朱月琴

【摘要】 目的：探討宮頸DNA異倍體檢測與宮頸組織病變的相關(guān)性。方法：以2015年1月-2016年6月筆者所在醫(yī)院婦科門診宮頸病變篩查提示異常的80例患者為研究對象，全部患者均行宮頸DNA異倍體檢測和病理組織學(xué)活檢，對比分析兩種檢測結(jié)果。結(jié)果：CINⅠ級、CINⅡ級、CINⅢ級和宮頸癌患者DNA異倍體檢出率依次為93.33%（14/15）、100%（12/12）、95.0%（19/20）和100%（8/8）；以DNA異倍體陽性診斷宮頸組織病變的敏感性為96.36%，以中量以上DNA異倍體陽性診斷宮頸組織病變的特異性為84.0%。DI值為2.5～3的患者CIN Ⅰ級發(fā)病率最高（40.0%），DI值為3～4的患者CINⅢ級發(fā)病率最高（70.59%），DI值≥4的患者宮頸癌發(fā)病率最高（60.0%）。結(jié)論：宮頸DNA異倍體檢測是確診宮頸組織病變的重要參考指標(biāo)，其應(yīng)用不僅具備良好敏感性和特異性，還能為腫瘤發(fā)展級別的判定提供細(xì)胞學(xué)信息，值得推廣使用。

【關(guān)鍵詞】 宮頸DNA； 異倍體檢測； 宮頸病變

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2017.4.023 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 B 文章編號 1674-6805（2017）04-0044-02

宮頸DNA異倍體檢測技術(shù)是近年研發(fā)并投入使用的一種新型細(xì)胞學(xué)檢查技術(shù)，臨床實(shí)踐發(fā)現(xiàn)，借助液基薄層細(xì)胞學(xué)技術(shù)及全自動DNA圖像分析技術(shù)，宮頸DNA異倍體檢測的應(yīng)用可顯著降低診斷假陰性率[1]。本文旨在探究宮頸DNA異倍體細(xì)胞生物學(xué)特性及其在診斷宮頸組織病變中的應(yīng)用價值，為臨床診斷及預(yù)測宮頸病變發(fā)展趨勢提供依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

以2015年1月-2016年6月筆者所在醫(yī)院婦科門診宮頸病變篩查提示異常的80例女性患者為研究對象。入選患者年齡25～55歲，平均（40.2±8.7）歲；患者孕次0～7次，平均（2.3±0.6）次；患者產(chǎn)次0～3次，平均（1.7±0.4）次。病例排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）宮頸接觸性出血；（2）急性生殖道炎癥；（3）宮頸手術(shù)史；（4）近期內(nèi)服用過性激素類藥物[2]。全部患者均簽署知情同意書，知曉本次研究目的并能主動配合。

1.2 方法

1.2.1 宮頸DNA異倍體檢測方法 異倍體檢查前要求3 d內(nèi)無性生活史、陰道治療及沖洗，不使用避孕劑。取樣：患者截石位，由專業(yè)醫(yī)師在窺陰器直視下將特制宮頸刷的刷頭插入宮頸口，使中央刷絲入宮頸管內(nèi)，兩側(cè)刷絲抵宮頸外口黏膜面，沿同一方向旋轉(zhuǎn)宮頸刷3～5圈采集脫落的細(xì)胞標(biāo)本，隨后立刻拔下刷頭，浸入樣品保存液中，送檢。制作涂片：樣本入DNA實(shí)驗(yàn)室后均常規(guī)高速離心，取細(xì)胞懸液，經(jīng)Bohm-Sprenger固定和Feulgen染色等操作制成液基薄層細(xì)胞涂片。檢測：全部涂片均以全自動細(xì)胞圖像分析儀進(jìn)行掃描和分析，各涂片細(xì)胞監(jiān)測個數(shù)≥3000個，檢測報(bào)道由細(xì)胞點(diǎn)陣分布圖和DNA倍體分析直方圖完成，統(tǒng)計(jì)各涂片中最大倍體數(shù)及異倍體細(xì)胞數(shù)所占比例。

1.2.2 病理組織學(xué)活檢方法 全部患者均于非經(jīng)期進(jìn)行陰道鏡檢查，觀察宮頸形態(tài)、血管走形等，常規(guī)醋酸染色、碘著色等，依改良Reid陰道鏡評分指導(dǎo)宮頸活檢?；顧z取材標(biāo)準(zhǔn)如下：（1）改良Reid 0分者，取材部位為宮頸轉(zhuǎn)化區(qū)3、6、9、12點(diǎn)；（2）改良Reid 1分及以上者，宮頸病變區(qū)取材。病理組織學(xué)活檢結(jié)果：正常-陰性；良性-陰性；宮頸上皮內(nèi)瘤變（CINⅠ～Ⅲ級）-陽性；宮頸癌-陽性。

1.3 細(xì)胞DNA異倍體判定標(biāo)準(zhǔn)

宮頸細(xì)胞DNA含量測定以DI（DNA指數(shù)）表示，正常細(xì)胞的DI值為1～2，DI≥2.5的細(xì)胞為5 C非整倍體細(xì)胞。DNA異倍體判定標(biāo)準(zhǔn)：（1）陰性：0個DI值≥2.5的細(xì)胞；（2）少量DNA異倍體異常：1-2個DI值≥2.5的細(xì)胞；（3）中量DNA異倍體異常：3-10個DI值≥2.5的細(xì)胞；（4）大量DNA異倍體異常：10個以上DI值≥2.5的細(xì)胞[3]。

2 結(jié)果

2.1 DNA異倍體檢測結(jié)果

CINⅠ級、CINⅡ級、CINⅢ級和宮頸癌患者DNA異倍體檢測檢出率依次為93.33%（14/15）、100%（12/12）、95.00%（19/20）和100%（8/8）。以DNA異倍體陽性（1個以上DI值≥2.5的細(xì)胞）診斷宮頸組織病變的敏感性為96.36%（53/55），特異性為64.00%（16/25）；以中量以上DNA異倍體陽性（3個以上DI值≥2.5的細(xì)胞）診斷宮頸組織病變的敏感性為70.91%（39/55），特異性為84.00%（21/25），見表1。

2.2 不同DI值患者的活檢結(jié)果

80例患者中，62例患者DI值≥2.5（DNA異倍體異常陽性）。其中，35例DI值在2.5～3（56.45%），17例DI值在3～4（27.42%），10例DI值≥4（16.13%），見表2。統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，DI值為2.5～3的患者CIN Ⅰ級發(fā)病率最高，為40.0%（14/35），DI值為3～4的患者CIN Ⅲ級發(fā)病率最高為70.59%（12/17），DI值≥4的患者宮頸癌發(fā)病率最高，為60.0%（6/10），提示患者DI值可能與宮頸組織病變嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。

3 討論

宮頸癌是婦科臨床常見惡性腫瘤，近年來發(fā)病日趨年輕化，嚴(yán)重威脅女性生命健康。現(xiàn)階段，隨著宮頸細(xì)胞學(xué)篩查的使用和推廣，宮頸癌及癌前病變的早期診斷率得到顯著提高，這對于降低宮頸癌發(fā)病率及死亡率而言具有重要意義。Demirel等[4]以細(xì)胞學(xué)樣本圖像分析細(xì)胞DNA，發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞增殖除了與細(xì)胞分裂存在密切關(guān)聯(lián)外，也受細(xì)胞核DNA復(fù)制的影響，當(dāng)細(xì)胞發(fā)生癌變時，其原有DNA含量、排列等會出現(xiàn)改變，從而致DNA倍體異常細(xì)胞出現(xiàn)。這為臨床基于DNA倍體數(shù)量進(jìn)行病變判斷提供了重要理論依據(jù)。

林丹等[5]以液基細(xì)胞學(xué)和DNA倍體檢測對宮頸病變患者進(jìn)行篩查，結(jié)果顯示DNA倍體檢測下CIN Ⅲ檢出率93.5%，宮頸癌檢出率98.5%，高于液基細(xì)胞學(xué)檢出率，與本文研究中CIN Ⅲ級檢出率（95.0%）和宮頸癌檢出率（100%）基本一致，說明高級別宮頸病變患者幾乎都可檢測出存在DNA異倍體細(xì)胞。有文獻(xiàn)報(bào)道指出，液基細(xì)胞學(xué)診斷宮頸病變的敏感度為32.7%，本次臨床研究中，以DNA異倍體陽性和中量以上DNA異倍體陽性對宮頸病變診斷的敏感性分別為96.36%（53/55）和70.91%（39/55），高于液基細(xì)胞學(xué)診斷，與梅金紅等[6]報(bào)道的DNA異倍體陽性診斷率（94.8%）基本一致，高于其報(bào)道的中量以上DNA異倍體陽性診斷率（42.8%），考慮可能與研究病例存在個體差異有關(guān)。李紅霞等[7]以DNA倍體分析診斷宮頸鱗狀上皮內(nèi)病變，結(jié)果顯示其陽性檢出率（89.62%）顯著高于宮頸液基細(xì)胞學(xué)的陽性檢出率（62.75%），較高的準(zhǔn)確性對提高宮頸病變早期診斷率具有重要意義。

值得一提的是，測定DNA含量及倍體數(shù)量是現(xiàn)階段臨床判定細(xì)胞生理狀態(tài)及病變改變的主要方式方法，但是關(guān)于DNA異倍體DI值與宮頸組織病變間關(guān)系問題則研究較少。本次臨床研究對DNA指數(shù)超過2.5的患者進(jìn)行劃分，結(jié)果顯示，DI值為2.5～3的患者CIN Ⅰ級發(fā)病率最高（40.0%），DI值為3～4的患者CIN Ⅲ級發(fā)病率最高（70.59%），DI值≥4的患者宮頸癌發(fā)病率最高（60.0%），提示患者DNA指數(shù)與高級別宮頸病變發(fā)生率之間可能存在某種相關(guān)性，但臨床目前對此尚無明確結(jié)論，有待擴(kuò)展病例進(jìn)一步深入研究。

總之，宮頸DNA異倍體檢測是確診宮頸組織病變的重要參考指標(biāo)，其應(yīng)用不僅具備良好敏感性和特異性，還能為腫瘤發(fā)展級別的判定提供細(xì)胞學(xué)信息，值得推廣使用。

參考文獻(xiàn)

[1]曾紅云，郭以寶，周張雷，等.宮頸DNA倍體分析與組織學(xué)診斷宮頸上皮內(nèi)瘤變的意義[J].實(shí)用醫(yī)技雜志，2016，23（6）：659-660.

[2]徐姍，梅金紅，韓永良，等.宮頸脫落細(xì)胞DNA定量分析與薄層液基細(xì)胞學(xué)檢查在宮頸早期病變篩查中的應(yīng)用比較[J].廣東醫(yī)學(xué)，2013，34（9）：1387-1390.

[3]呂曉杰，曹冬如，蔣紅清，等.高危型人乳頭瘤病毒負(fù)荷量與宮頸細(xì)胞DNA倍體定量關(guān)系的探討[J].中國婦幼保健，2015，30（22）：3781-3783.

[4] Demirel D，Akyürek N，Ramzy I，et al.Diagnostic and prognostic significance of image cytometric DNA ploidy measurement in cytological samples of cervical squamous intraepithelial lesions[J].Cytopathology，2013，24（2）：105-112.

[5]林丹，羅新，趙麗琴，等.液基細(xì)胞學(xué)和DNA倍體檢測篩查宮頸病變的臨床研究[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2014，14（22）：4273-4276.

[6]梅金紅，徐姍，韓永良，等.不能明確意義的不典型鱗狀細(xì)胞伴DNA倍體異常在宮預(yù)早期病變篩查中的意義[J].中華病理學(xué)雜志，2013，42（12）：829-832.

[7]李紅霞，趙煥，高亮，等.宮頸液基細(xì)胞學(xué)與DNA倍體分析診斷宮頸鱗狀上皮內(nèi)病變的準(zhǔn)確性[J].診斷病理學(xué)雜志，2013，20（9）：567-570.

（收稿日期：2016-10-23）