPV）特別是高危型 HPV 密切相關(guān)。早期預(yù)防、診斷以及治療癌前病變是防控宮頸癌的關(guān)鍵，因此，需要采取合理的篩查方案。HPV—E6/E7 mRNA檢測(cè)可以更好地反應(yīng)體內(nèi)病毒的復(fù)制及表達(dá)，是一種早期診斷宮頸癌有效的方法。本文就宮頸癌的基本情況、臨床上檢測(cè)HPV方法的缺陷以及HPV—E6/E7 mRNA檢測(cè)的優(yōu)點(diǎn)進(jìn)行了綜述。

【關(guān)鍵詞】HPV—E6/E7 mRNA；；宮頸病變；生物學(xué)標(biāo)志物

【中圖分類號(hào)】R730.4 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】1672-3783（2018）10-03--01

宮頸癌是女性常見(jiàn)的惡性腫瘤，99.7% 的宮頸癌的發(fā)生發(fā)展與人乳頭瘤病毒（HPV）特別是高危型 HPV 密切相關(guān)[1]。早期預(yù)防、診斷以及治療癌前病變是防控宮頸癌的關(guān)鍵，因此，需要采取合理的篩查方案。本文就宮頸癌的基本情況、臨床上檢測(cè)HPV方法的缺陷以及HPV—E6/E7 mRNA檢測(cè)的優(yōu)點(diǎn)進(jìn)行了綜述。

1 宮頸癌的發(fā)病機(jī)制

宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展主要包括HPV的傳播、病毒持續(xù)感染和復(fù)制、癌前病變以及浸潤(rùn)等，某些步驟以額可以在疾病的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中扭轉(zhuǎn)。由宮頸上皮內(nèi)瘤變發(fā)展為宮頸原位癌大約需要經(jīng)過(guò)3-8年的時(shí)間，因此，可以采取及早的預(yù)防措施，以減少疾病的發(fā)生。

2 宮頸癌的診斷措施

目前，我國(guó)針對(duì)宮頸癌主要采用“三階梯篩查”方案進(jìn)行臨床診斷，以“細(xì)胞學(xué)”為基礎(chǔ)，依靠陰道鏡檢查或病理組織學(xué)檢查等確診。但是，上述檢測(cè)結(jié)果是感染后HPV的結(jié)果，還由于部分細(xì)胞受到多種因素的影響，未能出現(xiàn)典型的癥狀，加上檢測(cè)過(guò)程中的失誤等原因，導(dǎo)致漏診率較高。因此，臨床上亟待一種客觀的標(biāo)志物能夠盡早的檢出宮頸病變，以改善患者的預(yù)后。

3 HPV致癌機(jī)制

HPV感染率較高，約99.7%的宮頸癌患者感染了HPV，另有超過(guò)90%的患者感染HPV后無(wú)臨床癥狀或是暫時(shí)無(wú)臨床癥狀，也可以在1-2年內(nèi)通過(guò)自身免疫系統(tǒng)的清除作用自愈。HPV基因有8個(gè)編碼基因，對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)刺激作用最大的是E6、E7基因，其編碼的E6、E7癌蛋白可以干擾細(xì)胞周期，導(dǎo)致惡性腫瘤的發(fā)生與發(fā)展[2]。E6蛋白可以通過(guò)E6-AP與p53蛋白特異性的結(jié)合形成復(fù)合物，促使p53蛋白降解，其效應(yīng)等同于p53突變。E7蛋白與pRb有較高的親和性，使得G1期進(jìn)入S期所需基因得以轉(zhuǎn)錄，細(xì)胞周期失控從而發(fā)生永生化。

4 HPV—E6/E7 mRNA檢測(cè)

不論HPV病毒處于游離還是整合狀態(tài)，只要轉(zhuǎn)錄出mRNA，均可以通過(guò)HPV—E6/E7 mRNA檢測(cè)反應(yīng)體內(nèi)病毒的復(fù)制，能夠準(zhǔn)確的反映機(jī)體感染HPV后的狀態(tài)。高危型HPV E6、E7 mRNA檢測(cè)HPV—E6/E7 mRNA含量可以有效的反映HPV致癌基因 E6/E7的活動(dòng)度，直觀地對(duì)宮頸癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)以及預(yù)后做出評(píng)估。HPV—E6/E7 mRNA檢測(cè)可以判斷病毒基因是否整合入宿主基因組中以及區(qū)分HPV的狀態(tài)，在早期篩查宮頸癌以及分類等方面具有重要的意義。當(dāng)出現(xiàn)HPV假陽(yáng)性時(shí)，患者會(huì)產(chǎn)生緊張、焦慮的不良情緒，造成心理負(fù)擔(dān)及過(guò)度診療。近年來(lái)，新的檢查技術(shù) HR-HPV E6/ E7mRNA 的應(yīng)用同時(shí)兼顧敏感度和特異度，與病理活檢符合程度高。HPV—E6/E7 mRNA的出現(xiàn)就發(fā)揮了其獨(dú)特的作用，是一項(xiàng)很有前途的、值得推廣的檢測(cè)技術(shù)，尤其是對(duì)高危型的HPV病毒持續(xù)性感染婦女的診斷更具有實(shí)際的臨床應(yīng)用價(jià)值。

與正常細(xì)胞比較，腫瘤細(xì)胞中 HPVE6、E7mRNA的含量較高，在正常細(xì)胞中，HPV E6、E7mRNA 的表達(dá)值為0.8～1.2灰度區(qū)間，>l即可診斷為陽(yáng)性。E6、E7mRNA表達(dá)陽(yáng)性提示：①宮頸細(xì)胞感染HPV；②E6、E7病毒癌基因處于活動(dòng)期；③宮頸細(xì)胞處于活躍期；④患者的患癌風(fēng)險(xiǎn)較高[3]。

檢測(cè)高危亞型的 HPVE6/ E7mRNA 的轉(zhuǎn)錄有利于宮頸癌的早期診斷、控制發(fā)展及預(yù)后監(jiān)測(cè)。Massimo Origoni[4]等認(rèn)為，在評(píng)估宮頸病變進(jìn)展及風(fēng)險(xiǎn)方面，HPV E6、E7mRNA具有強(qiáng)大的潛力。E6與E7共同表達(dá)具有協(xié)同作用，可以顯著增強(qiáng)轉(zhuǎn)化能力，促使細(xì)胞過(guò)度增殖，導(dǎo)致患者發(fā)生宮頸癌，E6、E7mRNA檢測(cè)在宮頸癌的診斷方面具有較高的價(jià)值[5]。王華等[6]檢測(cè)了262例宮頸疾病婦女，發(fā)現(xiàn)宮頸病變的程度越高，HPVE6、E7mRNA的表達(dá)也越高。

HPV檢測(cè)還可以作為宮頸高度病變手術(shù)療效的判斷以及隨訪的監(jiān)測(cè)手段。研究表明，宮頸錐切術(shù)后檢測(cè)HPV E6、E7mRNA，可以有效的預(yù)測(cè)殘留CIN，靈敏度以及陰性預(yù)測(cè)值均較高。術(shù)后6-12個(gè)月，HPV E6、E7mRNA檢測(cè)結(jié)果顯示陰性，可以提示病灶清除比較徹底。宮頸組織中HPV E6/E7mRNA的表達(dá)說(shuō)明HPV病毒活性較高，檢測(cè)HR—HPV E6/E7 mRNA轉(zhuǎn)錄物能夠發(fā)現(xiàn)HPV癌基因的活化狀態(tài)，有利于HPV感染的診斷以及預(yù)測(cè)病變的進(jìn)展風(fēng)險(xiǎn)。

5 展望

HR-HPV E6/E7 mRNA 的表達(dá)是導(dǎo)致宮頸細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化并發(fā)展至宮頸癌的必要過(guò)程，因此，能夠更加精確的預(yù)測(cè)細(xì)胞向高度病變和癌癥轉(zhuǎn)變的可能性。HRHPV E6/E7 mRNA 和 TCT 聯(lián)合檢測(cè)能提高陽(yáng)性檢出率， 防止漏診。對(duì)宮頸病變的早期發(fā)現(xiàn)，早期治療及治療后隨訪均體現(xiàn)出它獨(dú)有的生物學(xué)價(jià)值，有深遠(yuǎn)的臨床價(jià)值，值得推廣后使用。

參考文獻(xiàn)

Goldberg RM Meropol NJ Tabernero J，et al. Accomplishments in 2008 in the treatment of advanced metastatic colorectal cancer[J]. Gastrointest Cancer Res，2009，3（Suppl 2）： S23-S27.

Andersson E，Karrberg C，Radberg T，et a1.Type—specific human papillomavirus E6、E7mRNA detection by real—time PCR improves identification of cervical neoplasia[J].J Clin Microbiol，201l，49（11）：3794-3799.

熊旭光，李昌水，等.高危HPV DNA及其E6、ETmRNA對(duì)宮頸病 變的影響[J].上海預(yù)防醫(yī)學(xué)，2015，27（2）：77-78.

Massimo O，Paolo C，Ouia C，et a1.Presence ofHigh一融sk HPV mRNA in Relation to Future High--Grade Lesions among High·-Risk HPV DNAPositive Women with Minor Cytological Abnormalities[J]. ecance92015，9：533.

江偉敏，姚有余.HPV E6、E7mRNA檢測(cè)與宮頸病變發(fā)展的相關(guān) 性研究[J].安徽醫(yī)藥，2014，18（10）.

王華，陳亞寶，葉麗華，等.應(yīng)用支鏈DNA技術(shù)檢測(cè)人乳頭瘤病 毒E6、ETmRNA在宮頸疾病篩查中的價(jià)值[J].中華臨床醫(yī)師雜志（電子版），2011，5（15）：4362—4366.