廣東省清遠(yuǎn)市中心血站(511515)楊顏菁
1.1 一般資料 選取我站2012年5月~2018年5月冰凍機(jī)采血小板240份,其中男性132名,女性108名,年齡20~53歲。所有獻(xiàn)血者均知情同意本研究,一般資料具有可比性(P>0.05),同時(shí)經(jīng)過市輸血研究所批準(zhǔn)。儀器設(shè)備:血小板振蕩保存箱,HJX-IA海爾恒溫融漿機(jī),-80℃深低溫冰箱(日本 SANYO公司),二甲基亞砜(DMSO)原液由上海博光有限公司提供,75%DMSO液的配制是由DMSO原液與濃度為0.9%NaCl以3∶1的比例進(jìn)行配制。其中配制溶液需要在無菌條件下進(jìn)行。
1.2 方法
1.2.1 血小板的采集 根據(jù)PLT、HCT、獻(xiàn)血者的體重以及身高等情況對血小板的采集量進(jìn)行設(shè)置,在血小板采集完畢之后,取50ml血小板作為血小板采集樣本,將其密封裝至血小板專用保存袋,并且將其放置于血小板振蕩箱中進(jìn)行振蕩約一天時(shí)間。
1.2.2 冰凍血小板的制備 DMSO原液組冰凍血小板的制備。在百級無菌室內(nèi)進(jìn)行振蕩,振蕩的速度一般是一分鐘內(nèi)頻率為80~90次,同時(shí)向其中緩慢加入DMSO原液,加入DMSO原液至其濃度達(dá)到5%,然后對DMSO原液與血小板懸液進(jìn)行搖動(dòng)使兩者均勻混合[1]。
75%的DMSO溶液組冰凍血小板的制備。取濃度為75%的DMSO溶液將其儲存在溫度為-50℃的冰箱中,在需要使用之前取出即可,按照血小板凈重量的0.71(注意需要去除血小板采集袋的重量),抽取濃度為75%的DMSO溶液將其直接注入血小板袋內(nèi)至DMSO原液濃度達(dá)到5%,對DMSO原液與血小板懸液進(jìn)行搖動(dòng)使兩者均勻混合。經(jīng)過DMSO化的血小板均保存在溫度為-80℃的低溫冰箱進(jìn)行儲存。
1.2.3 冰凍血小板的融化 在進(jìn)行臨床輸注之前,醫(yī)務(wù)人員需要從溫度為-80℃的深低溫冰箱中將冰凍血小板取出,然后迅速將其置入溫度為38℃~42℃的解凍箱中將冰凍血漿進(jìn)行解凍融化,在確保血小板融化后沒有滲漏、沒有絮狀物并且滿足可以輸注的條件下,可以對患者進(jìn)行血小板輸注。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS18.0進(jìn)行分析,其中計(jì)數(shù)資料(%)進(jìn)行X2檢驗(yàn),計(jì)量資料(±s)進(jìn)行t檢測檢驗(yàn),P<0.05提示有顯著差異。
2.1 不同濃度冷凍液出現(xiàn)絮狀物比較 75%的DMSO溶液組冰凍機(jī)采血小板出現(xiàn)絮狀物的例數(shù)(1例)明顯少于DMSO溶液組(14例)(P<0.05)。
2.2 儲存溫度變化不同冷凍液出現(xiàn)絮狀物比較 DMSO溶液組冰凍機(jī)采血小板出現(xiàn)絮狀物的例數(shù)為13例,與75%的DMSO溶液組的14例相比,無顯著差異性(P>0.05)。
DMSO是醫(yī)療機(jī)構(gòu)普遍使用的將血小板進(jìn)行冰凍的冷凍保護(hù)劑,相關(guān)研究人員指出,將DMSO溶液稀釋至75%的濃度能夠釋放一部分熱量,減少了血小板的損傷情況,同時(shí),將DMSO溶液稀釋至75%的濃度還可以利用低溫溶液對溶液混合產(chǎn)生的熱量進(jìn)行有效地吸收。除此之外,該操作相對安全簡便,并且效率比較高。我院在本次研究過程中,75%的DMSO溶液組冰凍機(jī)采血小板出現(xiàn)絮狀物的例數(shù)明顯少于DMSO溶液組(P<0.05),與很多學(xué)者的研究結(jié)果具有一致性。
研究資料顯示,在降溫過程中進(jìn)行溫度控制容易導(dǎo)致冰凍血小板產(chǎn)生絮狀物,并且血小板胞內(nèi)冰晶容易導(dǎo)致血小板出現(xiàn)嚴(yán)重?fù)p傷[2]。我站在本次研究過程中,加入兩種不同濃度的冷凍液的血小板,控制溫度不同并且在儲存過程中溫度出現(xiàn)巨大變化,兩組均有絮狀物凝塊出現(xiàn),并且DMSO溶液組冰凍機(jī)采血小板出現(xiàn)絮狀物的例數(shù)與75%的DMSO溶液組無顯著差異性(P>0.05)。因此,需要在低溫進(jìn)行血小板的保存過程中,必須控制溫度防止細(xì)胞出現(xiàn)嚴(yán)重?fù)p傷。在血小板的日常保存過程中,需要注意在降溫過程中避免打開冰箱門,同時(shí)在其他時(shí)間應(yīng)該盡量減少打開冰箱門的次數(shù)。除此之外,要保證冰箱的供電情況。
綜上所述,DMSO原液的濃度的不同容易導(dǎo)致冰凍機(jī)采血小板復(fù)融出現(xiàn)絮狀物凝塊,儲存溫度的變化對冰凍機(jī)采血小板復(fù)融出現(xiàn)絮狀物凝塊沒有顯著影響。