王一棟，陳艷，王雙雙，杜文玲，鄭永克

（1.溫州市中心醫(yī)院 老年醫(yī)學(xué)科，浙江 溫州 325000；2.溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院 骨科，浙江 溫州325027；3.溫州市中心醫(yī)院 婦產(chǎn)科，浙江 溫州 325000）

肌少癥是一種漸進(jìn)性和全面的骨骼肌丟失及力量減退的綜合征，并可能導(dǎo)致機(jī)體殘疾、生活質(zhì)量下降甚至死亡的不良后果[1-2]。與骨質(zhì)疏松相比，肌少癥近10年來才逐漸受到重視。2016年，中華醫(yī)學(xué)會骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病分會發(fā)表了肌少癥共識，提高了我國醫(yī)務(wù)工作者對肌少癥的認(rèn)識，規(guī)范了我國肌少癥的臨床診療工作[2]。肌少癥是增齡相關(guān)疾病，是環(huán)境和遺傳因素共同作用的復(fù)雜疾病，多種風(fēng)險(xiǎn)因素和機(jī)制參與其發(fā)生[2-5]。其機(jī)制包括運(yùn)動減少、神經(jīng)-肌肉功能減弱、增齡相關(guān)激素變化、促炎性反應(yīng)細(xì)胞因子水平增高、肌細(xì)胞凋亡、遺傳因素、營養(yǎng)因素等。本研究從外周血淋巴細(xì)胞亞群水平來初步探討肌少癥患者的發(fā)病機(jī)制。

1 對象和方法

1.1 對象 選取2017年6月至2018年2月溫州市中心醫(yī)院老年醫(yī)學(xué)科就診的老年患者120例，年齡61～86歲，平均（70.2±6.8）歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：近期有感染（感染時(shí)間＜1個月）、炎癥性疾病、自身免疫疾病、惡性腫瘤、嚴(yán)重的營養(yǎng)不良及嚴(yán)重的器官功能不全（包括心力衰竭、呼吸衰竭、肝功能不全、腎功能不全等）的患者。本研究經(jīng)本院倫理委員會批準(zhǔn)，所有患者均簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 肌少癥診斷標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)2016年中華醫(yī)學(xué)會骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病分會發(fā)表的肌少癥共識的標(biāo)準(zhǔn)[2]。采用雙能X線吸收測量儀（dual energy X-ray absorptiometry，DXA）檢測肌量，四肢肌量指數(shù)[四肢肌量（kg）/身高2（m2）]：男性＜7.26 kg/m2，女性＜5.45 kg/m2。肌少癥診斷流程見圖1。

1.2.2 分組：依據(jù)肌少癥診斷標(biāo)準(zhǔn)，分為肌少癥組和非肌少癥組，其中肌少癥患者48例，非肌少癥患者72例。入組后行血常規(guī)、淋巴細(xì)胞亞群、血C-反應(yīng)蛋白（C-reactive protein，CRP）等檢查。

1.2.3 檢測方法：采用免疫熒光雙標(biāo)記法和流式細(xì)胞儀檢測入組患者外周血中T淋巴細(xì)胞及其亞群[包括總T淋巴細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞（CD3-CD56+）、NK樣細(xì)胞（CD3+CD56+）、記憶T細(xì)胞（CD4+CD45RO+）、初始T細(xì)胞（CD4+CD45RA+）、雙陰T淋巴細(xì)胞（CD3+CD4-CD8-）]；采用血液細(xì)胞分析儀和全自動生化分析儀分別檢測血常規(guī)及CRP。

圖1 肌少癥診斷流程圖

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法 采用SPSS24.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料用 ±s表示，2組間比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以率表示，2組間比較采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2組患者臨床基線資料比較 2組患者的年齡、性別、體質(zhì)量指數(shù)、吸煙比例、高血壓比例、糖尿病比例差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

2.2 2組患者血常規(guī)及淋巴細(xì)胞亞群檢測結(jié)果比較 肌少癥組患者外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)、NK細(xì)胞（CD3-CD56+）、CRP較非肌少癥組高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。而2組間總淋巴細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK樣細(xì)胞（CD3+CD56+）、記憶T細(xì)胞（CD4+CD45RO+）、初始T細(xì)胞（CD4+CD45RA+）、雙陰T淋巴細(xì)胞（CD3+CD4-CD8-）水平的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

表1 2組患者臨床基線資料比較

3 討論

研究顯示，免疫系統(tǒng)在肌少癥的發(fā)生、發(fā)展中扮演重要的角色，全身炎性反應(yīng)導(dǎo)致肌肉組織合成代謝失衡，蛋白分解代謝增加[6-8]。而免疫細(xì)胞是免疫系統(tǒng)的功能單元，承擔(dān)免疫防御、免疫監(jiān)視和免疫自穩(wěn)的功能。包括中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、NK細(xì)胞等，而臨床上應(yīng)用最多的指標(biāo)是外周血白細(xì)胞。CRP是伴隨組織損傷、局部缺血、急性感染與炎癥反應(yīng)而升高的一種血漿蛋白質(zhì)，可以介導(dǎo)炎癥和促進(jìn)炎癥反應(yīng)的發(fā)生、抑制受損組織和聚集的吞噬細(xì)胞釋放血管活性物質(zhì)和多種蛋白質(zhì)分解酶的活性、免疫調(diào)節(jié)、清除炎癥物質(zhì)和修復(fù)損傷的組織等功能[9-10]。本研究結(jié)果顯示，肌少癥患者外周血的白細(xì)胞計(jì)數(shù)和CRP均顯著高于非肌少癥組，提示機(jī)體存在微炎癥狀態(tài)。這與COLLERTON等[11]的研究結(jié)果相似，在肌少癥患者中，白細(xì)胞計(jì)數(shù)和中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)較無肌少癥患者高。隨著年齡的增加，中性粒細(xì)胞的趨化功能下降，遷移效率減退，導(dǎo)致組織受損和繼發(fā)的全身炎癥反應(yīng)[12-14]。中性粒細(xì)胞的趨化功能下降，聯(lián)系著肌細(xì)胞持續(xù)的PI3-K信號的表達(dá)，通過PI3-K/Akt/mTOR信號途徑使肌肉分解代謝增加，從而引起肌肉量減少[14-15]。FERNáNDEZ-GARRIDO等[16]發(fā)現(xiàn)，中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)越高，患者的身體活動能力越差。在60歲以上的健康老年人中，白細(xì)胞計(jì)數(shù)的高低能預(yù)測10年后患者的衰弱程度[17]。

表2 2組患者血常規(guī)及淋巴細(xì)胞亞群檢測結(jié)果比較（ ±s）

淋巴細(xì)胞是不均一的細(xì)胞群體，包括許多具有不同免疫功能的亞群，CD4+T細(xì)胞能促進(jìn)B細(xì)胞、T細(xì)胞和其他免疫細(xì)胞的增殖與分化，協(xié)調(diào)免疫細(xì)胞間的相互作用；而CD8+T細(xì)胞的功能亞群主要包括殺傷性T細(xì)胞和抑制性T細(xì)胞[18-19]。對于淋巴細(xì)胞亞群在肌少癥中的作用，目前鮮有研究報(bào)道。本研究中，肌少癥患者的外周血總淋巴細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK樣細(xì)胞、記憶T細(xì)胞、初始T細(xì)胞、雙陰T淋巴細(xì)胞水平和非肌少癥患者無顯著差異，但NK細(xì)胞百分比顯著高于非肌少癥組。NK細(xì)胞是淋巴細(xì)胞的一個亞群，是固有免疫應(yīng)答的重要細(xì)胞，被譽(yù)為固有免疫核心細(xì)胞，具有殺傷和免疫調(diào)節(jié)功能。本研究顯示，NK細(xì)胞百分比高可能與肌少癥患者的固有免疫應(yīng)答過強(qiáng)有關(guān)。WILSON等[6]研究顯示，固有免疫系統(tǒng)的細(xì)胞可能間接導(dǎo)致肌少癥。

總之，本研究顯示，肌少癥患者的外周血白細(xì)胞、NK細(xì)胞、CRP較非肌少癥患者顯著升高，可能與機(jī)體微炎癥狀態(tài)和固有免疫功能過強(qiáng)有關(guān)，從而間接引起肌組織的丟失而導(dǎo)致肌少癥。