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      制首烏的研究進(jìn)展

      2019-02-26 00:10:05,
      亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥 2019年1期
      關(guān)鍵詞:豆汁首烏卵磷脂

      (1.肇慶醫(yī)學(xué)高等??茖W(xué)校 藥學(xué)系, 廣東 肇慶 526020;2.中山火炬職業(yè)技術(shù)學(xué)院 生物醫(yī)藥系, 廣東 中山 528436)

      制首烏是何首烏的炮制加工品,具有補(bǔ)肝腎、益精血、烏須發(fā)、強(qiáng)筋骨的功效[1]。臨床上主要用于血虛眩暈、須發(fā)早白、腰膝酸軟、高血脂等證?!渡褶r(nóng)本草經(jīng)讀》曰其“久服長(zhǎng)筋骨,益精髓,延年不老”。其從古至今皆被譽(yù)為強(qiáng)身健體之藥, 也是廣大人民群眾在日常生活中用于煲湯及養(yǎng)生保健的中藥材。但近年來,在國(guó)內(nèi)外頻頻傳出有關(guān)何首烏的肝毒性事件報(bào)道[2],已經(jīng)引起了國(guó)內(nèi)外中醫(yī)藥研究領(lǐng)域的廣泛關(guān)注,也因此再度掀起了首烏炮制研究的熱潮。

      但縱觀古代本草文獻(xiàn),記載何首烏毒性者寥寥無幾,為何廣泛使用幾百上千年后,現(xiàn)在卻有那么多有關(guān)何首烏毒性的報(bào)道呢? 何首烏,作為一種典型的生熟異治中藥,古代強(qiáng)調(diào)對(duì)其“制非九次,勿寢其毒”,其臨床應(yīng)用的安全性及功效主治在很大程度上與其炮制有關(guān)?,F(xiàn)從制首烏的炮制方法、炮制前后化學(xué)成分的變化、炮制前后功效的異同以及毒性的變化這四個(gè)方面對(duì)現(xiàn)有文獻(xiàn)資料進(jìn)行總結(jié)分析。

      1 炮制方法

      1.1 古代炮制方法概況

      縱覽古代醫(yī)籍資料,窺探何首烏的炮制方法發(fā)現(xiàn),唐代以前的何首烏主要以生首烏入藥,其炮制方法主要為修制。自唐代以來中藥炮制快速發(fā)展,何首烏先后經(jīng)歷了不加輔料炮制法、加輔料制法及現(xiàn)代新炮制法。其中不加輔料制法包括煮、蒸、曝、炒、炙、焙等這些單純加熱處理的方法。比如“水煮熟”始記載于唐朝的《仙授理傷續(xù)斷秘方》,“蒸”法記載于宋代《圣濟(jì)總錄》[3]。加輔料制法在歷代古籍中則記載比較多,所用到的輔料有黑豆、米泔水、酒、醋、生姜、甘草等。其中被歷版中國(guó)藥典收載一直沿用至今的黑豆汁制法起源于唐代,雖然當(dāng)時(shí)何首烏的主要臨床應(yīng)用飲片仍是生首烏,但古人依然不斷探索何首烏的新炮制方法,豐富發(fā)展其炮制加工的內(nèi)容。從唐代開始,古人就將黑色入腎理論應(yīng)用于何首烏的炮制上,于是就開啟了將黑豆用作炮制用輔料的先河,而且這種黑豆制法為宋代至清代時(shí)期盛行的九蒸九曝制法提供了豐富的理論基礎(chǔ)與臨床經(jīng)驗(yàn)。到了清代,很多醫(yī)籍記載都把九蒸九曝制法作為制首烏的主要炮制方法。在中醫(yī)臨床上常以“九”為尊,要求對(duì)何首烏進(jìn)行九蒸九曬,可使其外觀性狀呈黑色、角質(zhì)樣、烏黑發(fā)亮,且在《本草綱目》中已有記載曰“如此九蒸九曬乃用”,這種何首烏制法數(shù)百年以來一直被中藥炮制者所接受,其療效也被臨床醫(yī)生所公認(rèn)[4-9]。

      1.2 現(xiàn)代炮制方法概況

      隨著現(xiàn)代科技的發(fā)展,中藥炮制也快速發(fā)展起來,特別是由原來的手工炮制發(fā)展為現(xiàn)在的機(jī)械化炮制,生產(chǎn)效率大大提高。在歷代中何首烏的炮制方法復(fù)雜多樣,而現(xiàn)代,其炮制方法則基本統(tǒng)一為黑豆汁制法及黑豆黃酒共制法。但具體的炮制工藝也不同于以前的九蒸九曬法。比如現(xiàn)行的藥典標(biāo)準(zhǔn)中制何首烏的炮制方法為黑豆汁燉或黑豆汁蒸或清蒸,而在具體的生產(chǎn)工藝中有采用高壓蒸、減壓蒸等,炮制時(shí)間則有從3~40 h不等[10-12],其中在企業(yè)規(guī)?;a(chǎn)中用得最多的工藝是黑豆汁高壓蒸制4 h[13-15]。

      此外,隨著中藥炮制機(jī)理的研究深入,人們提出了一些新的炮制方法,有高壓蒸制、發(fā)酵炮制、微波炮制及膨化炮制法[16]。這些是迎合時(shí)代發(fā)展要求,將新工藝、新技術(shù)引入現(xiàn)代中藥炮制研究中,并根據(jù)需要對(duì)何首烏的傳統(tǒng)炮制方法進(jìn)行改進(jìn),以提高其飲片生產(chǎn)效率、質(zhì)量或療效,于是就有了何首烏古今炮制方法不盡相同的現(xiàn)象。但這些新的炮制方法尚處于起步階段,是否具有減毒增效的效果仍有待進(jìn)行更進(jìn)一步的研究與評(píng)估。

      2 炮制對(duì)化學(xué)成分的影響

      中藥生熟異治,是因?yàn)榕谥萍庸?huì)對(duì)其化學(xué)成分發(fā)生不同程度的變化。何首烏主要有效物質(zhì)基礎(chǔ)為二苯乙烯苷、蒽醌類、卵磷脂等成分?,F(xiàn)將不同炮制方法對(duì)制首烏化學(xué)成分的影響總結(jié)如下。

      2.1 炮制對(duì)二苯乙烯苷的影響

      九蒸九曬的炮制工藝會(huì)使二苯乙烯苷含量會(huì)隨炮制時(shí)間的增加而逐漸下降[17-21]。甘草煮制法制得的制何首烏中的二苯乙烯苷的含量明顯較生品升高但其機(jī)理有待進(jìn)一步研究[22]。當(dāng)控制何首烏的制法均為高壓蒸制而比較不同輔料對(duì)制首烏中二苯乙烯苷的含量影響時(shí),研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同輔料對(duì)制首烏中二苯乙烯苷成分含量影響也不同,研究結(jié)果表明二苯乙烯苷的含量在黃酒黑豆、黑豆、白酒黑豆、白酒及黃酒制品中逐漸降低[23]。

      2.2 炮制對(duì)蒽醌類成分的影響

      何首烏在九蒸九曬過程中大黃素和大黃素甲醚呈現(xiàn)先上升后下降再緩上升,總體呈上升的趨勢(shì),這可能在炮制過程中存在其他成分轉(zhuǎn)化為大黃素和大黃素甲醚的情況所致[17-18]。在炮制過程中,制何首烏的大黃素和大黃素甲醚含量呈現(xiàn)逐漸升高趨勢(shì),在炮制32 h時(shí)其含量是最高的,之后逐漸下降[19-20]。高壓蒸制時(shí),不同輔料對(duì)制首烏中大黃素成分影響不同,其含量高低順序?yàn)椋狐S酒黑豆>黃酒>黑豆>白酒黑豆>白酒[23]。隨著蒸制加工時(shí)間的延長(zhǎng),何首烏中結(jié)合蒽醌含量逐漸下降,而游離蒽醌含量則在一定蒸制時(shí)間內(nèi)隨蒸制時(shí)間的增加而提高,但升高到一定程度時(shí)則趨于穩(wěn)定[21]。炮制后何首烏中總蒽醌的含量明顯降低[24]。

      2.3 炮制對(duì)卵磷脂類成分的影響

      有學(xué)者測(cè)定炮制前后何首烏中磷脂成分含量的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明制首烏中磷脂成分含量明顯減少,且不同炮制方法對(duì)卵磷脂含量的影響也不一樣,研究結(jié)果顯示:在生首烏、酒制首烏、豆制首烏、清蒸首烏及豆加酒制首烏中其卵磷脂含量逐漸降低,以酒或黑豆所制得的制首烏中卵磷脂含量較高,這與其傳統(tǒng)炮制方法中以豆制、酒制為主是相符的[25]。隨著各種炮制方法時(shí)間的延長(zhǎng),卵磷脂含量均呈現(xiàn)下降趨勢(shì),這可能與它們遇熱不穩(wěn)定有關(guān),其結(jié)果為高壓豆制品>高壓酒制品>高壓酒豆制品>高壓清蒸品,其中以豆制為佳[15]。卵磷脂在生首烏中的含量低于各種制何首烏,其中經(jīng)豆制所得的制何首烏中卵磷脂含量最高,這可能是在炮制過程中黑豆汁中豐富的卵磷脂滲入其內(nèi)部所致。但酒豆制法所制得的制首烏中卵磷脂含量下降,這可能與酒精可溶解部分卵磷脂引起流失所致[26]。

      2.4 炮制對(duì)多糖類成分的影響

      據(jù)現(xiàn)有研究報(bào)道,何首烏經(jīng)炮制后其總多糖的含量較炮制前顯著增加[27];生首烏含還原糖2.76%,水溶性糖3.32%,多糖0.56%,而制首烏中各種糖類含量均有顯著提高。且蒸制的時(shí)間不同,其糖類含量有一定的差異。其中蒸制35 h、100 ℃干燥的制首烏各種糖類含量幾乎都達(dá)到了最高值,如還原性糖含量可高達(dá)4.82%,水溶性糖含量可高達(dá)7.21%,多糖含量可高達(dá)2.78%。制首烏補(bǔ)益作用增強(qiáng)與其糖類成分含量增加存在一定相關(guān)性[28]。

      2.5 炮制對(duì)其他成分的影響

      據(jù)現(xiàn)有文獻(xiàn)報(bào)道,炮制前后對(duì)何首烏的水溶性成分含量及醇溶性浸出物的含量并沒有顯著影響[17-18]。制何首烏的沒食子酸含量在炮制過程中會(huì)逐漸升高,且在蒸制24h后其含量趨于穩(wěn)定;5-HMF是制首烏新產(chǎn)生的化學(xué)成分,其含量也呈現(xiàn)出隨炮制時(shí)間的增加而升高的趨勢(shì)[19-20,29]。有學(xué)者采用UPLC法對(duì)生/制首烏的化學(xué)成分進(jìn)行整體研究,采用聚類分析和主成分分析法對(duì)生/制首烏的指紋圖譜信息進(jìn)行分析可將其有效鑒別出來,表明生首烏和制首烏的整體化學(xué)成分存在很大的差異,這也可以解釋其生熟異治的炮制原理[30-31]。

      3 炮制對(duì)功效的影響

      劉素標(biāo)[32]研究不同炮制工藝所得的制首烏對(duì)抗衰老活性的影響結(jié)果顯示,空白細(xì)胞抗衰老率為16.5%,蒸制首烏為28.7%,高壓蒸制首烏為37.9%,蒸制首烏、高壓蒸制首烏的抗衰老活性較空白細(xì)胞均顯著增強(qiáng),這可能與不同炮制工藝下制首烏的二苯乙烯苷、大黃素、大黃素甲醚的含量差異所致。SOD是清除自由基的抗氧化酶,在培養(yǎng)液中加入生何首烏、1 h高壓蒸制首烏后與正常組細(xì)胞三者間的SOD活力并沒有顯著性差異,而加入3h制何首烏后,則可使HEL細(xì)胞內(nèi)SOD的活性提高,并可顯著延緩HEL細(xì)胞衰亡速率,促進(jìn)了細(xì)胞代謝,起到抗衰老的效果[33]。生何首烏及傳統(tǒng)工藝所制得的制首烏、發(fā)酵首烏均具有顯著的降脂作用,其中由米根霉發(fā)酵得到的發(fā)酵品具有較好的降脂活性[34]。據(jù)現(xiàn)有文獻(xiàn)報(bào)道,不同炮制工藝所得的制首烏均具有顯著增加血虛大鼠模型的紅細(xì)胞數(shù)量和血紅蛋白數(shù)量的作用,并可改善血虛大鼠模型的血流變功能紊亂,其中以高壓豆制何首烏8 h組紅細(xì)胞和血紅蛋白數(shù)增加效果最佳(P<0.01),即何首烏以黑豆汁或酒為輔料,高壓蒸制6~8 h,補(bǔ)血效果更好[35-36]。對(duì)比藥理實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),清蒸和黑豆汁蒸均可加強(qiáng)何首烏保PC12細(xì)胞免受H2O2損傷的作用[37]。

      4 炮制對(duì)毒性的影響

      據(jù)現(xiàn)有研究報(bào)道何首烏的肝毒性主要表現(xiàn)為特異質(zhì)肝損傷,同在LPS特異質(zhì)大鼠模型上,生首烏在接近臨床安全劑量的情況下就可表現(xiàn)出肝損傷[38]。然而基于同等劑量的情況下,用經(jīng)“九蒸九曬”炮制過的制首烏在大鼠模型上則沒有顯示肝損傷,這表明炮制確實(shí)可以降低何首烏的毒性。相同劑量的何首烏和制首烏聯(lián)合LPS給藥后,生首烏組肝臟切片可見明顯病理學(xué)改變,而制首烏組未出現(xiàn)肝損傷,該研究發(fā)現(xiàn)生首烏對(duì)大鼠肝臟的毒性明顯高于制首烏,這表明炮制加工能有效降低何首烏的肝毒性[39-40]。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)何首烏毒性與大黃素甲醚、順式二苯乙烯苷這個(gè)2個(gè)成分有關(guān),何首烏高壓黑豆汁蒸至36 h后這2個(gè)成分含量顯著降低,可達(dá)到減毒的效果[41]。據(jù)研究報(bào)道,患者無論是服用含有何首烏的中成藥、生首烏飲片還是制首烏等均會(huì)引起肝損傷,且這與發(fā)病人群的性別年齡均無明顯關(guān)系,可能與其中含有引起肝損傷的成分有關(guān)[42]。比較研究常壓清蒸法、高壓清蒸法和高壓黑豆汁蒸法對(duì)何首烏毒性的影響發(fā)現(xiàn),相同的炮制時(shí)間點(diǎn)高壓炮制品比常壓炮制品的肝毒低,而且常壓炮制品的肝毒性隨著炮制時(shí)間的延長(zhǎng)而呈現(xiàn)出直線下降的趨勢(shì),而高壓炮制品的肝毒性則隨著炮制時(shí)間的延長(zhǎng)而呈現(xiàn)先下降后基本穩(wěn)定的趨勢(shì)[43]。使用炮制適當(dāng)?shù)暮问诪醪粫?huì)對(duì)大鼠造成肝損傷,但使用炮制不及或炮制太過的制首烏水煎濃縮液給大鼠長(zhǎng)期灌胃后會(huì)對(duì)大鼠肝臟造成不同程度的損害。但停服炮制不當(dāng)?shù)暮问诪鹾?,其肝功能可恢?fù)正常,表明何首烏的肝毒性與其炮制是否恰當(dāng)有關(guān)[44]。據(jù)研究發(fā)現(xiàn),不同炮制時(shí)間的制首烏其ED50所需給藥劑量也不相同,且其致瀉強(qiáng)度也不一致:在生首烏、1 h制首烏、2 h制首烏、3 h制首烏及4 h制首烏中其致瀉強(qiáng)度逐漸減弱[45]。

      5 結(jié)語

      “凡藥制造,貴在適中,不及則功效難求,太過則氣味反失。”制首烏作為一種傳統(tǒng)的補(bǔ)益中藥,炮制得當(dāng)是否與其毒副作用密切相關(guān)。雖然近幾年頻頻頻傳出有關(guān)其肝毒性的不良報(bào)道,但其具體的毒性物質(zhì)并不明確,希望在后續(xù)的研究工作中可以尋找出其產(chǎn)生肝毒性的物質(zhì)基礎(chǔ),并以此為評(píng)價(jià)指標(biāo)確立最佳的何首烏炮制工藝,并采用簡(jiǎn)便、快速的IR檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行制首烏在線生產(chǎn)的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè),有助于確保制首烏的炮制質(zhì)量,提高其臨床及日常使用的安全性。

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