張 璐

（本溪鋼鐵（集團(tuán)）歪頭山醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧 本溪 117006）

乙型肝炎病毒（HBV）有著比較高的感染率，一旦感染，就有可能發(fā)生肝炎、肝硬化甚至是肝癌等臨床表現(xiàn)，對(duì)患者的身心健康及生命安全造成嚴(yán)重危害。因此，為有效防治乙型肝炎，就需要積極做好HBV的檢測(cè)工作[1]。臨床以往在診斷乙型肝炎感染時(shí)，主要采取ELISA法來(lái)檢測(cè)患者體內(nèi)的HBV血清標(biāo)志物，但是無(wú)法實(shí)現(xiàn)定量分析，也不能對(duì)患者感染HBV的復(fù)制情況做出準(zhǔn)確判斷[2]。基于此，本文以我院320例疑似乙型肝炎患者為例，就CLIA 法在HBV感染性標(biāo)志物檢測(cè)中的應(yīng)用效果展開(kāi)探討。報(bào)道如下。

表1 兩種方法HBV感染性標(biāo)志的陽(yáng)性檢出率對(duì)比[n（%）]

1 資料與方法

1.1 一般資料：選取我院收治的320例疑似乙型肝炎患者為研究對(duì)象，入選時(shí)間為2015年8月至2017年9月。其中男女分別有208例與112例；年齡為18~67歲，平均（42.5±2.7）歲。所有患者均檢測(cè)，均符合《病毒性肝炎防治方案》中的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 方法：①儀器及試劑：CLIA法中使用的儀器為鄭州安圖生物L(fēng)UMO化學(xué)發(fā)光儀，檢測(cè)試劑同樣由安圖綠科生物工程有限公司提供；ELISA法中使用的儀器是由深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司提供的型號(hào)為MR-96A的酶標(biāo)儀，試劑由上海科華生物工程股份有限公司提供。嚴(yán)格按說(shuō)明書開(kāi)展相關(guān)操作。②檢測(cè)方法：早晨空腹?fàn)顟B(tài)下抽取患者10 mL的靜脈下，以3000 r/min的速率離心15 min，隨后將血清析出。將血清樣本分成兩份，分別應(yīng)用CLIA法與ELISA法對(duì)血清中的HBV感染性標(biāo)志物（包括HBsAg、HBeAb、HBeAg、HBsAb及HBcAb等）進(jìn)行檢測(cè)。

1.3 判定標(biāo)準(zhǔn)：測(cè)定值達(dá)到或高于參考值上線，則為陽(yáng)性。其中，HBsAg的參考值上限為0.2 ng/mL，HBeAb為2.0 NCU/mL，HBeAg為0.05 NCU/mL，HBsAb為10.0 mIU/mL，HBcAb為1.5 NCU/mL。在靈敏度試驗(yàn)中，采取衛(wèi)生部臨檢中心提供的定值參比血清，即1.0 ng/mL的HBsAg。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：采用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料用百分比（%）、計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，分別用χ2與t進(jìn)行檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 HBV感染性標(biāo)志物兩種方法的檢測(cè)結(jié)果：應(yīng)用CLIA法檢測(cè)時(shí)，血清HBsAg、HBeAb及HBeAg的陽(yáng)性檢出率相比于ELISA法明顯升高（P＜0.05），見(jiàn)表1。

2.2 兩種方法對(duì)低水平HBsAg的檢測(cè)結(jié)果及靈敏度：實(shí)驗(yàn)顯示，當(dāng)HBsAg低水平的檢測(cè)值不足1.0 IU/mL時(shí)，CLIA法的陽(yáng)性檢出率顯著高于ELISA法（P＜0.05）。采取定值參比血清，并用陰性血清展開(kāi)倍比稀釋，同時(shí)應(yīng)用兩種方法進(jìn)行靈敏度檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)CLIA法與ELISA法檢出的最低濃度分別為0.031 IU/mL與0.128 IU/mL。

3 討 論

現(xiàn)階段，臨床主要通過(guò)對(duì)HBV感染性標(biāo)志物進(jìn)行檢測(cè)，從而達(dá)到診治乙型肝炎的目的。以往主要采取ELISA法來(lái)對(duì)乙型肝炎患者進(jìn)行診斷，此種方法有著較高的準(zhǔn)確率，且操作簡(jiǎn)便，但無(wú)法展開(kāi)定量分析，檢測(cè)結(jié)果也有可能出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況。而作為一種新型的分析技術(shù)，CLIA法的靈敏度較高，其主要通過(guò)發(fā)光底物自身所具備的發(fā)光強(qiáng)度來(lái)進(jìn)行檢測(cè)，具有準(zhǔn)確率高、線性寬、操作簡(jiǎn)便等優(yōu)勢(shì)，可有效彌補(bǔ)ELISA法的不足之處[3]。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，CLIA法對(duì)HBsAg、HBeAb及HBeAg的陽(yáng)性檢出率相比于ELISA法明顯升高（P＜0.05），這是因?yàn)镃LIA法采用的是體積小但表面積大的固相載體來(lái)作為順磁性微粒，有著更大的反應(yīng)面積。此外，標(biāo)志物可進(jìn)行循環(huán)利用，因而將發(fā)光時(shí)間有效延長(zhǎng)，增加了強(qiáng)度，將HBV的感染進(jìn)程準(zhǔn)確顯示出來(lái)，實(shí)現(xiàn)了陽(yáng)性檢出率及檢測(cè)靈敏度的提高。

此外，CLIA法對(duì)低水平HBsAg的檢測(cè)敏感性顯著高于ELISA法（P＜0.05），且CLIA法與ELISA法檢出的最低濃度分別為0.031 IU/mL與0.128 IU/mL。這一結(jié)果表明對(duì)乙型肝炎患者展開(kāi)CLIA檢測(cè)時(shí)，可將其血清中的HBsAg快速檢測(cè)出來(lái)，充分防止低水平HBsAg樣本漏檢以及假陰性等情況的發(fā)生。綜上所述，相比于ELISA法，CLIA法對(duì)HBV感染性標(biāo)志物的檢測(cè)準(zhǔn)確率更高，可作為診斷乙型肝炎的一項(xiàng)重要檢測(cè)方法，并動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)患者的病情，具有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值。