胡世忠, 吳卓秋, 柯芙蓉, 高玉云, 王長(zhǎng)康

(福建農(nóng)林大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，福建 福州 350002)

微量元素作為動(dòng)植物生長(zhǎng)發(fā)育的重要營(yíng)養(yǎng)成分，一直是國(guó)內(nèi)外研究的重點(diǎn).微量元素參與動(dòng)植物生長(zhǎng)代謝過(guò)程，是機(jī)體代謝系統(tǒng)的重要組成成分以及部分酶促反應(yīng)的輔助因子[1]，也是部分酶的必要因子[2]，微量元素的缺乏會(huì)對(duì)機(jī)體產(chǎn)生不同程度的影響，影響機(jī)體正常代謝功能、免疫功能[3]、生產(chǎn)性能[4]，甚至影響動(dòng)物的生存.當(dāng)在飼料中添加遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)需要的微量元素(如銅、鋅元素)時(shí)，表現(xiàn)出的促生長(zhǎng)、抑菌抗腹瀉作用非常顯著；當(dāng)高劑量的銅、鋅元素與抗生素一同使用時(shí)，協(xié)同作用能獲得更好的抑菌、促生長(zhǎng)效果[5].隨著高銅、高鋅飼料的使用，動(dòng)物糞便中的重金屬殘留是導(dǎo)致土壤重金屬污染的一大重要來(lái)源[6].包被技術(shù)，使需要的成分包被在一個(gè)載體中，在經(jīng)過(guò)動(dòng)物的消化道時(shí)，載體緩慢溶解，以達(dá)到被包被成分緩慢釋放的效果.包被技術(shù)的應(yīng)用，可降低日糧中微量元素的添加量，使微量元素可以在動(dòng)物的消化道中緩慢釋放出來(lái)，被消化道充分地消化、吸收，尤其對(duì)于消化道較短的雞只，其作用更加明顯；同時(shí)，包被技術(shù)也減少了糞便中不能被動(dòng)物消化吸收利用的重金屬微量元素對(duì)環(huán)境造成的重金屬污染.目前，包被技術(shù)多應(yīng)用于單一飼料成分上，在肉雞生產(chǎn)中應(yīng)用包被技術(shù)對(duì)復(fù)合微量元素進(jìn)行處理的報(bào)道并不多見(jiàn).因此，本試驗(yàn)在黃羽肉雞的日糧中，應(yīng)用包被技術(shù)研究包被復(fù)合微量元素對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能、血清生化指標(biāo)和抗氧化能力的影響，以減少部分重金屬微量元素在飼料中的添加量，并為其在生產(chǎn)中的應(yīng)用提供參考.

1 材料與方法

1.1 材料

供試375只遺傳背景相似的1日齡雄性黃羽肉雞由福建莆田廣東溫氏家禽有限公司提供.

供試包被復(fù)合微量元素產(chǎn)品由福建深納生物工程有限公司提供，每千克產(chǎn)品含10 g銅、140 g鐵、120 g錳、120 g鋅.

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)采用單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì).將375只雛雞隨機(jī)分成5個(gè)處理組，分別為對(duì)照組及試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組，每組5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)15只肉雞.經(jīng)檢驗(yàn)，每個(gè)重復(fù)肉雞的初始體重差異不顯著(P>0.05).試驗(yàn)為期70 d，其中，1～28 d為第一階段，29～70 d為第二階段.

試驗(yàn)中，對(duì)照組參照NY/T 33—2004[7]中黃羽肉雞的營(yíng)養(yǎng)需要以及相關(guān)國(guó)家飼料法律法規(guī)設(shè)定的限制條件添加無(wú)機(jī)微量元素；Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組分別添加200、300、400、500 mg·kg-1包被復(fù)合微量元素產(chǎn)品.各處理組基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1，微量元素添加水平見(jiàn)表2.

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of basal diet (air-dry basis)

1)預(yù)混料不含微量元素銅、鐵、鋅、錳；按照表2各處理組對(duì)微量元素的要求，對(duì)照組和試驗(yàn)Ⅰ～Ⅳ組分別添加微量元素或相應(yīng)劑量的包被復(fù)合微量元素產(chǎn)品.2)營(yíng)養(yǎng)成分值均為計(jì)算值.

表2 各處理組日糧中的微量元素水平

1.3 生長(zhǎng)性能指標(biāo)的測(cè)定

采食量：每日準(zhǔn)時(shí)稱量并記錄各個(gè)重復(fù)組的飼料剩余量、添加量、浪費(fèi)量，以準(zhǔn)確計(jì)算出每日的采食量，計(jì)算每個(gè)重復(fù)每個(gè)階段的采食量、平均日采食量.

日增重：在肉雞1日齡時(shí)稱取初始重.在屠宰前一天(試驗(yàn)第27、69天)晚上20：00斷料，斷料12 h，于試驗(yàn)第28、70天屠宰當(dāng)天上午8：00稱重，記錄每個(gè)階段的末重，計(jì)算總增重；根據(jù)階段天數(shù)，計(jì)算日增重.

料重比：每個(gè)階段耗料與增重的比例根據(jù)各階段的平均日采食量、日增重計(jì)算.

1.4 血清指標(biāo)的測(cè)定

于試驗(yàn)第28、70天，每籠選取2只健康、接近平均體重的肉雞，一次選取50只，稱取活重后，在翼靜脈處采用采血針和真空采血管采集血液.收集的血液于常溫下靜置1 h后放入冰箱(4 ℃)保存12 h.于3 000 r·min-1離心20 min后吸取血清，保存于離心管中，若血清出現(xiàn)沉淀，則再次離心.收集的血清置冰箱(-20 ℃)冷凍保存，用于血清相應(yīng)指標(biāo)的測(cè)定.

1.4.1 生化指標(biāo)的測(cè)定 選取總蛋白含量、白蛋白含量、堿性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)活性作為血清生化的測(cè)定指標(biāo)，具體操作步驟按照試劑盒(購(gòu)自上海榮盛生物藥業(yè)有限公司)說(shuō)明書(shū)進(jìn)行.

1.4.2 抗氧化能力的測(cè)定 選取總抗氧化能力(total antioxidant capacity, T-AOC)、銅鋅超氧化物歧化酶(copper-zinc superoxide dismutase, Cu/Zn-SOD)活性、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)活性、丙二醛(malonaldehyde, MDA)含量作為血清抗氧化能力的測(cè)定指標(biāo)，具體操作步驟按照試劑盒(購(gòu)自南京建成生物工程研究所)說(shuō)明書(shū)進(jìn)行.

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

采用Microsoft Office EXCEL 2013軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行初步整理，然后使用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析、多重比較，以P<0.01(差異極顯著)、P<0.05(差異顯著)作為差異顯著性的判斷標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示.

2 結(jié)果與分析

2.1 包被復(fù)合微量元素對(duì)黃羽肉雞生長(zhǎng)性能的影響

包被復(fù)合微量元素對(duì)黃羽肉雞生長(zhǎng)性能的影響見(jiàn)表3.

表3 包被復(fù)合微量元素對(duì)黃羽肉雞生長(zhǎng)性能的影響1)Table 3 Effects of micro-coating compound trace mineral on the growth performance of yellow broilers

1)同列數(shù)據(jù)后附不同大寫(xiě)字母者表示差異極顯著(P<0.01),附不同小寫(xiě)字母者表示差異顯著(P<0.05)，附相同小寫(xiě)字母者或無(wú)字母者表示差異不顯著(P>0.05).

由表3可知：1～28 d，各處理組肉雞的平均日采食量、平均日增重、存活率差異不顯著(P>0.05)；Ⅰ組的料重比較對(duì)照組顯著提高3.51%(P<0.05)，其他各組的差異不顯著(P>0.05).29～70 d，各處理組肉雞的平均日采食量、料重比、存活率差異不顯著(P>0.05)；Ⅲ組的平均日增重顯著高于Ⅱ、Ⅳ組(P<0.05).1～70 d，各處理組肉雞的平均日采食量、料重比、存活率差異不顯著(P>0.05)；Ⅲ組的平均日增重極顯著高于Ⅰ組(P<0.01)，顯著高于對(duì)照組、Ⅱ組(P<0.05)；Ⅳ組的平均日增重顯著高于對(duì)照組、Ⅰ組、Ⅱ組(P<0.05)，與Ⅲ組的差異不顯著(P>0.05).

2.2 包被復(fù)合微量元素對(duì)黃羽肉雞血清生化指標(biāo)的影響

包被復(fù)合微量元素對(duì)黃羽肉雞血清生化指標(biāo)的影響見(jiàn)表4.

表4 包被復(fù)合微量元素對(duì)黃羽肉雞血清生化指標(biāo)的影響1)Table 4 Effects of micro-coating compound trace mineral on the serum biochemical index of yellow broilers

1)同列數(shù)據(jù)后附不同小寫(xiě)字母者表示差異顯著(P<0.05)，附相同小寫(xiě)字母者或無(wú)字母者表示差異不顯著(P>0.05).

由表4可得，28日齡時(shí)，各處理組肉雞血清的總蛋白含量、白蛋白含量、ALP活性差異不顯著(P>0.05).70日齡時(shí)，各處理組肉雞血清的總蛋白含量、ALP活性差異不顯著(P>0.05)；Ⅲ、Ⅳ組的白蛋白含量比Ⅰ組分別提高13.22%(P<0.05)、11.57%(P<0.05)，其余各組的差異不顯著(P>0.05).

2.4 包被復(fù)合微量元素對(duì)黃羽肉雞血清抗氧化能力的影響

包被復(fù)合微量元素對(duì)黃羽肉雞血清抗氧化能力的影響見(jiàn)表5.

表5 包被復(fù)合微量元素對(duì)黃羽肉雞血清抗氧化能力的影響1)Table 5 Effects of micro-coating compound trace mineral on the serum antioxidant function of yellow broilers

1)同列數(shù)據(jù)后附不同小寫(xiě)字母者表示差異顯著(P<0.05)，附相同小寫(xiě)字母者或無(wú)字母者表示差異不顯著(P>0.05).

由表5可得，28日齡時(shí)，各處理組肉雞血清的T-AOC、GSH-Px活性、Cu/Zn-SOD活性、MDA含量差異不顯著(P>0.05).70日齡時(shí)，各處理組肉雞血清的T-AOC、Cu/Zn-SOD活性、MDA含量差異不顯著(P>0.05)；Ⅲ組的GSH-Px活性比Ⅰ組提高10.60%(P<0.05)，其余各組的差異不顯著(P>0.05).

3 討論

3.1 包被復(fù)合微量元素對(duì)黃羽肉雞生產(chǎn)性能的影響

本試驗(yàn)結(jié)果表明，在黃羽肉雞的日糧中添加包被復(fù)合微量元素代替常規(guī)無(wú)機(jī)微量元素，能減少微量元素的用量，且對(duì)肉雞的平均日采食量、料重比、存活率無(wú)顯著影響(P>0.05)，這與前人[8-10]的研究結(jié)果一致.其原因可能是，目前飼料的預(yù)混料大多為粉末狀的無(wú)機(jī)酸鹽或有機(jī)酸鹽等原料的直接混合，在混合的過(guò)程中，由于受潮以及部分微量元素發(fā)生反應(yīng)等理化因素，導(dǎo)致微量元素的性質(zhì)發(fā)生改變，有效含量降低[11]；不僅如此，未包被的微量元素對(duì)其他營(yíng)養(yǎng)成分也具有破壞性，在周文藝[12]的研究中指出，飼料中的銅、鋅原料是造成維生素A損失的主要物質(zhì).通過(guò)包被技術(shù)，包被層阻隔微量元素與其他物質(zhì)的接觸，減少反應(yīng)的發(fā)生，降低了微量元素及其他成分的損失，從而提高飼料利用率，促進(jìn)各營(yíng)養(yǎng)成分的消化吸收.本實(shí)驗(yàn)室其他成員的研究表明，通過(guò)包被技術(shù)，降低了微量元素在飼料中的使用量，提高了肉雞十二指腸絨毛長(zhǎng)度與隱窩深度的比值，改善十二指腸的腸道結(jié)構(gòu)，增加腸絨毛與飼料的接觸，提高飼料利用率，進(jìn)一步增加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收[13-14].

在本試驗(yàn)的試驗(yàn)Ⅰ～Ⅲ組中，隨著微量元素含量的增加，肉雞的平均日采食量、平均日增重呈上升趨勢(shì)，而試驗(yàn)Ⅳ組的微量元素含量最高，但肉雞的平均日增重等指標(biāo)較Ⅲ組有所下降，可能是由于Ⅲ組的微量元素水平已能較好地發(fā)揮生長(zhǎng)潛力，若再增加部分微量元素的用量，會(huì)導(dǎo)致微量元素間的吸收平衡被破壞，過(guò)高含量的某種元素會(huì)抑制另一元素的吸收，從而導(dǎo)致生產(chǎn)性能下降[15].Zhao et al[16]在白羽肉雞的日糧中分別添加8、250 mg·kg-1硫酸銅，添加過(guò)高劑量硫酸銅的處理組對(duì)比添加低劑量硫酸銅的處理組，肉雞的日增重下降14%，此結(jié)果與本試驗(yàn)的結(jié)果一致.從本試驗(yàn)的試驗(yàn)全期來(lái)看，添加包被復(fù)合微量元素的試驗(yàn)組對(duì)比添加無(wú)機(jī)微量元素的對(duì)照組，肉雞的料重比呈下降趨勢(shì)，但差異不顯著(P>0.05).

3.2 包被復(fù)合微量元素對(duì)黃羽肉雞血清生化指標(biāo)的影響

血清中的蛋白質(zhì)指標(biāo)能反映出動(dòng)物對(duì)蛋白質(zhì)的消化吸收合成能力，而蛋白質(zhì)代謝能力在一定程度上能反映機(jī)體的生長(zhǎng)發(fā)育情況及抵抗疾病的能力.本試驗(yàn)結(jié)果表明：當(dāng)包被復(fù)合微量元素產(chǎn)品的添加量為200～400 mg·kg-1時(shí)，隨著添加量的增加，黃羽肉雞血清中的總蛋白含量、白蛋白含量、ALP活性也隨之提高，說(shuō)明一定含量范圍內(nèi)的包被復(fù)合微量元素對(duì)血清中的蛋白質(zhì)代謝有促進(jìn)作用，但差異不顯著(P>0.05)，這與張伶燕[17]、趙潤(rùn)梅等[18]的研究結(jié)果一致.喬富強(qiáng)等[19]研究表明，隨著錳、鉻元素添加量的增加，肉雞血清中的總蛋白含量逐漸升高，此結(jié)果與本試驗(yàn)的結(jié)果一致，但本試驗(yàn)的結(jié)果未達(dá)到顯著差異.其原因是，在喬富強(qiáng)等的研究中，基礎(chǔ)日糧中錳元素的添加量分別為60、120 mg·kg-1，而本試驗(yàn)對(duì)照組及試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組錳元素的添加量分別為80、24、36、48、60 mg·kg-1，試驗(yàn)組的錳元素含量遠(yuǎn)低于喬富強(qiáng)等的添加量，故差異未達(dá)到顯著水平.研究表明，ALP的結(jié)構(gòu)中有Mg2+與Zn2+的結(jié)合位點(diǎn)，當(dāng)機(jī)體中的Zn2+、Cu2+含量過(guò)高，與Mg2+競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合位點(diǎn)，導(dǎo)致酶結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，ALP活性下降[20].本試驗(yàn)中，當(dāng)包被復(fù)合微量元素產(chǎn)品的添加量達(dá)到500 mg·kg-1時(shí)，過(guò)高的Cu2+、Zn2+與ALP中的Mg2+結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合，最終導(dǎo)致ALP活性下降.可見(jiàn)，利用包被技術(shù)，可降低微量元素在日糧中的添加量，保持肉雞機(jī)體正常的蛋白質(zhì)代謝，維持機(jī)體滲透壓，保持血清與骨骼中的鈣、磷平衡，維持機(jī)體健康.

3.3 包被復(fù)合微量元素對(duì)黃羽肉雞血清抗氧化能力的影響

血清中的T-AOC、GSH-Px活性、Cu/Zn-SOD活性、MDA含量是動(dòng)物機(jī)體抗氧化能力的重要指標(biāo).本試驗(yàn)中，各試驗(yàn)組黃羽肉雞血清中的T-AOC、Cu/Zn-SOD活性、MDA含量與對(duì)照組的差異不顯著(P>0.05)，表明通過(guò)包被技術(shù)降低日糧中微量元素的添加量，對(duì)肉雞血清抗氧化能力的影響不顯著.試驗(yàn)Ⅰ～Ⅳ組，隨著包被復(fù)合微量元素添加量的提高，Cu/Zn-SOD活性呈先上升后下降的趨勢(shì)，這與張春香等[21]、Ahmadi et al[22]的研究結(jié)果一致，表明一定量的微量元素?cái)z入，就能保證機(jī)體抗氧化應(yīng)激相關(guān)酶的合成以及一定水平的酶活性.Sun et al[23]研究表明，向孵化中的雞胚注射不同劑量的鋅制劑，對(duì)雞胚Cu/Zn-SOD的活力和mRNA表達(dá)量無(wú)顯著影響，從基因水平上說(shuō)明了，一定量的微量元素?cái)z入即可維持機(jī)體抗氧化酶相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄、翻譯、合成，并維持抗氧化酶的活性.本試驗(yàn)中，當(dāng)包被微量元素產(chǎn)品的添加量達(dá)到500 mg·kg-1時(shí)，除了Cu/Zn-SOD活性有上升趨勢(shì)外，T-AOC、GSH-Px活性呈下降趨勢(shì).其原因可能是，本試驗(yàn)使用的包被復(fù)合微量元素產(chǎn)品，其有效成分除了鋅元素外，還有其他微量元素，如銅、鐵、錳等，當(dāng)鋅元素含量增加時(shí)，其他微量元素的含量也相應(yīng)提高，但微量元素之間的相互作用會(huì)導(dǎo)致過(guò)量的其他元素使鋅元素的消化吸收受到抑制，故出現(xiàn)抗氧化能力下降的現(xiàn)象.在Cu/Zn-SOD的結(jié)構(gòu)中有兩個(gè)Cu2+或Zn2+的結(jié)合位點(diǎn)[24]，其他微量元素對(duì)發(fā)揮酶活性的Cu2+或Zn2+結(jié)合到相應(yīng)位點(diǎn)可能存在促進(jìn)或抑制作用.本試驗(yàn)中，對(duì)Cu/Zn-SOD中Cu2+或Zn2+位點(diǎn)的促進(jìn)作用始終強(qiáng)于其他元素的抑制作用，故Cu/Zn-SOD活性隨著微量元素的增加而提高.

4 小結(jié)

本試驗(yàn)結(jié)果表明，通過(guò)包被技術(shù)對(duì)復(fù)合微量元素進(jìn)行處理，能降低微量元素在日糧中的添加量，而不影響黃羽肉雞的生長(zhǎng)性能、血清生化指標(biāo)和抗氧化能力.使用復(fù)合微量元素，應(yīng)當(dāng)考慮微量元素之間的相互作用，過(guò)高的添加量，會(huì)導(dǎo)致肉雞生長(zhǎng)性能、血清生化指標(biāo)和抗氧化能力出現(xiàn)下降的趨勢(shì)，過(guò)低則會(huì)導(dǎo)致微量元素缺乏癥，從而影響生長(zhǎng)性能.包被復(fù)合微量元素產(chǎn)品的適宜添加量為400 mg·kg-1.