馬巧芬 馮磊 張興鋒

【摘 要】目的：探討陰道分泌物涂片BTR染色鏡檢結(jié)合AV/BV五聯(lián)定性酶化學(xué)反應(yīng)法在劃分清潔度判定中的應(yīng)用，從而優(yōu)化陰道分泌物清潔度的劃分方法。方法：回顧性分析我院2016年5月1日至2017年4月30日所有患者陰道分泌物進行判定。最終根據(jù)各項結(jié)果對陰道清潔度做出綜合評判。結(jié)果：3384例BV，鏡檢BV形態(tài)典型，SNa陽性，確認為BV 2954例（87.3%）;鏡檢BV形態(tài)典型，SNa陰性，考慮為SNa失效，最終認定為BV 102例（2%）;鏡檢BV形態(tài)不典型，初始判定為雜菌，SNa陽性，綜合確認為BV 328例（9.2%）。結(jié)論：根據(jù)陰道分泌物BTR染色鏡檢結(jié)合AV/BV五聯(lián)定性酶化學(xué)反應(yīng)檢測結(jié)果，讓清潔度的判定更加準(zhǔn)確、方便實用。

【關(guān)鍵詞】陰道分泌物;鏡檢;五聯(lián)酶化學(xué)反應(yīng)法;清潔度

【中圖分類號】R446.19【文獻標(biāo)識碼】B【文章編號】1005-0019（2019）17--02

陰道分泌物是婦產(chǎn)科常規(guī)檢查，通過對陰道分泌物清潔度的判定來了解陰道內(nèi)有無炎癥病變。傳統(tǒng)的陰道清潔度是根據(jù)白細胞、上皮細胞、桿菌和球菌數(shù)量來判定陰道清潔度的[1]。但是在實際工作中，這種清潔度的分級方法已不能滿足所有陰道炎的診斷要求[2]。形態(tài)學(xué)與酶學(xué)化學(xué)反應(yīng)聯(lián)合運用將會為循證醫(yī)學(xué)提供可靠依據(jù)。因此，總結(jié)一種比較全面準(zhǔn)確的陰道清潔度評判方法，對陰道炎的診斷具有重要意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 隨機選取2016年5月1日至2017年4月30日在我院進行陰道分泌物檢查的人群共3384例作為研究對象。

1.2 研究方法

1.2.1 試劑 株洲康樂檢測試劑有限公司生產(chǎn)的婦科白帶涂片多功能染色液（BTR染液）、需氧菌陰道炎/細菌性陰道?。ˋV/BV）五項聯(lián)合定性檢測試劑盒（酶化學(xué)反應(yīng)法）

1.2.2 取材 用無菌棉簽取陰道分泌物，立即送檢涂片，待干燥后鏡檢;棉簽放入一次性試管用于酶化學(xué)反應(yīng)。

1.3 方法

1.3.1 BTR染液染色鏡檢：預(yù)先將R1（紅色）染液R2（藍色）染液混合。使用時將1-2滴混合染液滴于干燥的涂片標(biāo)本上，5-15秒倒去多余染液，立即鏡檢（染液干燥會有結(jié)晶析出干擾鏡檢，可重復(fù)滴加染液），結(jié)果不明確的用油鏡確認。

1.3.2 酶化學(xué)檢測：采樣棉簽放入軟試管中，加入400?l稀釋液，反復(fù)擠壓，使樣本溢出。在反應(yīng)裝置的五個孔中每孔滴加1滴稀釋后的樣本，每滴約35?l，之后在“唾液酸苷酶”反應(yīng)孔中滴加1滴顯色液A。，37℃反應(yīng)7分鐘后在“凝固酶”反應(yīng)孔中滴加1滴顯色液B，繼續(xù)反應(yīng)3分鐘后，10分鐘內(nèi)判讀結(jié)果。

2 結(jié)果

研究結(jié)果顯示，Ⅰ0和Ⅱ0的分度方法與傳統(tǒng)分度方法基本一致，白細胞均小于15個/HP，大多存在大量上皮細胞和/或陰道桿菌，球菌少許或無。本研究增加了對線索細胞、加德納菌、纖毛菌、真菌孢子及假菌絲、細胞內(nèi)外腎形雙球菌、滴蟲的鏡下觀察，Ⅰ0和Ⅱ0線索細胞、加德納菌、纖毛菌、真菌孢子及假菌絲、細胞內(nèi)外腎形雙球菌、滴蟲鏡檢結(jié)果均為陰性，其AV/BV五聯(lián)酶法定性檢測結(jié)果除H2O2可出現(xiàn)陰性結(jié)果，白細胞酯酶可出現(xiàn)陽性結(jié)果外，其余項目均為陰性。正常情況下，當(dāng)清潔度判定為Ⅰ0和Ⅱ0時，可診斷陰道微環(huán)境為正常;當(dāng)清潔度判定為Ⅲ0和Ⅳ0時不參考上皮細胞和陰道桿菌的數(shù)量值，這與傳統(tǒng)的判定方法不同。當(dāng)鏡檢發(fā)現(xiàn)白細胞增多、加德納菌、線索細胞、真菌孢子及菌絲、纖毛菌滴蟲時，無論上皮細胞與乳酸桿菌多少，均判定為Ⅲ0或Ⅳ0。我院全年共檢陰道分泌物37484例（復(fù)查除外）。其中，Ⅰ01736（4.6%），Ⅱ013838例（36.9%），Ⅲ014940例（39.8%），Ⅳ06970例（18.6%），BV3384例（9.02%）。3384例BV，鏡檢BV形態(tài)典型，SNa陽性，確認為BV 2954例（87.3%）;鏡檢BV形態(tài)典型，SNa陰性，考慮為SNa失效，最終認定為BV 102例（2%）;鏡檢BV形態(tài)不典型，初始判定為雜菌，SNa陽性，綜合確認為BV 328例（9.2%）。當(dāng)清潔度判定為Ⅲ0或Ⅳ0時，AV/BV五聯(lián)酶法生化檢測結(jié)果至少一項為陽性。清潔度判定為Ⅲ0時提示陰道炎癥，清潔度判定為Ⅳ0時提示陰道嚴重炎癥[3]。

3 討論

鏡檢檢出線索細胞、加德納菌、真菌孢子及菌絲、纖毛菌滴蟲的檢出率與Ⅲ0和Ⅳ0所占受檢人群比例基本一致，與AV/BV五聯(lián)酶法定性檢測結(jié)果陽性率基本一致。AV/BV五聯(lián)酶法定性檢測結(jié)果陽性率略高于鏡檢，這與涂片太薄或感染尚處早期有關(guān)，還可能是沒有對陰道分泌物支原體、衣原體進行檢測造成的。文獻報道，當(dāng)清潔度判定為Ⅲ0和Ⅳ0時，有必要對支原體和衣原體進行篩查，以免漏診由支原體和衣原體導(dǎo)致的陰道炎癥，[5]篩查的納入標(biāo)準(zhǔn)有待確定。

AV/BV五聯(lián)酶法，因其影響因素很多，如用藥后、同房、陰道流血等，所以要與鏡檢相符。如鏡檢有陰道桿菌，H2O2可陰可陽;反之，未檢出陰道桿菌，H2O2 不可能陰性。鏡檢疑似雜菌，SNa陽性，以SNa為準(zhǔn)，可能是加特納菌感染及混合感染早期，或者是涂片太薄。加特納球桿菌為一類細菌，往往多種細菌混合，如球菌、弧菌、變形桿菌等，但以加特納菌為主，本研究即判為加特納菌，雜菌忽視。鏡檢WBC（+++～++++），但LE弱陽（+），可能合并了支原體衣原體的感染所致，（底物耗盡已排除）;鏡檢WBC（+），但LE（++～+++），視為假陽，特別是絕經(jīng)期、產(chǎn)后、幼女等雌激素水平低的女性，與PH升高有關(guān)。Gus和GA陽性，若無雜菌，視為假陽。GA對滴蟲有一定的特異性，特別是對于初學(xué)者，以免漏診。

本研究通過回顧性分析我院一年內(nèi)進行婦科陰道分泌物常規(guī)檢測患者以陰道分泌物鏡下檢測結(jié)果和AV/BV五聯(lián)酶法定性檢測結(jié)果相結(jié)合的陰道清潔度分度法，分析認為陰道分泌物常規(guī)鏡檢結(jié)合AV/BV五聯(lián)酶法能優(yōu)化陰道清潔度的劃分方法，對臨床陰道炎癥的診斷具有重要意義。

參考文獻

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