方山丹 向潤(rùn)清 范譯丹 范源

摘要：惡性腫瘤已經(jīng)成為嚴(yán)重威脅人類(lèi)健康最主要的疾病之一，腫瘤不僅具有極高的致死率，且腫瘤的發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)，發(fā)病人群也趨于年輕化，因此受到國(guó)內(nèi)外醫(yī)學(xué)界的高度重視?，F(xiàn)代研究中發(fā)現(xiàn)五環(huán)三萜類(lèi)化合物具有良好的抗腫瘤活性，也為將來(lái)開(kāi)發(fā)抗腫瘤新藥打下一定的基礎(chǔ)，總結(jié)了近幾年五環(huán)三萜類(lèi)化合物抗腫瘤活性的研究情況。

關(guān)鍵詞：五環(huán)三萜類(lèi)化合物;抗腫瘤活性;作用機(jī)制

中圖分類(lèi)號(hào)：R285.5?文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A?文章編號(hào)：1007-2349（2019）04-0083-05

五環(huán)三萜類(lèi)化合物是一類(lèi)由6個(gè)異戊二稀結(jié)構(gòu)單元聯(lián)結(jié)而成的萜類(lèi)化合物，廣泛地分布于自然界，五環(huán)三萜類(lèi)化合物按結(jié)構(gòu)類(lèi)型的不同，主要分為四大類(lèi)型，分別是齊墩果烷（Oleanane）型、烏蘇烷（Ursane）型、羽扇豆烷（Lupane）型和木栓烷（Friedelane）型。齊墩果烷型的代表物為齊墩果酸（oleanolic acid，OA）、山楂酸（Maslinic acid，MA）和甘草次酸（Glycyrrhetinic acid，GA）;烏蘇烷型的代表物為熊果酸（Ursolic acid，UA）、科羅索酸（Corosolic acid，CRA）和積雪草酸（Asiatic acid，AIA）;羽扇豆烷型的代表物為樺木酸（betulinic acid，BA）、2，3-羥基樺木酸（23-hydroxyl betulinic acid）;木栓烷型的代表物為雷公藤紅素和扁蒴藤素。本文對(duì)近幾年四類(lèi)五環(huán)三萜化合物抗腫瘤的研究分別進(jìn)行介紹。其具有豐富的生物活性，包括抗腫瘤、抗炎、抗菌、抗病毒、護(hù)肝、抗心律失常調(diào)節(jié)血糖和降血壓等方面的藥理作用[1]。近年來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)五環(huán)三萜類(lèi)化合物能對(duì)多種腫瘤具有較好的抑制作用，且毒副作用較小，因此也逐漸成為科研關(guān)注的的熱點(diǎn)。本文就五環(huán)三萜類(lèi)化合物的結(jié)構(gòu)類(lèi)型、抗腫瘤活性作一綜述。

1?烏蘇烷型五環(huán)三萜化合物抗腫瘤活性

熊果酸（Ursolic acid，UA）在自然界中分布很廣，存在于杜鵑花科植物雄果的葉、果實(shí)，唇形科植物夏枯草的果穗、莖，茜草科植物梔子的果實(shí)等多種不同科、屬植物中。Shan 等[2]應(yīng)用10，20 和 40μmol/L劑量的UA 處理直腸癌 HT-29 細(xì)胞株時(shí)，流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示UA可呈時(shí)間和劑量依賴(lài)性地誘導(dǎo)直腸癌 HT-29 細(xì)胞凋亡;western blot結(jié)果顯示：給予UA后，Bcl-2 和 Bcl-xL 表達(dá)均顯著性降低，且caspase-3，caspase-9的表達(dá)也顯著增加。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明 UA 能促進(jìn)直腸癌 HT-29 細(xì)胞發(fā)生凋亡，其作用機(jī)制可能是通過(guò)下調(diào) Bcl-2和Bcl-xL表達(dá)，其作用機(jī)制可能是通過(guò)激活caspase-3，caspase-9，從而抑制直腸癌 HT-29 細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)其凋亡。Ye Zhang等[3]研究發(fā)現(xiàn)，20 μmol/L 的UA和0.4μmol/L 的奧沙利鉑的聯(lián)合用藥對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞HCT-8 和SW480的抑制率分別為67.22%和72.07%，強(qiáng)于單用20 μmol/L 的UA對(duì)這兩種細(xì)胞的抑制率，分別是45.6%和45.05%，同時(shí)強(qiáng)于單用0.4μmol/L 的奧沙利鉑對(duì)這兩種細(xì)胞的抑制率分別是51.18%和45.2%，提示UA可能有增強(qiáng)奧沙利鉑抑制人結(jié)腸癌細(xì)胞HCT-8 和SW480增殖的作用。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果表明UA和奧沙利鉑聯(lián)合用藥后，也能增強(qiáng)奧沙利鉑誘導(dǎo)人結(jié)腸癌細(xì)胞HCT-8 和SW480凋亡的能力。用western blot 法檢測(cè)ROS因子的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)人結(jié)腸癌細(xì)胞HCT-8 和SW480在給予UA和奧沙利鉑處理后，生產(chǎn)ROS資源的 NADPH蛋白表達(dá)顯著增加，同時(shí)也增加了ROS 表達(dá)水平。相關(guān)研究表明，ROS因子能激活 JNK信號(hào)通路來(lái)促進(jìn)凋亡，提示UA可能是通過(guò)增加ROS因子表達(dá)水平來(lái)增強(qiáng)奧沙利鉑的誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞發(fā)生凋亡的能力。張維文等[4]研究發(fā)現(xiàn)，用不同濃度的UA處理人乳腺癌細(xì)胞株 MCF-7，MTT法結(jié)果顯示UA對(duì)人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7的抑制作用呈濃度依賴(lài)性;流式細(xì)胞儀結(jié)果顯示UA可誘導(dǎo)人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7凋亡，且呈濃度依賴(lài)性，同時(shí)細(xì)胞不同周期的比例也發(fā)生變化，在 50μm ol/L時(shí)，G0-G1占了 90%;用免疫熒光法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)p53在人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7中的表達(dá)增多，提示對(duì)UA誘導(dǎo)人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7凋亡的主要機(jī)制可能是上調(diào)p53 的表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。華杰等[5]研究發(fā)現(xiàn)，采用不同濃度的 UA 干預(yù)人甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞TPC-1，MTT 法結(jié)果顯示UA對(duì) TPC-1 細(xì)胞增殖的抑制呈現(xiàn)出濃度和時(shí)間的依賴(lài)性;流式細(xì)胞儀結(jié)果顯示 UA 可誘導(dǎo) TPC-1 細(xì)胞凋亡呈濃度依賴(lài)性，且將 TPC-1 細(xì)胞的生長(zhǎng)阻滯在S期;QRT-PCR 和Western blot 實(shí)驗(yàn)均顯示 UA可能通過(guò)下調(diào)抗凋亡因子Bcl-2和上調(diào)促凋亡因子Bax和Caspase-9 來(lái)發(fā)揮其誘導(dǎo)甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞TPC-1凋亡的作用;陳錫強(qiáng)等[6]研究發(fā)現(xiàn)，與模型組相比，UA能明顯地抑制接種肝癌細(xì)胞SMMC-7721的斑馬魚(yú)節(jié)間血管生長(zhǎng)，提示UA也可通過(guò)抑制血管生成來(lái)發(fā)揮其抗腫瘤作用。

科羅索酸（Corosolic acid，CRA）又稱(chēng)2α-羥基熊果酸，是一種天然存在的熊果酸衍生物。其來(lái)源于千屈菜科植物大花紫薇的提取物，常以游離形式或皂苷的形式存在于大葉紫薇、枇杷和山楂等植物中。Kyoung Jin Nho等[7]研究發(fā)現(xiàn)，Annexin V-FITC/PI雙染法檢測(cè)結(jié)果顯示 CRA呈濃度依賴(lài)性誘導(dǎo)肺癌細(xì)胞 A549 細(xì)胞凋亡;用Western blot法檢測(cè) bcl-xl 和 survivin 的蛋白表達(dá)情況，結(jié)果表明bcl-xl 和 survivin 的蛋白表達(dá)均減少，提示CRA可能通過(guò)下調(diào)抗凋亡因子bcl-xl 和 survivin 來(lái)誘導(dǎo)肺癌細(xì)胞 A549 細(xì)胞凋亡。歐陽(yáng)慧等研究[8]發(fā)現(xiàn)，用不同濃度CRA處理人非小細(xì)胞肺癌SPC-A-1細(xì)胞，MTT法結(jié)果顯示科羅索酸能夠抑制SPC-A-1人非小細(xì)胞肺癌的生長(zhǎng)增殖，其IC50=1.05×10-6mol/L;吖啶橙（AO）/溴化乙啶（EB）染色法測(cè)定結(jié)果顯示CRA能夠呈劑量依賴(lài)性地誘導(dǎo)人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞SPC-A-1的凋亡。Qi-Lai Cheng等[9]從獼猴桃中分離得到CRA，用MTT法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)：CRA能夠呈濃度和時(shí)間依賴(lài)性地抑制胃癌細(xì)胞BGC823的增殖;RT-PCR結(jié)果顯示 CRA能夠顯著減少抗凋亡因子p65，bcl-2 mRNA的表達(dá);Western blot結(jié)果顯示CRA能減少抗凋亡蛋白 p65，p-IkBa，bcl-2的表達(dá);電泳遷移率變動(dòng)分析法（EMSA）和免疫熒光染色法結(jié)果顯示CRA能夠抑制核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB，p65的易位與衰減，并呈劑量依賴(lài)性地顯著降低NF-κB的DNA結(jié)合活性，進(jìn)而抑制NF-κB的活性，推測(cè)CRA可能通過(guò)下調(diào)NF-κB通路來(lái)誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞BGC823凋亡。Hyun Su Lee等[10]研究發(fā)現(xiàn)，CRA與5-FU聯(lián)合用藥對(duì)人胃癌細(xì)胞SNU-620的抑制作用強(qiáng)于單用5-FU或單用CRA，且在CRA與5-FU聯(lián)合用藥濃度為CRA（100 μM）+5-FU（75 μg/mL）時(shí)，其抗人胃癌細(xì)胞SNU-620 增殖的作用達(dá)到最強(qiáng);V-FITC/PI雙染法結(jié)果表明用CRA與5-FU聯(lián)合用藥處理人胃癌細(xì)胞SNU-620后，能夠顯著增加人胃癌細(xì)胞SNU-620的晚凋比例;western blot 法檢測(cè)凋亡標(biāo)志物Bcl-2，Bim，caspase-3的表達(dá)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與單用5-FU處理人胃癌細(xì)胞SNU-620相比，在CRA與5-FU的聯(lián)合作用下，抗凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá)顯著降低，促凋亡蛋白Bim的表達(dá)顯著增加，同時(shí)還激活了caspase-3因子，提示CRA能夠通過(guò)下調(diào)抗凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá)，上調(diào)促凋亡蛋白Bim的表達(dá)進(jìn)而激活caspase-3凋亡通路來(lái)增強(qiáng)5-FU誘導(dǎo)人胃癌細(xì)胞SNU-620的凋亡的作用。

積雪草酸（Asiatic acid，AIA）又名亞細(xì)亞酸，是傘形科植物積雪草 Centella asiatica（L.）Urban 中提取的三萜酸，AIA也是積雪草中含量較高的烏蘇烷型五環(huán)三萜酸。AIA可以誘導(dǎo)人宮頸癌 HeLa 細(xì)胞凋亡，其 IC50為（80±1.6）μmol/L[11]。AIA對(duì)人胃癌細(xì)胞MK-1、人宮頸癌細(xì)胞 HeLa、鼠黑色素瘤細(xì)胞B16F10 均具有顯著的抑制增殖作用[12]。呂婷婷等研究[13-14]發(fā)現(xiàn)，用MTT法檢測(cè)AIA對(duì)多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞RPM I 8226細(xì)胞增殖的影響，結(jié)果顯示AIA能呈濃度及時(shí)間依賴(lài)性地抑制多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞株RPM I 8226細(xì)胞增殖;Annexin V-FITC/PI雙染法檢測(cè)顯示，隨著AIA濃度的增大，多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞RPM I 8226 細(xì)胞發(fā)生凋亡，主要表現(xiàn)為早期凋亡率的增加;RT-PCR結(jié)果顯示隨著AIA濃度的增加，抗凋亡因子survivin 和 bcl-2的 mRNA表達(dá)也下降，呈劑量依賴(lài)性。相關(guān)研究表明，AIA可通過(guò)降低 bcl-2和bcl-xl的表達(dá)，從而調(diào)節(jié)bcl-2家族中促凋亡和抗凋亡蛋白的比率，激活Caspase-9凋亡通路來(lái)發(fā)揮其誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用。

2?齊墩果烷型五環(huán)三萜化合物抗腫瘤活性

齊墩果烷型五環(huán)三萜化合物在許多植物中的含量較高，其中以齊墩果酸（Oleanoic acid，OA）的含量最豐富，OA同時(shí)也是熊果酸的同分異構(gòu)體。有研究表明OA可以抑制人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞U-87 MG的生存、生長(zhǎng)，血管生長(zhǎng)以及遷移和侵襲[15]。因OA具有對(duì)肝癌細(xì)胞HepG2細(xì)胞毒作用，從而能抑制HepG2細(xì)胞的生長(zhǎng)[16]。魏鑒騰[17]用MTT 法檢測(cè) OA 對(duì)胰腺癌 Panc-28 細(xì)胞的影響，發(fā)現(xiàn)OA 能明顯抑制胰腺癌Panc-28細(xì)胞的增殖，并且隨著濃度的不斷升高，細(xì)胞的存活率會(huì)逐漸下降，呈現(xiàn)濃度依賴(lài)性關(guān)系，其IC50為46.35 μg mL-1。且當(dāng)濃度大于50 μg mL-1時(shí)，OA對(duì)胰腺癌 Panc-28 細(xì)胞的抑制率要高于5-FU。吳林蔚等[18]研究發(fā)現(xiàn)，OA 對(duì)卵巢癌細(xì)胞株IGROV1 和人乳腺癌細(xì)胞株 MDA-MB-231 兩種細(xì)胞地的增殖均有很好的抑制作用。有研究顯示OA能通過(guò)激活P53參與的前凋亡通路和抑制NF-κB通路來(lái)誘導(dǎo)黑色素瘤 B16F-10 細(xì)胞凋亡[19]。

山楂酸（Maslinic acid，MA）是一種天然的齊墩果烷型五環(huán)三萜類(lèi)化合物，同時(shí)也是齊墩果酸的一種衍生物，主要存在于橄欖的果實(shí)和葉子中。科研工作者對(duì)MA的抗腫瘤活性進(jìn)行了許多的研究，早在1989 年，Numata A[20]發(fā)現(xiàn)了MA對(duì)白血病 P-38 腫瘤細(xì)胞具有細(xì)胞毒性，其抑制活性 ED50=13.0 μg/mL。在之后的研究中發(fā)現(xiàn)，MA對(duì)白血病支系多重耐藥性細(xì)胞CEM/ADR5000的IC50為9.0μM，其表明多重耐藥性細(xì)胞并未影響到MA對(duì)腫瘤細(xì)胞的抗性[21]。研究表明，MA可以抑制 NF-κB 的激活以及調(diào)控下游相關(guān)基因來(lái)發(fā)揮其誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用[22]。MA還能降低 NF-κB 的基因表達(dá)水平，包括癌細(xì)胞分化（Cyclin D1、COX-2 和 c-Myc）、凋亡（Survivin、Bcl-2、Bcl-xl和XIAP）、侵襲（MMP-9 和 ICAM-1）以及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)（VEGF）相關(guān)的基因。也有研究發(fā)現(xiàn)MA及MA的一些衍生物（包括OA）都可以誘導(dǎo)黑色素瘤 B16F-10 細(xì)胞凋亡[23]。

甘草次酸（Glycyrrhetinic acid，GA）是中藥甘草中主要有效成分之一，是一種齊墩果烷型五環(huán)三萜化合物。因?yàn)镚A有著廣泛的抗腫瘤作用，且對(duì)正常的體細(xì)胞毒性較小，所以GA在抗腫瘤方面的研究也得到國(guó)內(nèi)外醫(yī)學(xué)研究者的關(guān)注。Yoshiko 等[24]報(bào)道甘草次酸誘導(dǎo)人肝癌 HepG2 細(xì)胞凋亡，呈現(xiàn)劑量依賴(lài)性，激活 caspase 8，下調(diào)抗凋亡蛋白 bcl-2和bcl-xl，同時(shí)促凋亡蛋白 Bax 和 Bak 的表達(dá)未受影響，可推測(cè)GA能通過(guò)選擇性調(diào)控抗凋亡蛋白的表達(dá)來(lái)誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡。18β-甘草次酸是GA的代謝產(chǎn)物，黃煒等[25]研究表明，18β-甘草次酸能呈劑量依賴(lài)性抑制乳腺癌MCF-7細(xì)胞增殖，同時(shí)也具有誘導(dǎo)其凋亡的作用，該實(shí)驗(yàn)也考察了 Ca2+螯合劑對(duì)18-甘草次酸MCF-7細(xì)胞凋亡的作用的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示Ca2+螯合劑能夠抑制18-甘草次酸誘導(dǎo)MCF-7細(xì)胞凋亡的作用，提示18-甘草次酸發(fā)揮其誘導(dǎo)MCF-7細(xì)胞凋亡的作用和Ca2+有著密切的聯(lián)系。姚俊杰等[26]研究發(fā)現(xiàn)GA對(duì)胃癌SGC7901細(xì)胞的增殖的調(diào)控具有雙向性，當(dāng)GA濃度低于100μmol/L時(shí)，能顯著抑制胃癌SGC7901細(xì)胞的增殖。當(dāng)GA濃度超過(guò)100μmol/L，抑制細(xì)胞增殖的能力減弱。GA對(duì)SGC7901細(xì)胞的抑凋亡蛋白Bcl-2的抗凋亡作用也具有雙向性，濃度低于17%的IC50時(shí)增強(qiáng)，高于17%的IC50時(shí)又出現(xiàn)顯著的減弱。Jin Chen等[27]研究發(fā)現(xiàn)，用不同濃度的GA處理肝癌細(xì)胞HCC，用Counting Kit-8（CCK-8）法測(cè)定GA在體內(nèi)和體外抑制肝癌細(xì)胞HCC的增殖活性，CCK-8法結(jié)果顯示GA在體外能呈劑量依賴(lài)性地抑制肝癌細(xì)胞HCC的增殖，在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中GA也能抑制肝癌細(xì)胞HCC移植瘤的生長(zhǎng);流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果表明GA能呈劑量依賴(lài)性地誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞HCC凋亡，并阻滯肝癌細(xì)胞HCC在G0/G1期;用Western Blot法檢測(cè)LC3-II/I比值的變化以評(píng)價(jià)自噬形成，并發(fā)現(xiàn)GA可能通過(guò)抑制自噬和蛋白IRE1α的表達(dá)來(lái)增強(qiáng)其抗腫瘤的效果。研究表明，GA能夠抑制前列腺癌PC3細(xì)胞的增殖、侵襲和遷移，并且與BLM解旋酶的低表達(dá)有關(guān)，而GA促進(jìn)PC3細(xì)胞發(fā)生凋亡與細(xì)胞凋亡因子Caspase-3高表達(dá)有關(guān)[28]。

3?羽扇豆烷型五環(huán)三萜類(lèi)化合物抗腫瘤活性

白樺脂酸（Betulinic acid，BA）又稱(chēng)樺木酸，其在白樺樹(shù)皮中的含量最為豐富，BA也是通過(guò)生物活性引導(dǎo)分離得到的第一種羽扇烷型三萜類(lèi)化合物。因BA在抗HIV和抗黑色素瘤方面有突出的作用，且毒性較低而開(kāi)始受到人們廣泛的關(guān)注，許多體外實(shí)驗(yàn)表明，BA對(duì)黑色素瘤細(xì)胞有很強(qiáng)的選擇性細(xì)胞毒性，并且在攜帶人類(lèi)黑色素瘤的無(wú)胸腺小鼠進(jìn)行的后續(xù)研究中，腫瘤生長(zhǎng)被完全抑制而沒(méi)有毒性[29]，由此也可預(yù)見(jiàn)BA在治療黑色素瘤方面有著良好的開(kāi)發(fā)前景。隨著科研工作者對(duì)BA研究的深入，近年來(lái)發(fā)現(xiàn)，BA除了有較好的抗黑色素瘤作用以外，還擁有廣譜的抗腫瘤作用[30-33]。柏玉冰等[31]從夏枯草中分離得到了BA，并在隨后的MTT實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)BA能夠選擇性地顯著抑制乳腺癌MCF-7、MDA-MB-321細(xì)胞增殖，且對(duì)正常乳腺細(xì)胞MCF-10A抑制不明顯，反映BA能選擇性地抑制腫瘤細(xì)胞。關(guān)瑞宇等[32]研究發(fā)現(xiàn)：不同濃度的BA作用于人結(jié)腸癌 HT-29細(xì)胞，MTT法實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明BA可以在體外水平呈濃度和時(shí)間依賴(lài)性地的抑制人結(jié)腸癌 HT-29 細(xì)胞的增殖;流式細(xì)胞儀結(jié)果顯示BA可以誘導(dǎo)人結(jié)腸癌 HT-29 細(xì)胞凋亡，并呈劑量依賴(lài)性;細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示BA能降低HT-29細(xì)胞的遷移能力;實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)乙酰肝素酶的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)BA可減少人結(jié)腸癌HT-29 細(xì)胞內(nèi)乙酰肝素酶的表達(dá)，提示BA可抑制人結(jié)腸癌HT-29 細(xì)胞內(nèi)乙酰肝素酶的表達(dá)來(lái)抑制腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。也有研究表明，BA可顯著抑制人宮頸癌HeLa細(xì)胞的增殖，其機(jī)制可能是通過(guò)上調(diào)caspase-3、Cyto C蛋白的表達(dá)誘導(dǎo)人宮頸癌HeLa細(xì)胞凋亡[33]。還有研究發(fā)現(xiàn)BA可以呈劑量性和時(shí)間性地抑制人腎癌細(xì)胞的增殖，并且可能通過(guò)線(xiàn)粒體介導(dǎo)的凋亡途徑誘導(dǎo)人腎癌細(xì)胞凋亡，同時(shí)抑制其遷移和侵襲[34]。從這些研究中都可發(fā)現(xiàn)BA能通從多種途徑發(fā)揮其抗腫瘤作用。

BA的一種天然的衍生物2，3-羥基樺木酸（23-hydroxyl betulinic acid）也存在廣大植物中，其也有良好的抗腫瘤活性。葉銀英等[35]研究發(fā)現(xiàn)在體外實(shí)驗(yàn)中2，3-羥基樺木酸對(duì)體外黑色素瘤 B16 細(xì)胞有明顯的抑制作用，同時(shí)在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)2，3-羥基樺木酸能能通過(guò)將黑色素瘤 B16 細(xì)胞阻滯在 G0 ～ G1 期從而促使移植瘤小鼠的腫瘤體積減小。有研究表明，10～160 mg·L-1劑量的2，3-羥基樺木酸對(duì)人胃癌 SGC-7901 細(xì)胞系、人卵巢癌 A0 細(xì)胞系等6種腫瘤細(xì)胞均有明顯的抑制作用，并且呈現(xiàn)一定的劑量依賴(lài)性。該研究也發(fā)現(xiàn)2，3-羥基樺木酸能夠通過(guò)阻滯腫瘤細(xì)胞周期來(lái)達(dá)到誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的目的[36]。相關(guān)研究表明，2，3-羥基樺木酸有明顯抑制 HepA 實(shí)體瘤的作用，且低、中、高劑量組抑瘤率均在30 %以上[37]。

4?木栓烷型五環(huán)三萜類(lèi)化合物抗腫瘤活性

從雷公藤中分離純化的南蛇藤素，也叫雷公藤紅素，是一種木栓烷型的五環(huán)三萜化合物。王曉南等[38]發(fā)現(xiàn)，MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明雷公藤紅素能呈濃度依賴(lài)和時(shí)間依賴(lài)性抑制人白血病細(xì)胞U937細(xì)胞增殖;Annexin V-FITC/PI結(jié)果顯示雷公藤紅素能呈濃度依賴(lài)性方式誘導(dǎo)U937細(xì)胞凋亡;流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明雷公藤紅素能將細(xì)胞生長(zhǎng)期阻滯在G0/G1期，提示雷公藤紅素可能通過(guò)將細(xì)胞阻滯于G0/G1期來(lái)誘導(dǎo)人白血病細(xì)胞U937細(xì)胞的凋亡。王曉南等[39]在后續(xù)的研究發(fā)現(xiàn)，雷公藤紅素能顯著地抑制K562細(xì)胞增殖，其IC50是（2.15±0.11）μmol/L;并呈劑量依賴(lài)性方式來(lái)誘導(dǎo)白血病K562細(xì)胞發(fā)生凋亡。徐佳等[40]研究中發(fā)現(xiàn)，用濃度為 0.5、1.0μmol/L 的雷公藤紅素作用食管癌ECA-109 細(xì)胞24 h，MTT 法結(jié)果顯示雷公藤紅素對(duì) ECA-109 細(xì)胞粘附的影響，且其可呈劑量依賴(lài)地減弱食管癌ECA-109細(xì)胞的粘附能力;劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示雷公藤紅素能呈時(shí)間和劑量依賴(lài)性抑制食管癌ECA-109 細(xì)胞的遷移;Transwell 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，雷公藤紅素呈濃度型地抑制食管癌ECA-109 細(xì)胞的侵襲，PCR 和 Western blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示雷公藤紅素對(duì)Wnt信號(hào)通路中相關(guān)蛋白β-Catenin、LRP6的表達(dá)也有顯著的抑制作用，提示雷公藤紅素可能通過(guò)下調(diào)Wnt信號(hào)通路來(lái)發(fā)揮其對(duì)食管癌 ECA-109 細(xì)胞的調(diào)控作用。

從衛(wèi)矛科植物南蛇藤中分離的扁蒴藤素是一種天然存在的木栓烷型五環(huán)三萜類(lèi)化合物，徐美珍等[42]報(bào)道，在體外實(shí)驗(yàn)中，扁蒴藤素對(duì)白血病 P388 細(xì)胞有很強(qiáng)的抑制作用。閨娥等[43]研究中發(fā)現(xiàn)，扁蒴藤素能夠通過(guò)抵抗藥乳腺癌細(xì)胞 MCF-7/TAX的對(duì)紫衫醇產(chǎn)生的耐藥性來(lái)發(fā)揮其對(duì)乳腺癌細(xì)胞 MCF-7/TAX的抑制作用。Ju-Hyung等[44]研究發(fā)現(xiàn)，扁蒴藤素能夠通過(guò)調(diào)節(jié)AKT/FOXO3a通路來(lái)誘導(dǎo)結(jié)腸癌細(xì)胞凋亡。李暐等[45]研究發(fā)現(xiàn)，用不同的濃度作用于人鼻咽癌HNE2 細(xì)胞，MTT結(jié)果顯示扁蒴藤素對(duì)人鼻咽癌HNE2 細(xì)胞的增殖有顯著的抑制作用;流式細(xì)胞術(shù)和western blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明扁蒴藤素可誘導(dǎo)人鼻咽癌HNE2凋亡，此外，扁蒴藤素能上調(diào) Bim 等前促凋亡蛋白的表達(dá)，減少Bcl-xL等抗凋亡蛋白的表達(dá)，提示扁蒴藤素可能通過(guò)上調(diào) Bim蛋白的表達(dá)，減少Bcl-xL等抗凋亡蛋白的表達(dá)進(jìn)而誘導(dǎo)人鼻咽癌HNE2發(fā)生凋亡。

5?小結(jié)

綜上所述，五環(huán)三萜類(lèi)化合物不僅能從誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、抑制細(xì)胞的增殖、遷移、阻滯細(xì)胞周期、抗血管生成等多種途徑中發(fā)揮其抗腫瘤作用，且毒性較低，這類(lèi)化合物在未來(lái)開(kāi)發(fā)抗腫瘤藥物中蘊(yùn)藏著巨大的潛力。但大多數(shù)五環(huán)三萜類(lèi)化合物目前還存在著不溶于水，且生物利用度較低的局限性，導(dǎo)致該類(lèi)化合物在利用和開(kāi)發(fā)受到了很大的限制，將來(lái)對(duì)五環(huán)三萜類(lèi)的開(kāi)發(fā)利用還需要考慮怎樣提高其生物利用度，此外在對(duì)五環(huán)三萜類(lèi)研究中也發(fā)現(xiàn)該類(lèi)化合物不僅本身具有抗腫瘤作用外，還能增強(qiáng)其他抗癌藥物抗腫瘤作用，其具體的作用機(jī)制尚待進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，這同時(shí)也為更合理地開(kāi)發(fā)利用五環(huán)三萜類(lèi)化合物的抗腫瘤作用提供了一個(gè)新的思路。

參考文獻(xiàn)：

[1]程曉華，熊玉卿.五環(huán)三萜皂苷的藥理作用研究進(jìn)展[J].中草藥，2007，38（5）：792-795.

[2]Shan JZ，Xuan YY，Zheng S，et al.Ursolic acid inhibits proliferation and induces apoptosis of HT-29 colon cancer cells by inhibiting the EGFR/MAPK pathway.J Zhejiang Univ Sci B，2009，10：668-674.

[3]Zhang Ye，Huang Longchang，Shi，Haoze，et al.Ursolic acid enhances the therapeutic effects of oxaliplatin in colorectal cancer by inhibition of drug resistance[J]，2018，109（1）：94-102.

[4]張維文，黎銀燕，張貴平，等.熊果酸誘導(dǎo)人乳腺癌細(xì)胞 MCF-7凋亡的實(shí)驗(yàn)研究[J].中藥材，2005，28（4）：297 -301.

[5]華杰，阮凌玉，馬定乾，等.熊果酸誘導(dǎo)甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞TPC-1凋亡的實(shí)驗(yàn)[J].昆明醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2018，39（1）：10-15.

[6]陳錫強(qiáng)，程麗芳，徐新剛，等.熊果酸對(duì)斑馬魚(yú)血管生成及斑馬魚(yú)移植癌的抑制作用[J].中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2015，31（7）：1004-1008.

[7]Corosolic acid induces apoptotic cell death in human lung adenocarcinoma A549 cells in vitro[J].oodChem Toxicol，2013，56：8-17.

[8]歐陽(yáng)慧，封亮，徐友華，等.不同產(chǎn)地夏枯草中抗非小細(xì)胞肺癌成分科羅索酸的差異比較[J].中華中醫(yī)藥雜志，2012，27（6）：1571-1574.

[9]Cheng，Qi-Lai;Li，Hong-Liang;Li，Ying-Chen，et al.CRA（Crosolic Acid）isolated from Actinidia valvata Dunn.Radix induces apoptosis of human gastric cancer cell line BGC823 in vitro via down-regulation of the NF-κB pathway[J].FOOD AND CHEMICAL TOXICOLOGY，2017，105：475-485.

[10]Hyun Su Lee;Jun Beom Park;Myung Sun Lee，et al.Corosolic acid enhances 5-fluorouracil-induced apoptosis against SNU？620 human gastric carcinoma cells by inhibition of mammalian target of rapamycin[J].Molecular Medicine Reports，2015，12（3）：4782-4788.

[11]23-Hydroxyursolic acid causes cell growth-inhibition byinducing caspase-dependent apoptosis in human cervicalsquamous carcinoma HeLa cells[J].Anticancer Res，2009，29（4）：995-1000.

[12]Yoshida M，F(xiàn)uchigami M，Nagao T，et al.Antiproliferative constituents from umbelliferae plantsVII.Active triterpenes and rosmarinic acid from Centellaasiatica[J].Biol Pharm Bull，2005，28（1）：173-175.

[13]呂婷婷，劉 芳，陳 燕，等.積雪草酸對(duì)多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞增殖活性的影響及其機(jī)制探討[J].中草藥，2010，41（9）：1484-1488.

[14]呂婷婷，陳燕，姜旭東，等.積雪草酸對(duì)慢性髓細(xì)胞白血病急變株 K562細(xì)胞增殖的影響及其機(jī)制[J].中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，2010，30（17）：1428-1431.

[15]Guo G，Yao W，Zhang Q，et al.Oleanolic acid suppresses migration and invasion of malignant glioma cells by inactivating MAPK/ERK signaling pathway[J].PLoS One，2013，8（8）：e72079.

[16]Bao X，Gao M，Xu H，et al.A novel oleanolic acid-loaded PLGA-TPGS nanoparticle for liver cancer treatment[J].Drug Dev Ind Pharm，2014，15：1-11.

[17]魏鑒騰.齊墩果酸的抗腫瘤作用及其作用機(jī)制研究[D].北京：中國(guó)科學(xué)院研究生院（海洋研究所），2012：1-108.

[18]吳林蔚，蒲薔，陳曉珍，等.齊墩果酸對(duì)卵巢癌細(xì)胞 IGROV1和乳腺癌細(xì)胞 MDA-MB-231 生長(zhǎng)的抑制作用[J].應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報(bào)，2010，16（2）：202-204.

[19]Pratheeshkumar P，Kuttan G.Oleanolic acid induces apoptosis by modulating p53，Bax，Bcl-2 and caspase-3 gene expression and regulatesthe activation of transcription factors and cytokine profile in B16F[J].Environ Pathol Toxicol Oncol，2011，30（1）：21-31.

[20]Numata A，Yang P，Takahashi C，et al.Cytotoxic triterpenes from a Chinese medicine，Goreishi.[J].Chemical & Pharmaceutical Bulletin.1989，37（3）：648-651.

[21]Wang Y F，Lai G F，Efferth T，et al.New Glycosides from Tetracentron sinense and Their Cytotoxic Activity[J].Chemistry & Biodiversity，2006，3（9）：1023-1030.

[22]Parra A，Rivas F，Martin-Fonseca S，et al.Maslinic acid derivatives induce significant apoptosis in b16f10 murine melanoma cells[J].European Journal of Medicinal Chemistry，2011，46（12）：5991-6001.

[23]Satomi Y，Nishino H，Shibata S.Glycyrrhetinic acid and related compounds induce G1 arrest and apoptosis in human hepatocellu-lar carcinoma HepG2[J].Anticancer Res，2005，25（6B）：4043.

[24]黃煒，陳新美，張志凌，等.18β-甘草次酸誘導(dǎo)人乳腺癌細(xì)胞凋亡及其細(xì)胞內(nèi)Ca2+水平的變化[J].中國(guó)癌癥雜志，2006，16（2）：102.

[25]姚俊杰.甘草次酸影響自噬及Bcl-2抗凋亡抑制胃癌SGC7901細(xì)胞增殖[D].河南：新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院，2016：1-57.

[26]Jin Chen，Zhao-qi Zhang，Jia Song，et al 18β-Glycyrrhetinic-acid-mediated unfolded protein response induces autophagy and apoptosis in hepatocellular carcinoma[J].Scientific Reports，2018，19;8（1）：9365.

[27]陳福.甘草次酸抑制前列腺癌細(xì)胞侵襲遷移的分子機(jī)制研究[D].貴州：貴州大學(xué)，2017：1-56.

[28]Pisha E，Cahi H，Lee I-S，et al.Discovery of betulinic as a se-lective inhibitor of human melanoma that functions by inductionof apoptosis.Nature Med，1995，1：1046.

[29]張薇，王澤鋒，王靜，等.烏骨藤化學(xué)成分及其抗腫瘤活性[J].中成藥，2017，39（2）：334-338.

[30]柏玉冰，李春，周亞敏，等.夏枯草的化學(xué)成分及其三萜成分的抗腫瘤活性研究[J].中草藥，2015，24：3623-3629.

[31]關(guān)瑞宇.白樺脂酸對(duì)人結(jié)腸癌 HT-29 細(xì)胞增殖、凋亡、遷移的影響及其抗腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制探討[D].山西：山西醫(yī)科大學(xué)，2016：5-41.

[32]陳秀瑋，王丹云，劉佳，等.白樺脂酸對(duì)人宮頸癌HeLa細(xì)胞的抑制作用及其機(jī)制研究[J].中國(guó)癌癥雜志，2012，22（4）：252-256.

[33]Chunming Yang，Yan Li，Liye Fu，et al.Betulinic acid induces apoptosis and inhibits metastasis of human renal carcinoma cells in vitro and in vivo[J].J Cell Biochem，2018，4：1-12.

[34]葉銀英.2，3-羥基樺木 酸體外和體內(nèi)抗黑色素瘤作用的研究[J].中國(guó)腫瘤臨床與康復(fù)，2000，7（1）：5-7.

[35]葉銀英，何道偉，葉文才，等.23-羥基樺木酸體外抗惡性腫瘤作用的研究[J].東南大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2001，20（3）：141-144.

[36]鐘長(zhǎng)斌，李祥，陳建偉.2，3-羥基白樺酸體內(nèi)抗腫瘤作用實(shí)驗(yàn)研究[J].Journal of Practical Traditional Chinese lnternal Medicine，2003，17（2）：80.

[37]王曉南，吳青，楊旭，等.雷公藤紅素對(duì)U937細(xì)胞Notch 1、NF-κB信號(hào)蛋白通路的調(diào)控作用[J].癌癥雜志，2010，4：422-428.

[38]王曉南，吳青，楊旭，等.雷公藤紅素對(duì)白血病細(xì)胞Akt信號(hào)通路的影響及在細(xì)胞凋亡中的作用[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志，2011，2：228-232.

[39]徐佳，伍春蓮，等.雷公藤紅素抑制食管癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移及其機(jī)制[J].生理學(xué)報(bào)，2015，67（3）：341-347.

[40]徐佳，伍春蓮，黃杰，等.雷公藤紅素通過(guò)影響Akt信號(hào)通路和整合素表達(dá)抑制肺癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移[J].中國(guó)中藥雜志，2015，6：1129-1133.

[41]徐美珍.南蛇藤屬植物化學(xué)成分研究進(jìn)展[J].中草藥，1997;28（8）：502-505.

[42]閨娥，杜晶春，董桂蘭，等.扁蒴藤素對(duì)紫杉醇耐藥乳腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用[J].貴州醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2016，41（9）：1029-1032.

[43]Ju-Hyung Park，Jin-Kyung KimPristimerin，et al.a naturally occurring triterpenoid，attenuates tumorigenesis in experimental colitis-associated colon cancer[J].Phytomedicine，2018，42：164-171.

[44]李暐，郭江睿，姚正盛，等.扁蒴藤素對(duì)人鼻咽癌HNE2細(xì)胞增殖的抑制作用研究[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2015，35：6826-6830.