李鐵純，侯冬巖，回瑞華，刁全平

(鞍山師范學(xué)院 化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院，遼寧 鞍山 114007)

鯽魚學(xué)名Carassius auratus，簡稱鯽，俗名鯽瓜子、月鯽仔、土鯽、河鯽等,常見于歐亞地區(qū)，為淡水魚.鯽魚主要是以植物為食的雜食性魚，肉質(zhì)細(xì)嫩，營養(yǎng)價值很高，富含蛋白質(zhì)、脂肪、脂肪酸、維生素、鈣、磷、鐵等礦物質(zhì).鯽魚藥用價值極高，其性平味甘，入胃、腎,具有和中補(bǔ)虛、除羸、溫胃進(jìn)食、補(bǔ)中生氣之功效,是我國重要食用魚類之一.有關(guān)鯽魚的養(yǎng)殖、加工、營養(yǎng)作用和食用的研究報道較多，而對于鯽魚營養(yǎng)成分的研究報道較少，特別是關(guān)于鯽魚不同部位脂肪酸的研究未見報道.本文采用Bligh-Dyer提取方法分別對鯽魚不同部位的脂肪油進(jìn)行提取[1-3],進(jìn)行甲酯化處理,利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀對其組成和相對百分含量進(jìn)行比較分析,為更好地開發(fā)和利用鯽魚提供依據(jù).

1 實驗部分

1.1 儀器、試劑與材料

HP6890-5973氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國Hewlett Packard公司)；HH-2電子恒溫水浴鍋(深圳天南海北實業(yè)有限公司)；80-2B臺式離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠)；KQ-250B型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；RE-52C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(上海亞榮盛華儀器廠)；

石油醚(60～90 ℃)、正己烷、甲醇、氯仿、氫氧化鉀(所用試劑均為分析純，水為二次蒸餾水).

樣品：購于鞍山市某水產(chǎn)市場，鯽魚5尾，每尾均150 g左右.

1.2 樣品前處理

將新鮮的鯽魚用清水洗凈后進(jìn)行解剖，分別取魚頭、魚肉、魚籽、魚皮，再清洗干凈，搗碎后，分別放入冰箱備用.

1.3 脂肪油的提取

采用Bligh-Dyer法提取鯽魚不同部位的脂肪油，準(zhǔn)確稱取經(jīng)1.2處理過的魚頭、魚肉、魚籽、魚皮、各5.00 g放入500 mL錐形瓶中，分別加入150 mL甲醇-氯仿(2∶1.5 體積比)溶液和 40 mL蒸餾水，攪拌24 h后，加入50 mL氯仿和50 mL蒸餾水，再攪拌30 min，經(jīng)過濾，取有機(jī)相得到黃色透明油狀提取液[4].脂肪油提取率為：鯽魚皮26.4%、鯽魚頭16.0%、鯽魚籽15.2%、鯽魚肉12.0%，見圖1.

圖1 鯽魚不同部位脂肪油的提取率

1.4 脂肪酸的甲酯化

分別吸取鯽魚不同部位的脂肪油0.5 mL，加入8.0 mL正己烷和4.0 mL(0.5 mol/L)KOH-CH3OH溶液，水浴回流20 min，冷卻至室溫，加入10 mL水，超聲提取10 min，以3 500 r/min速度離心.取上清液并加入無水硫酸鈉干燥后，待做GC-MS分析.

1.5 色譜條件

色譜柱：HP-530 m×0.25 mm×0.33 μm彈性石英毛細(xì)管柱；色譜柱溫度：150 ℃升到200 ℃，升溫速率為10 ℃/min，200 ℃升到250 ℃，升溫速率為5 ℃/min，250 ℃升到280 ℃，升溫速率為10 ℃/min(保持5 min)；進(jìn)樣口溫度為300 ℃；溶劑延遲3 min；進(jìn)樣量：0.4 μL；分流比：50∶1；載氣：氦氣.

1.6 質(zhì)譜條件

離子源：電子轟擊源；離子源溫度：230 ℃；電離電壓：70 eV；電子倍增器電壓：1 988 V；發(fā)射電流：34.6 μA；接口溫度：230 ℃；掃描范圍:20～500 m/z.

1.7 分析測定

取0.4 μL經(jīng)1.4處理過的樣品,用GC/MS進(jìn)行測定.由化學(xué)工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)檢索譜圖庫,并與質(zhì)譜圖集的標(biāo)準(zhǔn)譜圖進(jìn)行對照,確定鯽魚不同部位化學(xué)成分及各化學(xué)成分的相對百分含量.

2 實驗結(jié)果

鯽魚不同部位脂肪酸甲酯組成的總離子流圖如圖2～5所示.

圖2 鯽魚頭脂肪酸甲酯總離子流圖

圖3 鯽魚肉脂肪酸甲酯總離子流圖

圖4 鯽魚籽脂肪酸甲酯總離子流圖

圖5 鯽魚皮脂肪酸甲酯總離子流圖

鯽魚不同部位脂肪酸甲酯組成及相對百分含量測定結(jié)果對比如表1.

表1 鯽魚各部位脂肪酸甲酯組成及相對百分含量

由表1可知，鯽魚頭中鑒定出10種脂肪酸，飽和脂肪酸為20.17%，不飽和脂肪酸為61.12%，檢出率為81.29%；鯽魚肉中鑒定出9種脂肪酸，飽和脂肪酸為22.67%，不飽和脂肪酸為68.79%，檢出率為91.46%；鯽魚籽中鑒定出24種脂肪酸，飽和脂肪酸為21.04%，不飽和脂肪酸為73.78%，檢出率為94.82%；鯽魚皮中鑒定出17種脂肪酸，飽和脂肪酸為22.40%，不飽和脂肪酸為67.26%，檢出率為89.66%.

3 討論

鯽魚不同部位脂肪酸含量均較高，其組成主要是不飽和脂肪酸.采用 Bligh-Dyer法提取鯽魚不同部位脂肪油避免了在提取過程中由于溫度升高引起不飽和脂肪酸的變性和損失.

由實驗結(jié)果可知，鯽魚不同部位均含有豐富的脂肪酸，飽和脂肪酸的相對百分含量從多到少的順序是:鯽魚肉、鯽魚皮、鯽魚籽、鯽魚頭.不飽和脂肪酸的相對百分含量從多到少的順序是:鯽魚籽、鯽魚肉、鯽魚皮、鯽魚頭.

鯽魚不同部位均鑒定出二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)，其結(jié)構(gòu)式如圖6.

圖6 EPA和DHA的結(jié)構(gòu)式

EPA和DHA主要來源于海洋魚類，植物油中不含有EPA和DHA[5].EPA和DHA是人體不能合成的必需脂肪酸，在人體中具有重要的生物學(xué)意義[6-12].近年來，隨著人們對EPA和DHA作用的深入了解和普遍認(rèn)同，EPA、DHA保健品和藥品的研究及開發(fā)將成為海洋魚類綜合利用的一個重要領(lǐng)域.