李正鵬 李巧珍 余昌霞 王 倩 黃建春 陳明杰

（上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所，國(guó)家食用菌工程技術(shù)研究中心，農(nóng)業(yè)部南方食用菌資源利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海市農(nóng)業(yè)遺傳育種重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室，上海 奉賢201403）

雙孢蘑菇（Agaricus bisporus）又稱白蘑菇，是世界性栽培和消費(fèi)的食用菌品種，目前在我國(guó)已基本實(shí)現(xiàn)了設(shè)施化和工廠化生產(chǎn)。雙孢蘑菇菌種產(chǎn)業(yè)至今已經(jīng)形成了美國(guó)施爾豐公司（Slyvan America Inc.）、美國(guó)藍(lán)寶菌種公司（Lambert Spawn America Inc.）等國(guó)外菌種供應(yīng)商，山東潤(rùn)澤生物科技有限公司、江蘇蕈源種業(yè)科技有限公司等國(guó)內(nèi)菌種供應(yīng)商。現(xiàn)代化雙孢蘑菇菌種生產(chǎn)工藝為機(jī)械化配料-混合-滅菌-冷卻-接種-攪拌-裝袋-培養(yǎng)-冷藏（發(fā)貨或運(yùn)輸），其中配料至攪拌環(huán)節(jié)均可在室內(nèi)大型旋轉(zhuǎn)攪拌器中完成，培養(yǎng)料攪拌均勻后封袋，然后將其轉(zhuǎn)運(yùn)至培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)[1～2]。此菌種生產(chǎn)工藝導(dǎo)致雙孢蘑菇菌種生產(chǎn)和雙孢蘑菇生產(chǎn)完全分隔形成了不同的產(chǎn)業(yè)分工，為使雙孢蘑菇的栽培者對(duì)雙孢蘑菇的接種方法和接種量有所了解，現(xiàn)將雙孢蘑菇的接種方法及關(guān)鍵技術(shù)介紹如下。

1 雙孢蘑菇的菌種形態(tài)

雙孢蘑菇菌種形態(tài)主要包括黑麥菌種、小米菌種和合成培養(yǎng)基菌種等。麥粒菌種多使用黑麥，小米和高粱等小型谷粒也常被用來(lái)嘗試做菌種。麥粒菌種容易混入培養(yǎng)料中，播種效果好。小米菌種因其單位重量所含的顆粒數(shù)目多，菌種萌發(fā)點(diǎn)多，因此接種后菌絲萌發(fā)速度更快。播種時(shí)，當(dāng)谷粒菌種已經(jīng)生長(zhǎng)在一起時(shí)，播種前1 d應(yīng)將其打散，以便受損傷的菌絲得以恢復(fù)。谷粒菌種的缺點(diǎn)是易發(fā)霉，且霉變速度很快，谷粒菌種的雙孢蘑菇菌絲主要附著于谷粒的表皮，只有極少量菌絲長(zhǎng)入谷粒內(nèi)層，谷粒中菌絲體量平均為10～26 mg/g，即菌種重量的1%～2.6%是菌絲體，其余主要是谷粒。雙孢蘑菇菌絲只覆蓋在谷粒表面，菌種本身的耐熱性和耐貯存性較差。研究表明，使用浸透營(yíng)養(yǎng)成分的珍珠巖菌種，菌絲可以從其顆粒表面侵入到內(nèi)部，大大增加了菌絲生物量，菌種的耐熱及保存性等指標(biāo)均明顯提升，形態(tài)上也接近谷粒。珍珠巖菌種的接種操作方法、菌種成活率、菌絲萌發(fā)速度等與谷粒菌種相似[3]。

2 接種方法

菌種長(zhǎng)滿瓶后7～10 d，將其貯存在2～5 ℃冷庫(kù)中，使用前1 d 取出，置于20～23 ℃條件下讓菌絲恢復(fù)活力。試驗(yàn)結(jié)果表明，經(jīng)冷庫(kù)低溫保藏的菌種較未經(jīng)低溫保藏的菌種更易分泌黃色液滴，且易酸敗軟化[4]。

2.1 點(diǎn)播法

點(diǎn)播法也叫穴播，一般用于草料種。接種時(shí)，將菌種接入培養(yǎng)料內(nèi)5 cm深，接種孔間隔20～25 cm。

2.2 撒播法

先將菌種總量的40%均勻撒在培養(yǎng)料上，然后抖動(dòng)培養(yǎng)料，使菌種混入培養(yǎng)料，再將剩下的60%菌種撒在培養(yǎng)料表面，稍壓實(shí)。麥粒菌種常采用撒播法進(jìn)行播種。

2.3 混播法

混播法即將菌種和培養(yǎng)料全部混合，工廠化栽培多采用此方法。例如二次發(fā)酵的雙孢蘑菇堆肥上料時(shí)，將堆肥與菌種同時(shí)上床架在室內(nèi)發(fā)菌；二次發(fā)酵結(jié)束，堆肥與菌種經(jīng)傳送帶均勻混合，同時(shí)進(jìn)入三次發(fā)酵隧道內(nèi)發(fā)菌。由于混播法邊上料邊播種，培養(yǎng)料含水量均勻，游離氨消失，可以使雙孢蘑菇菌絲發(fā)育均勻，產(chǎn)量增加?；觳シㄟ€可縮短發(fā)菌周期，減少污染，但混播法對(duì)培養(yǎng)料質(zhì)量要求較高，若培養(yǎng)料內(nèi)氨氣濃度過(guò)大或含水量過(guò)高，菌種容易缺氧死亡。

2.4 擴(kuò)播法

擴(kuò)播法也叫超級(jí)播種，主要用于補(bǔ)種，是菌種播種失敗后的一種補(bǔ)救措施。當(dāng)較早播種的菌種已長(zhǎng)入培養(yǎng)料2/3時(shí)，可取其一部分進(jìn)行擴(kuò)播。擴(kuò)播法易延長(zhǎng)菌齡，且易提高病蟲擴(kuò)散風(fēng)險(xiǎn)。

2.5 C.A.C-ing法[5]

C.A.C（compost in casing）是覆土中添加堆肥的英文縮寫，即在覆土中添加發(fā)菌的堆肥。該方法可縮短覆土與養(yǎng)菌之間的時(shí)間，菌絲體能以較快的速度在覆土中定植。該方法無(wú)需搔菌。

3 接種量

雙孢蘑菇生產(chǎn)過(guò)程應(yīng)根據(jù)堆肥的階段、預(yù)期產(chǎn)量和感染雜菌的風(fēng)險(xiǎn)決定菌種用量。一般一次堆肥每t使用5 L菌種（相當(dāng)于二次堆肥每t使用7 L菌種），每m2用0.5～0.7 L（每t堆肥用5～7 L）較為適宜[5～6]。工廠化生產(chǎn)雙孢蘑菇，一般1 t堆肥使用7 L菌種。為提高菌絲生長(zhǎng)速度也可適當(dāng)增加菌種用量，接種量大可抑制競(jìng)爭(zhēng)性的微生物侵染。麥粒菌種營(yíng)養(yǎng)豐富，可促進(jìn)雙孢蘑菇菌絲萌發(fā)生長(zhǎng)，增加接種量能夠增加蘑菇產(chǎn)量。但當(dāng)接種量每t超過(guò)10 L時(shí)，菌種成本也相應(yīng)增加，反而會(huì)降低增收效果。使用3次培養(yǎng)料時(shí)，接種量按培養(yǎng)料重量的0.5%計(jì)，如栽培面積為500 m2的出菇房，上料50～60 t，使用350～420 L菌種。菌種用量過(guò)多會(huì)導(dǎo)致播種后6～7 d 菇床的溫度顯著提升，增加制冷成本。美國(guó)Amycel 公司的接種率是按鮮菇計(jì)算的，每產(chǎn)30 kg鮮菇用1 kg 麥粒菌種，即1 m2料床用1 kg 菌種。我國(guó)常規(guī)接種量為每m2使用麥粒菌種0.4～0.5 kg 或糞草種1～2 kg。

將菌種接種到培養(yǎng)料后，菌種會(huì)從接種點(diǎn)向四周伸展。栽培者可用肉眼觀察和判斷蘑菇菌絲延伸情況和菌絲生長(zhǎng)濃密程度。一般培養(yǎng)料中的菌絲體生物量與子實(shí)體產(chǎn)量比為1∶8，即12 g菌絲體可以產(chǎn)生100 g蘑菇子實(shí)體。這種比率稱為子實(shí)體效率，通常認(rèn)為蘑菇菌絲生物量越大，蘑菇產(chǎn)量越高[7]。