■林 謙 李 闖 張 旭 侯振平 蔣桂韜* 戴求仲，

（1.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院麻類研究所，湖南長沙410205；2.湖南省畜牧獸醫(yī)研究所動物營養(yǎng)與飼養(yǎng)技術(shù)研究室，湖南長沙410131）

淀粉是谷類飼糧糖類物質(zhì)的主要成分，占到畜禽所需能量來源的40%以上，占畜禽生產(chǎn)成本的50%以上[1]。而淀粉分子根據(jù)其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)可以分為支鏈淀粉和直鏈淀粉兩類[2]。直鏈淀粉由葡萄糖分子以α-D-l,4糖苷鍵連接而成的鏈狀多糖分子；而支鏈淀粉則是每隔多個葡萄糖單位就出現(xiàn)一個分支，分支內(nèi)如直鏈淀粉一樣葡萄糖分子仍以α-D-l,4糖苷鍵相連，但分支點(diǎn)處葡萄糖分子則以α-D-l,6糖苷鍵相連，支鏈淀粉整體結(jié)構(gòu)呈樹枝狀[3-4]。劉利曉等[5]報道畜禽日糧合適的直支鏈淀粉比有利于改善動物的生產(chǎn)性能，而目前畜禽飼料以玉米-豆粕型日糧為主，其中支鏈淀粉占總淀粉含量的75%～85%，直支鏈淀粉比并不均衡，這就造成了日糧的浪費(fèi)。為了充分發(fā)揮日糧的能量供給與營養(yǎng)潛力，有必要通過一定手段來調(diào)控日糧的直支鏈淀粉比，以達(dá)到最優(yōu)水平。普魯蘭酶是一類淀粉脫支酶，能專一性切割普魯蘭多糖、支鏈淀粉以及一些含有支鏈的糊精中α-1,6-糖苷鍵，形成直鏈淀粉等[6]。目前，普魯蘭酶多用于食品、加工行業(yè)，能夠調(diào)節(jié)淀粉材料的直支鏈淀粉比[7]，但在飼料領(lǐng)域還未見有相關(guān)研究應(yīng)用報道。因此，本試驗(yàn)以雌性臨武鴨為試驗(yàn)動物，分別飼喂5種不同普魯蘭酶水平日糧，主要目的在于探討日糧不同普魯蘭酶水平對3～28日齡試鴨生長性能、養(yǎng)分表觀利用率和主要器官指數(shù)的影響，以期為普魯蘭酶在飼料工業(yè)中的應(yīng)用以及臨武鴨的養(yǎng)殖生產(chǎn)實(shí)踐提供科學(xué)的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

酶制劑為固體普魯蘭酶制劑，酶活≥2 000 IU/g。

1.2 試驗(yàn)動物與設(shè)計

試驗(yàn)采用單因子隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計，選擇體重接近的健康3日齡雌性臨武鴨480只，隨機(jī)分成6個處理，處理Ⅰ為飼喂基礎(chǔ)日糧的對照組，處理Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和處理Ⅵ則分別在基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)上添加100、150、200、250 g/t和300 g/t酶制劑，每處理設(shè)5個重復(fù)，每個重復(fù)16羽鴨，各處理間試鴨初始體重?zé)o顯著差異（P＞0.05），試驗(yàn)全期為25 d。

1.3 試驗(yàn)日糧及營養(yǎng)水平

基礎(chǔ)日糧參照地方標(biāo)準(zhǔn)《DB43/T 869—2014臨武鴨營養(yǎng)需要》[8]中臨武鴨生長前期營養(yǎng)需要，選用玉米、豆粕、次粉等原料配制，各組日糧營養(yǎng)水平保持一致，基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。試驗(yàn)日糧由湖南省畜牧獸醫(yī)研究所飼料廠生產(chǎn)。

表1 試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧組成和營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1.4 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)在湖南省畜牧獸醫(yī)研究所試驗(yàn)鴨場進(jìn)行，試鴨采用網(wǎng)上平養(yǎng)，自由飲水和采食，并按常規(guī)免疫，24 h光照；舍內(nèi)自然通風(fēng)，定期打掃衛(wèi)生和消毒，保持正常溫度，相對濕度為（60±5）%。

1.5 測定指標(biāo)與方法

1.5.1 生長性能指標(biāo)

分別于試鴨3日齡和28日齡晨（08:00）對試鴨進(jìn)行空腹稱重。試驗(yàn)期間準(zhǔn)確記錄各重復(fù)耗料量，試驗(yàn)結(jié)束時稱剩料重，并計算初重、末重、平均日增重、平均日采食量和料重比。

1.5.2 養(yǎng)分表觀利用率

采用酸不溶灰分法（AIA）進(jìn)行養(yǎng)分表觀利用率及表觀代謝能分析試驗(yàn)。試驗(yàn)流程及方法按照戴求仲等[9]的報道進(jìn)行。試鴨日糧和排泄物中能量采用全自動氧彈量熱儀測定，干物質(zhì)、粗脂肪、粗蛋白質(zhì)、粗纖維、酸性洗滌纖維和中性洗滌纖維含量則參照張麗英主編的《飼料分析與飼料質(zhì)量檢測技術(shù)》[10]進(jìn)行檢測；AIA含量則參照國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 23742—2009的方法進(jìn)行檢測。養(yǎng)分表觀利用率和表觀代謝能計算公式如下：養(yǎng)分表觀利用率（%）=100-日糧中AIA含量×排泄物中養(yǎng)分含量×100/（排泄物中AIA含量×日糧中養(yǎng)分含量）；表觀代謝能（AME，MJ/kg）=（日糧能量水平×排泄物中AIA水平-排泄物中能量水平）/（日糧干物質(zhì)水平×排泄物中AIA水平-排泄物中干物質(zhì)水平）。

1.5.3 器官指數(shù)

于飼養(yǎng)試驗(yàn)28日齡晨，每個重復(fù)挑選接近平均體重的試驗(yàn)鴨1羽，稱活體重后屠宰，分別取其內(nèi)臟器官心臟、肝臟、脾臟、腺胃、肌胃、法氏囊、胰腺及腸道稱重，并測量腸道長度，隨后按以下公式計算內(nèi)臟器官指數(shù)：器官指數(shù)（g/kg）=器官重/活體重，腸道長度指數(shù)（cm/kg）=腸道總長度/活體重。

1.6 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2007軟件進(jìn)行初步處理后，采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行單因素方差分析（oneway ANOVA），若組間差異顯著，則采用Duncan's法進(jìn)行多重比較，顯著水平為P＜0.05。試驗(yàn)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 試驗(yàn)結(jié)果與分析

2.1 日糧不同普魯蘭酶水平對臨武鴨生長性能的影響(見表2)

表2 日糧不同普魯蘭酶水平對臨武鴨生長性能的影響

由表2可知，日糧不同普魯蘭酶添加水平對3～28日齡臨武鴨生長性能各指標(biāo)均無顯著影響（P＞0.05）。不過添加100 g/t和150 g/t普魯蘭酶的2個試驗(yàn)處理試鴨平均日增重較對照處理Ⅰ分別高出2.15%和0.87%。另外，試驗(yàn)除日糧250 g/t普魯蘭酶添加水平處理的試鴨料重比高于對照處理Ⅰ外，其它4個普魯蘭酶添加水平處理的料重比低于或與對照處理Ⅰ持平。故從生長性能結(jié)果角度考慮，3～28日齡雌性臨武鴨玉米-豆粕型日糧中普魯蘭酶添加水平以100～200 g/t為宜。

2.2 日糧不同普魯蘭酶水平對臨武鴨養(yǎng)分表觀利用率的影響(見表3)

由表3可知，日糧添加不同水平普魯蘭酶對臨武鴨干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗纖維、中性洗滌纖維及酸性洗滌纖維的表觀利用率均無顯著性影響（P＞0.05）。不過日糧添加了普魯蘭酶的試驗(yàn)處理試鴨粗蛋白質(zhì)表觀利用率均高于對照處理Ⅰ，且處理Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和處理Ⅵ試鴨粗蛋白質(zhì)表觀利用率分別比對照處理Ⅰ提高了8.58%、8.81%、12.47%、14.84%和14.31%。日糧添加100 g/t普魯蘭酶的處理Ⅱ試鴨的表觀代謝能最高，分別較對照處理Ⅰ和處理Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ提高了0.24%（P＞0.05）、8.09%（P＞0.05）、17.59%（P＜0.05）、6.45%（P＞0.05）、26.62%（P＜0.05）。

表3 日糧不同普魯蘭酶水平對臨武鴨養(yǎng)分表觀利用率的影響

2.3 日糧不同普魯蘭酶水平對臨武鴨器官指數(shù)的影響(見表4)

由表4可知，日糧中添加不同水平的普魯蘭酶對28日齡臨武鴨的脾臟、法氏囊、胰腺、肝臟、心臟、腺胃、腸道指數(shù)及腸道長度指數(shù)均無顯著影響（P＞0.05）。而處理Ⅳ試鴨的肌胃指數(shù)最高，分別較處理Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ、Ⅵ提高了28.07%（P＜0.05）、23.04%（P＜0.05）、24.10%（P＜0.05）、23.15%（P＜0.05）和 19.21%（P＞0.05）。

3 討論

3.1 日糧不同普魯蘭酶水平對臨武鴨生長性能的影響

表4 日糧不同普魯蘭酶水平對臨武鴨器官指數(shù)的影響

普魯蘭酶是一種重要的淀粉脫支酶類，其結(jié)構(gòu)與淀粉水解酶類似，能催化水解如支鏈淀粉、普魯蘭糖以及糖原等中的α-1,6糖苷鍵[11]。目前，普魯蘭酶多用于食品、加工行業(yè)，能夠調(diào)節(jié)淀粉材料的直支鏈淀粉比[7]，但在飼料領(lǐng)域還未見有相關(guān)研究應(yīng)用報道。而有多項報道指出畜禽日糧淀粉直支鏈淀粉比對動物的生長性能有重要影響，合適的日糧淀粉直支鏈淀粉比能改善畜禽的生長性能[1-2，12]。本試驗(yàn)中，雖然日糧不同普魯蘭酶添加水平對3～28日齡臨武鴨生長性能各指標(biāo)均無顯著影響，但添加100 g/t和150 g/t普魯蘭酶的2個試驗(yàn)處理試鴨平均日增重較未添加普魯蘭酶的對照處理Ⅰ分別高出2.15%和0.87%，另外，處理Ⅱ、Ⅳ和處理Ⅵ試鴨的料重比均低于未添加普魯蘭酶的對照處理Ⅰ，說明3～28日齡雌性臨武鴨玉米-豆粕型日糧中添加普魯蘭酶水平在100～200 g/t時有改善試鴨生長性能的效果。究其原因，一方面可能是日糧添加100～200 g/t普魯蘭酶能夠正好將日糧的淀粉直支鏈淀粉比調(diào)節(jié)到適宜生長的水平，另一方面，可能是普魯蘭酶的添加提高了日糧中抗性淀粉的水平所致。而抗性淀粉是一類不能被健康動物小腸吸收，但可能被后腸的微生物發(fā)酵利用的淀粉或淀粉降解物的總稱[13]，具有益生作用，能改善動物生長性能[11]。Ozturk等[14]研究發(fā)現(xiàn)普魯蘭酶脫支玉米淀粉后，使得抗性淀粉的含量顯著上升，這說明本試驗(yàn)在臨武鴨玉米-豆粕型日糧中添加普魯蘭酶后也可能增加了日糧中抗性淀粉的水平，從而改善試鴨的生長性能。

3.2 日糧不同普魯蘭酶水平對臨武鴨養(yǎng)分表觀利用率的影響

日糧養(yǎng)分利用率的高低直接影響著家禽的生長速度和生產(chǎn)性能[15]，而戴求仲等[1]報道給肉雞分別飼喂直支鏈淀粉比為0.11、0.23、0.35、0.47的試驗(yàn)日糧，結(jié)果發(fā)現(xiàn)日糧各氨基酸的代謝率除蘇氨酸、蛋氨酸和賴氨酸直支鏈淀粉比0.23日糧組略低于直支鏈淀粉比0.11的日糧組外，其他各氨基酸代謝率均以直支鏈淀粉比0.23日糧組最高；日糧表觀代謝能值也以直支鏈淀粉比0.23日糧組最高，達(dá)到15.20 MJ/kg，顯著高于其他各組。這些都說明適宜的日糧淀粉直支鏈淀粉比可提高家禽對養(yǎng)分的利用率。而普魯蘭酶作為一種可以調(diào)節(jié)淀粉材料直支鏈淀粉比的酶制劑，添加于家禽日糧可能亦具有改善家禽養(yǎng)分利用率的潛能。本研究結(jié)果則顯示日糧添加100 g/t普魯蘭酶的處理Ⅱ試鴨的表觀代謝能最高，且日糧添加了普魯蘭酶的試驗(yàn)處理試鴨粗蛋白質(zhì)表觀利用率均高于對照處理Ⅰ，這些都說明普魯蘭酶的添加有利于改善試鴨的養(yǎng)分利用率。傳統(tǒng)認(rèn)為淀粉在動物消化道內(nèi)能被完全消化，并水解為葡萄糖吸收，而葡萄糖和氨基酸是消化道代謝的主要能量來源。故本試驗(yàn)中，在日糧內(nèi)添加適宜水平的普魯蘭酶能改善養(yǎng)分利用率的原因可能還是因?yàn)槿占Z普魯蘭酶的添加改變了淀粉的直支鏈淀粉比，進(jìn)而可能改變消化道中葡萄糖的供給狀態(tài)，并節(jié)省消化道內(nèi)氨基酸用于氧化供能，最終影響蛋白質(zhì)和能量的代謝[1，16]。

3.3 日糧不同普魯蘭酶水平對臨武鴨主要器官指數(shù)的影響

器官指數(shù)可以一定程度地反映動物器官發(fā)育是否正常、代謝是否旺盛、功能是否完善等情況，并在一定水平上反映動物機(jī)體的健康狀況[17]。本試驗(yàn)中，日糧添加不同水平普魯蘭酶對28日齡臨武鴨的脾臟、法氏囊、胰腺、肝臟、心臟、腺胃、腸道指數(shù)及腸道長度指數(shù)均無顯著影響，這在一定程度上說明日糧添加普魯蘭酶不會影響試鴨的臟器發(fā)育及功能。而日糧添加200 g/t普魯蘭酶的處理Ⅳ試鴨肌胃指數(shù)最高，且顯著高于對照處理Ⅰ和處理Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ。肌胃是禽類特有的消化器官之一，有發(fā)達(dá)的肌肉壁，內(nèi)壁覆有一層硬的角質(zhì)膜，內(nèi)腔含有一些小砂粒，用于磨碎食物。本試驗(yàn)結(jié)果說明日糧添加200 g/t普魯蘭酶對試鴨肌胃的生長發(fā)育具有一定的促進(jìn)作用，但其機(jī)理還有待進(jìn)一步研究確定。

4 結(jié)論

綜合表明，以生長性能、養(yǎng)分表觀利用率和器官指數(shù)為評價標(biāo)準(zhǔn)，在本試驗(yàn)條件下，3～28日齡臨武鴨日糧普魯蘭酶添加水平在100～200 g/t為宜。