• 
    

    
    

      99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

      白藜蘆醇對(duì)卵巢癌增殖、遷移和侵襲的影響及可能機(jī)制

      2019-02-09 17:59:34可,康玉,陳行*
      關(guān)鍵詞:白藜蘆醇細(xì)胞系卵巢癌

      李 可,康 玉,陳 行*

      (復(fù)旦大學(xué)附屬婦產(chǎn)科醫(yī)院婦科,上海 200011)

      目前,卵巢癌的主要治療方式為手術(shù)聯(lián)合鉑類、紫杉醇等一線化療,雖然患者獲得比較滿意的近期療效,但5年生存率仍然徘徊在30%~40%[1]。白藜蘆醇是一類廣泛存在與植物中的多酚類物質(zhì),具有抗炎、抗氧化甚至抗腫瘤的活性[2-3]。近年來,白藜蘆醇的抗腫瘤作用在多個(gè)癌種中被驗(yàn)證,但是白藜蘆醇對(duì)卵巢癌的抑制及其機(jī)制還不清楚。本研究擬采用多種人上皮性卵巢癌細(xì)胞系,研究白藜蘆醇對(duì)卵巢癌的抑制作用及其可能機(jī)制。

      1 材料與方法

      1.1 主要材料和試劑

      人上皮性卵巢癌:SKOV3,OVCAR3,OVCAR5,OVCA R8,CAOV3,ES2細(xì)胞由上海市腫瘤所惠贈(zèng)。白藜蘆醇購(gòu)自Sigma-Aldrich公司(R5010純度≥98%);CCK8(Cell Counting Kit-8)試劑購(gòu)自日本同仁公司(CK-04)。培養(yǎng)基RPMI-1640、DMSO、胎牛血清(FBS)、胰蛋白酶均購(gòu)自美國(guó)Gibco公司;BCA蛋白試劑定量盒(美國(guó)Pierce公司);β-ACTIN和GAPDH多克隆抗體美國(guó)Cell signaling Technology公司;Nrf2抗體購(gòu)自英國(guó)Abcam公司(ab137550);CO2培養(yǎng)箱和多功能酶標(biāo)儀均購(gòu)自美國(guó)Thermo Scientific公司;倒置顯微鏡購(gòu)自日本Olympus公司。

      1.2 實(shí)驗(yàn)方法

      將購(gòu)買的人卵巢癌細(xì)胞解凍復(fù)蘇后,制成細(xì)胞懸浮液,接種于相應(yīng)的培養(yǎng)基中(10%胎牛血清,100 U/ml青霉素,100 mg/ml鏈霉素),常規(guī)培養(yǎng)于37℃,5%二氧化碳細(xì)胞培養(yǎng)箱,予以換液1~2天/次,顯微鏡下觀察,待細(xì)胞長(zhǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期時(shí)用0.25%胰蛋白酶(含0.02%EDTA)消化后傳代。

      1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

      所有實(shí)驗(yàn)重復(fù)至少三次。采用SPSS 20.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。采用one-way ANOVA對(duì)多組間樣本均數(shù)進(jìn)行比較,組間兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。采用GraphPad Prism 6.0軟件進(jìn)行作圖分析。計(jì)量資料記錄方式為均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(Mean±SD),P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001)。

      2 結(jié) 果

      2.1 不同濃度白藜蘆醇對(duì)卵巢癌細(xì)胞增殖情況的影響

      選擇四種卵巢癌細(xì)胞系,將對(duì)照組(僅培養(yǎng)液)的細(xì)胞活性設(shè)置為100%,與對(duì)照組相比,白藜蘆醇(不同濃度梯度)處理后,卵巢癌細(xì)胞的活性逐漸降低,且呈藥物濃度依賴性,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

      2.2 白藜蘆醇處理不同卵巢癌細(xì)胞后細(xì)胞的凋亡情況

      采用Annexin V-FITC/PI細(xì)胞凋亡技術(shù),與對(duì)照組(僅DMSO)相比,白藜蘆醇處理組凋亡顯著,且呈時(shí)間依賴性,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

      2.3 白藜蘆醇處理卵巢癌細(xì)胞后Nrf2基因水平的表達(dá)

      利用PCR檢測(cè)白藜蘆醇處理卵巢癌細(xì)胞系后Nrf2在mRNA水平上的表達(dá),結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比(僅培養(yǎng)液),加入白藜蘆醇后Nrf2表達(dá)升高。

      2.4 白藜蘆醇處理卵巢癌細(xì)胞后Nrf2蛋白水平的表達(dá)

      Western blot檢測(cè)結(jié)果表明,與對(duì)照組比較,使用白藜蘆醇處理卵巢癌細(xì)胞系24和48小時(shí)后,Nrf2蛋白表達(dá)增強(qiáng)。經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn),與對(duì)照組Nrf2蛋白表達(dá)相比,白藜蘆醇處理卵巢癌細(xì)胞24和48小時(shí)后的Nrf2蛋白表達(dá)增強(qiáng)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

      3 討 論

      卵巢癌因其發(fā)病隱匿、診斷多為晚期且較易耐藥復(fù)發(fā),是死亡率位居首位的婦科惡性腫瘤。其不斷增殖和失巢凋亡的特性,其致死率居高不下,因此,探究抑制卵巢癌的增殖和失巢凋亡的藥物,是抑制卵巢癌進(jìn)展,提高生存率的關(guān)鍵。目前,大量研究表明白藜蘆醇可誘導(dǎo)多種腫瘤細(xì)胞凋亡、抑制多種腫瘤細(xì)胞增殖的作用。

      白藜蘆醇是1940年首次發(fā)現(xiàn)的植物提取化合物,因其具有抗炎、抗氧化和抗腫瘤等多種生物活性,近幾年引起眾多研究人員的重視。Jang等首次提出白藜蘆醇具有抗癌活性,其能夠通過多條途徑調(diào)節(jié)癌細(xì)胞的增殖、凋亡、遷移和血管生成,且具有極低的毒性及副作用。本研究表明,白藜蘆醇組多種卵巢癌細(xì)胞的增殖能力顯著低于對(duì)照組,且細(xì)胞凋亡率顯著高于對(duì)照組,且差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,提示白藜蘆醇能夠抑制卵巢癌細(xì)胞的增殖能力,并能夠誘導(dǎo)卵巢癌細(xì)胞凋亡。

      為進(jìn)一步探索白藜蘆醇抑制卵巢癌增殖和誘導(dǎo)凋亡的作用機(jī)制,我們通過檢索大量文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn),白藜蘆醇具有激活核轉(zhuǎn)錄相關(guān)因子2(Nrf2)的作用,而Nrf2的激活障礙與癌癥進(jìn)展有著密切相關(guān)性。本研究表明,白藜蘆醇組Nrf2表達(dá)水平無論是在mRNA水平水平還是蛋白水平,均表達(dá)增加,提示白藜蘆醇能夠通過上調(diào)Nrf2表達(dá)水平抑制卵巢癌細(xì)胞的增殖,誘導(dǎo)卵巢癌細(xì)胞凋亡。

      綜上所述,目前盡管國(guó)內(nèi)外學(xué)者在白藜蘆醇抗女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤方面的研究已經(jīng)取得一定的進(jìn)展,但針對(duì)其具體作用機(jī)制的研究還不是十分深入。由于白藜蘆醇可以對(duì)多種女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤起到抑制生長(zhǎng)促進(jìn)凋亡的作用,再加上其無毒副作用的優(yōu)勢(shì),因此有望成為新一代的抗腫瘤藥物。

      猜你喜歡
      白藜蘆醇細(xì)胞系卵巢癌
      白藜蘆醇研究進(jìn)展
      云南化工(2021年11期)2022-01-12 06:06:12
      卵巢癌:被遺忘的女性“沉默殺手”
      Wnt3 a和TCF4在人卵巢癌中的表達(dá)及臨床意義
      STAT3對(duì)人肝內(nèi)膽管癌細(xì)胞系增殖與凋亡的影響
      microRNA與卵巢癌轉(zhuǎn)移的研究進(jìn)展
      抑制miR-31表達(dá)對(duì)胰腺癌Panc-1細(xì)胞系遷移和侵襲的影響及可能機(jī)制
      E3泛素連接酶對(duì)卵巢癌細(xì)胞系SKOV3/DDP順鉑耐藥性的影響
      JMJD2B在人卵巢癌中的定位表達(dá)
      七葉皂苷鈉與化療藥聯(lián)合對(duì)HT-29 結(jié)腸癌細(xì)胞系的作用
      白藜蘆醇抑菌作用及抑菌機(jī)制研究進(jìn)展
      华容县| 固安县| 囊谦县| 靖州| 湖口县| 凤凰县| 文水县| 泰和县| 武汉市| 台山市| 大理市| 安徽省| 杂多县| 弥渡县| 桐柏县| 金溪县| 宝清县| 芮城县| 阳泉市| 庆城县| 潮州市| 靖宇县| 满城县| 五家渠市| 麻栗坡县| 富宁县| 中方县| 嘉善县| 拜城县| 射洪县| 进贤县| 额敏县| 萍乡市| 巴塘县| 芦溪县| 固始县| 海晏县| 乾安县| 深圳市| 呼图壁县| 南阳市|