關(guān)于衛(wèi)生紙中細(xì)菌菌落總數(shù)測量不確定度評定的分析

賈 亮

（山西省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗研究院，山西 太原 030012）

1 引言

根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)GB 20810-2006《衛(wèi)生紙（含衛(wèi)生紙原紙）》，微生物指標(biāo)一共有四項，其中大腸菌群、金黃色葡萄球和溶血性鏈球菌三項指標(biāo)要求為“不得檢出”；而細(xì)菌菌落總數(shù)（CFU/g）指標(biāo)有具體規(guī)定，衛(wèi)生紙≤600CFU/g，衛(wèi)生紙原紙≤500CFU/g。細(xì)菌菌落總數(shù)的檢驗方法不同于食品、化妝品類的通用標(biāo)準(zhǔn)，目前有關(guān)細(xì)菌菌落總數(shù)測量不確定度評定的分析有關(guān)近百個期刊文章中，有超過85%的文章都是與食品相關(guān)的，有關(guān)衛(wèi)生紙產(chǎn)品的文章還是空白。由于衛(wèi)生紙產(chǎn)品細(xì)菌菌落總數(shù)檢驗方法在GB 20810-2006中的附錄A中有具體的要求，因此，其細(xì)菌菌落總數(shù)的不確定度就需要單獨考慮，由此文中針對這一問題進(jìn)行了專門研究。

2 測量參數(shù)概述

主要儀器：電子天平（220g）、量筒（250mL）、移液器(1mL)、恒溫培養(yǎng)箱。

參數(shù)：細(xì)菌菌落總數(shù)。

3 原理及方法

依據(jù)GB 20810-2006《衛(wèi)生紙（含衛(wèi)生紙原紙）》中附錄A.3.1細(xì)菌菌落總數(shù)的檢測進(jìn)行衛(wèi)生紙中的細(xì)菌菌落總數(shù)的檢驗。在超靜工作臺上用無菌方法開啟4個小包裝，從中稱量樣品10g，剪碎后加入到200mL滅菌生理鹽水中，充分混勻，得到一個生理鹽水樣液。待上述樣液自然沉降后取上清液做菌落計數(shù)。共接種5個平皿，每個平皿中加入1mL樣液，然后用冷卻至45℃左右熔化的營養(yǎng)瓊脂20mL，倒入平皿中，充分混勻。待瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平皿，置36℃培養(yǎng)溫箱內(nèi)培養(yǎng)48h。然后計算平皿上的細(xì)菌菌落數(shù)目[1]。

5塊營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板上的細(xì)菌菌落總數(shù)A，稀釋度為，衛(wèi)生紙中的細(xì)菌菌落總數(shù)X按下式計算：

4 結(jié)果與討論

4.1 測量不確定度的來源

依據(jù)上述衛(wèi)生紙中細(xì)菌菌落總數(shù)的檢測原理及測量模型，結(jié)合檢測經(jīng)驗，分析衛(wèi)生紙中細(xì)菌菌落總數(shù)的測量不確定度來源主要有：

（1）由衛(wèi)生紙中細(xì)菌菌落總數(shù)測量的重復(fù)性引入的不確定度。

（2）由天平稱量時引入的不確定度。

（3）由量筒量取生理鹽水時引入的不確定度。

（4）由移液器移取樣液時引入的不確定度。

以上不確定度來源，第一種來源可以用A類不確定度評定，后三種來源可用B類不確定度評定。

4.2 測量不確定度評定

4.2.1 A類不確定度評定

衛(wèi)生紙在檢測細(xì)菌菌落總數(shù)時，每個試樣需要檢測5份，計算其平均值后報出細(xì)菌菌落總數(shù)。本次報告中，由同一人員對15個樣品進(jìn)行重復(fù)性檢測。用菌落總數(shù)的平均值直接計算標(biāo)準(zhǔn)偏差，因其數(shù)據(jù)的發(fā)散性較大，計算出的樣本標(biāo)準(zhǔn)差會很大，不符合正態(tài)分布規(guī)律，所以對檢驗結(jié)果取其對數(shù)，然后計算出樣本檢驗結(jié)果對數(shù)值的均值和重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)偏差，其數(shù)據(jù)處理過程見表1。

檢驗結(jié)果對數(shù)值的重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)偏差為：

檢驗結(jié)果對數(shù)值平均值的重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)偏差為：

表1 衛(wèi)生紙中細(xì)菌菌落總數(shù)檢測結(jié)果

4.2.2 B類不確定度評定

樣品初始液制備過程時，使用220g的電子天平稱取10g的樣品，加入到用250mL量筒量取的200mL滅菌生理鹽水中。根據(jù)JJG 1036-2008《電子天平》和JJG196-2006《常用玻璃量器》，220g電子天平最大允許誤差為0.0001g， 250mL量筒的容量允許差為1.0mL，按均勻分布處理，其標(biāo)準(zhǔn)不確定度分別為 0.0001/=0.00058g、1.0/=0.58mL。初始液向平皿轉(zhuǎn)移過程中，使用1mL移液器量取1mL初始液至平皿中，根據(jù)JJG 646-2006《移液器》其容量允許差分別為0.015mL，按均勻分布處理，其標(biāo)準(zhǔn)不確定度分別為0.015/=0.0087mL。

稀釋過程中相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

uB=[（0.00058/10）2+（0.58/200）2+ 0.00872]1/2=0.0100

4.3 合成不確定度

合成相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度：ucr=［0.01512+0.01002 ］1/2=0.10。

合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度：uC=2.74×0.10=0.27。

4.4 測量不確定度報告

5 結(jié)論

影響衛(wèi)生紙中細(xì)菌菌落總數(shù)測量不確定度的因素較多，文中主要對衛(wèi)生紙中細(xì)菌菌落總數(shù)測量不確定度的4個主要來源引入的不確定度進(jìn)行了分析處理[2]。對A類和B類不確定度進(jìn)行了評定，其中A類不確定度的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.0151；B類不確定度的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.0100；由此計算出合成不確定度為0.27。在做這個實驗之前筆者查閱了近百篇相關(guān)論文，所做的這一結(jié)果基本為可接受范圍，如果按標(biāo)準(zhǔn)正確操作，基本能夠保證檢驗結(jié)果的正確性。通過這一實驗也進(jìn)一步完善了衛(wèi)生紙的細(xì)菌菌落總數(shù)檢驗方法，大大提高了檢驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。