席丹 張保仁

摘要：為查明許氏平鲉（Sebastesschlegelii）仔、稚魚消化酶活性隨日齡的變化過程，探討消化酶的發(fā)育特性與饑餓的影響，以其初產(chǎn)仔魚為研究對(duì)象，設(shè)置6個(gè)實(shí)驗(yàn)組，分別在1、2、3、4、5d時(shí)開始初次投喂（即C、D1、D2、D3和D4組）和完全不投喂（S組）。結(jié)果顯示，仔魚前期的許氏平鲉消化酶的比活力波動(dòng)較大，進(jìn)入仔魚后期（22d后），消化酶比活力逐漸穩(wěn)定;而總活力在仔、稚魚階段均不高，變化不顯著，進(jìn)入稚魚后期后（26d后）隨日齡顯著升高;存活的各實(shí)驗(yàn)組仔、稚魚消化酶活力在相同日齡時(shí)差異并不顯著，但由于前期的饑餓，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)D2、D3組仔稚魚的全長(zhǎng)、體重和特定生長(zhǎng)率均顯著低于C、D1組。結(jié)果表明，延遲投喂時(shí)間對(duì)許氏平鲉的生長(zhǎng)發(fā)育有顯著影響，而且這種影響在生長(zhǎng)后期很難恢復(fù)。

關(guān)鍵詞：許氏平鲉（Sebastesschlegelii）;延遲投喂;饑餓;消化酶;生長(zhǎng)發(fā)育

中圖法分類號(hào)：S917.4

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

自然環(huán)境中，因食物會(huì)受環(huán)境條件變動(dòng)的劇烈影響，而在空間和時(shí)間上分布極不均勻，很多魚類的野生種群都會(huì)遭受饑餓的脅迫[1]。尤其是在魚類生活史早期階段，饑餓是導(dǎo)致魚類死亡的主要原因之一[2-3]。仔、稚魚期的個(gè)體小而脆弱、發(fā)育不完全，對(duì)饑餓最為敏感[4]。因此，饑餓脅迫對(duì)仔魚生長(zhǎng)存活過程的影響已成為近年來的研究熱點(diǎn)[5-12]。

魚類仔魚階段要經(jīng)歷從內(nèi)源性營(yíng)養(yǎng)向外源性營(yíng)養(yǎng)的轉(zhuǎn)變，而仔魚的初次攝食是其開始外源性營(yíng)養(yǎng)的重要標(biāo)志，對(duì)仔魚后期的存活和生長(zhǎng)發(fā)育也有重要影響[13]。初次攝食期間遭受到饑餓的脅迫可能對(duì)仔、稚魚階段營(yíng)養(yǎng)生理的變化過程有重要影響，而消化酶的發(fā)育變化是其中的重要內(nèi)容之一[12，14-15]。通過研究延遲投喂對(duì)仔、稚魚消化酶的發(fā)育影響可以更好地幫助闡明其不同發(fā)育階段的攝食、消化和吸收機(jī)制，為優(yōu)化海水魚類早期餌料的配方以及制定科學(xué)的投喂策略提供生理學(xué)基礎(chǔ)。

許氏平鲉（Sebastesschlegelii），俗稱黑鲪、黑魚、黑石鱸等，隸屬于硬骨魚綱（Osteichthyes）、鲉形目（Scorpaeniformes）、平鲉科（Sebastidae）、平鲉屬（Sebastes），是一種卵胎生的巖礁性魚類，主要分布于西北太平洋近岸海域，是我國(guó)黃渤海區(qū)常見的底層經(jīng)濟(jì)魚類之一[16]。近年來，隨著過度捕撈與環(huán)境惡化，許氏平鲉的自然資源量不斷下降，使其成為增殖放流與人工培育的重要魚種[17-18]。據(jù)統(tǒng)計(jì)，近年來僅山東省煙臺(tái)市沿海區(qū)域每年放流數(shù)量就超過150萬尾[19-20]。僅2015年，我國(guó)就在渤海、黃海沿岸計(jì)劃放流3000萬尾的許氏平鲉幼魚，用以提高其生物資源量和漁民收入（數(shù)據(jù)來源于中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部《全國(guó)水生生物增殖放流總體規(guī)劃（2011-2015）》）。

目前國(guó)內(nèi)外針對(duì)許氏平鲉的研究主要包括生理生態(tài)學(xué)、組織學(xué)、形態(tài)學(xué)、行為學(xué)以及生物化學(xué)等方面[21-27]。然而，關(guān)于延遲投喂對(duì)許氏平鲉仔、稚魚消化酶發(fā)育變化的影響卻未見報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)不同日齡的許氏平鲉仔魚進(jìn)行初次投喂，觀察其消化酶活性隨日齡的變化過程，探討消化酶的發(fā)育特性與饑餓的影響，以期為其苗種培育過程中餌料配方的優(yōu)化與投喂策略的改進(jìn)提供理論幫助。

1材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)魚

實(shí)驗(yàn)于2018年5月～7月在恒海生物科技有限公司進(jìn)行，以許氏平鲉初產(chǎn)仔魚為實(shí)驗(yàn)對(duì)象。仔魚產(chǎn)出后在車間育苗池（5m×5m×0.6m）中用地下鹵水與淡水配制的海水進(jìn)行流水培育。實(shí)驗(yàn)期間日常監(jiān)測(cè)養(yǎng)殖條件，其中水溫15.3～19.8℃，鹽度26‰～31‰，pH7.7～8.3，溶解氧5.0mg/L以上，日換水量約50%，光照強(qiáng)度為400～600lx。對(duì)于正常投喂的實(shí)驗(yàn)組：1～7d（日齡）仔魚投喂輪蟲幼體，7～10d投喂輪蟲幼體與鹵蟲無節(jié)幼體，10～15d仔魚投喂鹵蟲無節(jié)幼體，15～25d投喂鹵蟲無節(jié)幼體與人工顆粒飼料（魚寶、彩優(yōu)等品牌），25d后僅投喂人工顆粒飼料，每日投喂3～5次。其它實(shí)驗(yàn)組按處理要求進(jìn)行投喂。

1.2分組與取樣

本實(shí)驗(yàn)分為6個(gè)組別，即正常投喂組（對(duì)照組，C組），延遲1d、2d、3d、4d投喂組（D1組、D2組、D3組、D4組）和完全饑餓組（S組）。每組取約5000尾初產(chǎn)仔魚，放入實(shí)驗(yàn)水槽中（40cm×50cm×60cm，海水約120L，仔魚密度為41.67ind/L），養(yǎng)殖49d。每個(gè)組別設(shè)置5個(gè)平行，其中3個(gè)平行用于觀察仔魚存活率的變化，2個(gè)平行用于取樣。

針對(duì)不同日齡的仔魚，取樣間隔有所差別：1～10d的仔魚，每日取樣;12d后的個(gè)體，每3～5日取樣，樣品用紗布吸干水分后冷凍保存，每組每次用3個(gè)2.0mL的凍存管存放于液氮罐中保存，帶回實(shí)驗(yàn)室后測(cè)量全長(zhǎng)（TL）、體重（BW）與脂肪酶、淀粉酶和胰蛋白酶活性。整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間，仔魚個(gè)體較小，無法單獨(dú)取其消化道進(jìn)行酶活指標(biāo)測(cè)量，因此將多尾仔魚一起稱量后整體進(jìn)行勻漿測(cè)量。

1.3數(shù)據(jù)測(cè)量、統(tǒng)計(jì)與分析

1.3.1生長(zhǎng)存活指標(biāo)樣品解凍后根據(jù)仔魚大小分別用拍照解剖鏡（NikonSMZ800）和游標(biāo)卡尺（精度0.1mm）測(cè)量全長(zhǎng)。用精密天平（精度0.0001g）測(cè)量仔魚體重。此外，統(tǒng)計(jì)存活率（SR）和特定生長(zhǎng)率（SGR）的變化。SGR的計(jì)算方法：

式中：Lt分別是試驗(yàn)開始時(shí)和試驗(yàn)結(jié)束時(shí)實(shí)驗(yàn)魚的全長(zhǎng)，t是試驗(yàn)天數(shù)。

1.3.2消化酶活性指標(biāo)各實(shí)驗(yàn)組的樣品在稱量后放入5mL的離心管。根據(jù)樣品重量，按1∶9加入生理鹽水，用勻漿機(jī)進(jìn)行組織勻漿。隨后在4℃，10000r/min的條件下離心20min，取上清液（酶液）放入4℃冰箱內(nèi)冷藏，24h內(nèi)完成3種消化酶（脂肪酶、淀粉酶和胰蛋白酶）活性的測(cè)量。測(cè)量時(shí)各實(shí)驗(yàn)組的樣品設(shè)置3個(gè)平行，具體測(cè)量方法如下。

脂肪酶活力的測(cè)定：利用脂肪酶測(cè)定試劑盒（購買于南京建成生物工程研究所）進(jìn)行測(cè)定，具體操作參照試劑盒說明書。脂肪酶（比）活力的定義為：37℃下，1g組織蛋白中的脂肪酶與底物反應(yīng)1min，每消耗1μmol底物為一個(gè)酶活力單位。

淀粉酶活力的測(cè)定：利用淀粉酶測(cè)定試劑盒（購買于南京建成生物工程研究所）進(jìn)行測(cè)定，具體操作參照試劑盒說明書。淀粉酶（比）活力的定義為：37℃下，1mg組織蛋白中的淀粉酶與底物反應(yīng)30min，水解10mg淀粉為一個(gè)酶活力單位。

胰蛋白酶活力的測(cè)定：利用胰蛋白酶測(cè)定試劑盒（購買于南京建成生物工程研究所）進(jìn)行測(cè)定，具體操作參照試劑盒說明書。胰蛋白酶（比）活力的定義為：在pH8.0，37℃下，1mg組織蛋白中的胰蛋白酶1min分解酪蛋白生成1μg酪氨酸為一個(gè)酶活力單位。

1.3.3數(shù)據(jù)分析實(shí)驗(yàn)測(cè)量數(shù)據(jù)用MicrosoftExcel2019和IBMStatisticSPSS22.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。其中，各組均值的比較采用單因素方差分析（ANOVA），P<0.05表示差異顯著。

2結(jié)果與分析

2.1生長(zhǎng)存活指標(biāo)

2.1.1存活率的變化經(jīng)過49d的養(yǎng)殖，C組和D1組的許氏平鲉平均存活率無顯著差異（P>0.05），分別是30.6%±2.3%和28.5%±1.7%;D2組與D3組的仔、稚魚存活率顯著低于前兩組（P<0.05），分別為19.2%±2.0%和8.8%±1.1%;D4組與S組仔魚在7d時(shí)全部死亡，見圖1。

2.1.2全長(zhǎng)與特定生長(zhǎng)率的變化7d時(shí)，C組的仔魚全長(zhǎng)TL=6.25mm±0.16mm，前7d的SGR=2.16%±0.20%，這兩個(gè)指標(biāo)與D1組的仔魚無顯著差異（P>0.05）;D2組（TL=6.03mm±0.11mm，SGR=1.78%±0.19%）與D3組（TL=5.71mm±0.12mm，SGR=1.36%±0.18%）仔魚的全長(zhǎng)和SGR都顯著低于前兩組（P<0.05）;D4組（TL=5.19mm±0.13mm，SGR=-1.58%±0.13%）與S組（TL=5.14mm±0.15mm，SGR=-1.77%±0.13%）仔魚均出現(xiàn)了顯著的負(fù)生長(zhǎng)現(xiàn)象，并在7d時(shí)全部死亡。49d時(shí)，C組（TL=30.67mm±2.15mm，SGR=3.55%±0.22%）與D1組（TL=29.17mm±1.97mm，SGR=3.52%±0.24%）的全長(zhǎng)和SGR無顯著差異（P>0.05）;D2組（TL=26.78mm±1.87mm，SGR=3.21%±0.16%）與D3組（TL=25.67mm±1.75mm，SGR=2.91%±0.19%）的全長(zhǎng)與SGR均顯著低于前兩組，二者之間也有顯著差異（P<0.05）。具體見圖2。

2.2消化酶活力指標(biāo)

許氏平鲉仔魚和稚魚早期階段3種消化酶的總活力均較低，而開始進(jìn)入稚魚期后，消化酶的總活力顯著升高。而消化酶的比活力在仔魚階段，尤其是前7d波動(dòng)較大，7d后比活力變化不顯著。具體結(jié)果如下。2.2.1淀粉酶的變化C組的初產(chǎn)仔魚（1d）的淀粉酶比活力為0.125±0.010U/mgprot，隨后顯著波動(dòng)，22d后相對(duì)穩(wěn)定;總活力在31d前均處于較低狀態(tài)，無顯著差異（P>0.05），而31d后顯著升高，49d時(shí)約為33.87U/尾。D1組、D2組、D3組仔、稚魚淀粉酶比活力與總活力的變化趨勢(shì)與之相似。D4組和S組仔魚的淀粉酶活力變化趨勢(shì)一致，比活力和總活力剛開始隨日齡顯著升高（P<0.05），分別在2d和3d時(shí)達(dá)到最高值，隨后顯著下降（P<0.05），并且在7d時(shí)仔魚完全死亡。具體趨勢(shì)見圖3。

2.2.2脂肪酶的變化C組的初產(chǎn)仔魚（1d）的脂肪酶比活力為0.207U±0.030U/mgprot，隨后逐漸下降至穩(wěn)定狀態(tài)，26d后逐漸升高;總活力在31d前均處于較低狀態(tài)，幾乎檢測(cè)不到，而31d后顯著升高（P<0.05），49d時(shí)約為25.64U/尾。D1組、D2組、D3組仔、稚魚脂肪酶比活力與總活力的變化趨勢(shì)與之相似。D4組和S組仔魚的脂肪酶活力變化趨勢(shì)一致，比活力和總活力在產(chǎn)出后隨日齡逐漸下降，7d死亡時(shí)酶活力已檢測(cè)不到。具體趨勢(shì)見圖4。

2.2.3胰蛋白酶的變化C組的初產(chǎn)仔魚（1d）的胰蛋白酶比活力非常低，為0.022U±0.003U/mgprot，隨后逐漸升高，8d后酶活力變得相對(duì)穩(wěn)定，約為0.150U/mgprot左右;總活力在31d前均處于較低狀態(tài)，無顯著差異（P>0.05），而31d后顯著升高，49d時(shí)約為33.88U/尾。D1組、D2組、D3組仔、稚魚胰蛋白酶比活力與總活力的變化趨勢(shì)與之相似。D4組和S組仔魚的淀粉酶活力變化趨勢(shì)一致，比活力和總活力剛開始隨日齡顯著升高，在3d時(shí)達(dá)到最高值，隨后顯著下降（P<0.05），并且在7d時(shí)仔魚完全死亡。具體趨勢(shì)見圖5。

3討論與結(jié)論

魚類受精卵孵化出膜后即進(jìn)入仔魚期，此時(shí)仔魚的口和肛門并沒有與外界連通，消化器官的發(fā)育也并不完全，不能建立外源性營(yíng)養(yǎng)，仍依靠卵黃囊提供生長(zhǎng)發(fā)育所需的能量[9]。魚類從開口到完全建立外源性營(yíng)養(yǎng)的過渡期（從初次開口攝食到卵黃囊消失）是仔魚可能大量死亡的臨界期[8，24，28]。有研究表明，正常投喂的許氏平鲉仔魚臨界期內(nèi)死亡率可達(dá)到30%，若該時(shí)間內(nèi)發(fā)生饑餓，死亡率會(huì)顯著增加[27]。而本研究中，也出現(xiàn)了類似的結(jié)果，延遲投喂的D2組仔稚魚的存活率要顯著低于對(duì)照組與D1組（圖1）。

一般情況下，仔魚還未開口時(shí)體內(nèi)消化酶就已存在，但活性較低，開口攝食后其活性會(huì)顯著提高[29-31]，例如，鮸（Miichthysmiiuy）[12]與河鱸（Percafluviatilis）[32]的初孵仔魚體內(nèi)胰蛋白酶和淀粉酶就已能檢測(cè)到，而開口攝食前這2種酶的活性顯著增強(qiáng);六絲多指馬鲅（Polydactylussexfilis）雖然在初孵時(shí)不能檢測(cè)到淀粉酶活性，但在開口攝食前也能檢測(cè)到[33]。因此，在開口攝食之前，仔魚已經(jīng)從生理上作好了接受外源食物的準(zhǔn)備[12]。本研究中，許氏平鲉仔魚在產(chǎn)出后即可檢測(cè)到胰蛋白酶和淀粉酶的活性，而且在開口攝食時(shí)比產(chǎn)出時(shí)酶活性顯著提高，甚至在沒有食物刺激的條件下，其活性也顯著增加（見D4與S組）。類似的結(jié)果在黃鰤?mèng)~（Seriolalalandi）[31]、河鱸（P.fluviatilis）[32]、大黃魚（Pseudosciaenacrocea）[34]和鳊魚（Parabramispeknensis）[35]中也有發(fā)現(xiàn)。此外，有研究表明條紋狼鱸（Moronesaxatilis）在開口攝食前消化酶的濃度足以消化外源配合餌料，而不受外源餌料的調(diào)控，這為其人工苗種培育提供了重要的生理基礎(chǔ)[36]。由此可見，初孵仔魚消化酶的活性變化與魚類從內(nèi)源營(yíng)養(yǎng)向外源營(yíng)養(yǎng)的轉(zhuǎn)換過程是同步進(jìn)行的，而消化酶發(fā)育的完善程度可能與魚類安全度過這個(gè)關(guān)鍵期有重要關(guān)系[12]。

許氏平鲉屬于卵胎生的魚類，從親體產(chǎn)出后即為仔魚，在1～2d時(shí)口和肛門已與外界相通，可以開口攝食，3～4d時(shí)卵黃囊和油球消失[16，24]。本研究中發(fā)現(xiàn)，許氏平鲉仔魚的脂肪酶活性從產(chǎn)出后逐漸降低，在3～4d時(shí)達(dá)到最低值，推測(cè)可能與卵黃囊與油球的吸收過程有關(guān)（圖3）。這在鮸（M.miiuy）[12]和狹鱈（Theragrachalcogramma）的研究中也有相似的結(jié)果[37]。進(jìn)入稚魚期后（約26d），許氏平鲉的脂肪酶活性有逐漸升高的趨勢(shì)，這可能與投喂的餌料從鹵蟲無節(jié)幼體轉(zhuǎn)換為人工顆粒飼料的變化有關(guān)。進(jìn)入稚魚后期（約26d），許氏平鲉脂肪酶的比活力與總活力均顯著升高，推測(cè)可能與其消化系統(tǒng)發(fā)育較為完善相關(guān)。

前7d的許氏平鲉仔魚淀粉酶的比活力變化較大，而且無論是否完成初次攝食，在口和肛門均與外界相通時(shí)（2～3d）活力處于最高值，推測(cè)這是仔魚在為攝入外源營(yíng)養(yǎng)做生理準(zhǔn)備（圖2）。而這個(gè)高峰之后其活力都會(huì)顯著降低，則可能與仔魚攝入的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)為輪蟲幼體有關(guān)（其碳水化合物含量較少），這在很多魚類中都有報(bào)道[12，38]。仔魚期淀粉酶比活力波動(dòng)較大，可能與鹵蟲幼體和顆粒飼料的混合投喂有關(guān)（圖2中4～22d）。進(jìn)入稚魚期后（26d），淀粉酶的比活力較為穩(wěn)定，總活力呈顯著上升的趨勢(shì)，這可能與完全投喂顆粒飼料有關(guān)。許氏平鲉仔魚期的淀粉酶比活力較高，表明在飼料中添加一定量的碳水化合物可以改善由內(nèi)源蛋白向外源蛋白轉(zhuǎn)變時(shí)能量的匱乏。因此，在仔魚期適當(dāng)添加植物性餌料可以改善許氏平鲉的營(yíng)養(yǎng)狀況，也有利于降低仔魚死亡率、提高生長(zhǎng)速度。

許氏平鲉仔魚的胰蛋白酶在產(chǎn)出后即可檢測(cè)到，這可能與卵胎生的方式有關(guān)。仔魚在親體內(nèi)器官系統(tǒng)發(fā)育已相對(duì)完善[16，24，26-27]，并且也為外源蛋白的攝入做生理準(zhǔn)備。隨著日齡增長(zhǎng)，比活力顯著升高，8d之后胰蛋白酶比活力呈穩(wěn)定趨勢(shì)，可能與消化系統(tǒng)已發(fā)育較為完善有關(guān)，這在鮸（M.miiuy）[12]和狼鱸（Dicentrarchuslabrax）[39]中也有發(fā)現(xiàn)。此外，還有一些魚類的胰蛋白酶比活力在仔魚期過后變化不顯著，還可能與胃的發(fā)育有關(guān)，胃蛋白酶的發(fā)育取代了部分胰蛋白酶的功能，導(dǎo)致胰蛋白酶活力在仔魚期就不再升高，比如黃鰤?mèng)~（Seriolalalandi）[31]、大黃魚（P.crocea）[34]和美洲蝶（Pleuronectesamericanus）[40]。胰蛋白酶總活力與脂肪酶、淀粉酶的變化趨勢(shì)相似。進(jìn)入稚魚期后，整個(gè)消化系統(tǒng)已經(jīng)相對(duì)完善，消化酶活力均有顯著升高。

魚類孵化后的初次攝食，對(duì)仔魚生長(zhǎng)和消化酶發(fā)育均有顯著影響[12]。一般情況下，魚類在開口攝食時(shí)消化系統(tǒng)的發(fā)育并不完善，初次攝入的生物餌料包含的部分外源消化酶直接進(jìn)入腸道幫助仔魚消化，同時(shí)轉(zhuǎn)化為自身蛋白質(zhì)后，合成各種酶，促進(jìn)消化酶的發(fā)育，這也是仔魚在開口攝食后消化酶活性顯著升高的重要原因[10，15]。本研究中，D4組和S組的仔魚由于沒有能量的攝入導(dǎo)致消耗自身而出現(xiàn)了負(fù)生長(zhǎng)現(xiàn)象，而且可能也超過了消化酶發(fā)育的關(guān)鍵時(shí)期，即使再投喂（D4組）也無法攝入或消化。這個(gè)酶發(fā)育的關(guān)鍵時(shí)期可能與仔魚的不可逆點(diǎn)（PNR，即在這個(gè)點(diǎn)之前，如果仔魚不能完成初次攝食，后期再投喂也無法完成攝食消化，也稱之為“生態(tài)死亡”）有重要關(guān)系[9]。同時(shí)，其它延遲投喂組（D2和D3組）仔魚的消化酶發(fā)育出現(xiàn)了一定的滯后現(xiàn)象（圖3、圖4和圖5），而這不僅會(huì)導(dǎo)致仔魚初期的消化能力弱、生長(zhǎng)緩慢，還會(huì)進(jìn)一步影響后續(xù)的生長(zhǎng)和發(fā)育，即使后期正常投喂到49d，SGR仍顯著低于C組和D1組（圖2）。此外，有研究表明，餌料生物和配合飼料的組成可以調(diào)節(jié)魚類消化酶的活性[34，39]。本研究中，仔魚開口攝食時(shí)主要消化酶的活性迅速增加，表明許氏平鲉仔魚在攝食初期已經(jīng)具有消化蛋白質(zhì)、脂肪和碳水化合物的能力;3～22d由于生物餌料的轉(zhuǎn)變，消化酶的活性處于不斷的變化的波動(dòng)狀態(tài)，這種變化可能是與消化器官的不斷發(fā)育有關(guān)，22d到實(shí)驗(yàn)結(jié)束許氏平鲉的消化酶活性處于相對(duì)穩(wěn)定的狀態(tài)，這表明了消化系統(tǒng)發(fā)育的成熟。

綜上所述，許氏平鲉仔魚開口攝食前（2～3d），消化酶的活性已經(jīng)處于較高狀態(tài)，為進(jìn)入外源性營(yíng)養(yǎng)期作好了營(yíng)養(yǎng)生理準(zhǔn)備。如果投喂不及時(shí)（3d以后），消化酶活力會(huì)顯著下降，最終影響仔魚的生長(zhǎng)、存活和消化酶的發(fā)育，而且這種影響在后期正常投喂很長(zhǎng)一段時(shí)間也無法消除。前7d是消化酶快速發(fā)育并有所波動(dòng)的關(guān)鍵時(shí)期，建議一定要及時(shí)并多次投喂，提高許氏平鲉早期苗種培育的存活率。

參考文獻(xiàn)：

[1]柳敏海，施兆鴻，陳波，等.饑餓對(duì)點(diǎn)帶石斑魚餌料轉(zhuǎn)換期仔魚生長(zhǎng)和發(fā)育的影響[J].海洋漁業(yè)，2006，28（4）：292-298.

[2]殷名稱.魚類早期生活史階段的自然死亡[J].水生生物學(xué)報(bào)，1996（4）：363-372.

[3]鮑寶龍，蘇錦祥.海洋饑餓仔魚營(yíng)養(yǎng)狀況的研究[J].上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報(bào)，1998，7（1）：51-58.

[4]BENJAMINGH，RICEJA，CROWDERLB.Size-dependenteffectscontinuousandintermittentfeedingonstarvationandmasslossinstaringyellowperchlarvaeandjuveniles[J].TaransAmFishSoci，1996，125：14-26.

[5]MCGURKMD.EffectsofdelayedfeedingandtemperatureontheageofirreversiblestarvationandontheratesofgrowthandmortalityofPacificherringlarvae[J].MarineBiology，1984，84（1）：13-26.

[6]YINMC，BLAXTERJHS.Morphologicalchangesduringgrowthandstarvationoflarvalcod（GadusmorhuaL.）andflounder（PlatichthysflesusL.）[J].JournalofExperimentalMarineBiologyandEcology，1986，104（1-3）：215-228.

[7]殷名稱.北海鯡卵黃囊期仔魚的攝食能力和生長(zhǎng)[J].海洋與湖沼，1991，22（6）：554-560.

[8]殷名稱.魚類早期生活史研究與其進(jìn)展[J].水產(chǎn)學(xué)報(bào)，1991，15（4）：348-358.

[9]殷名稱.魚類仔魚期的攝食和生長(zhǎng)[J].水產(chǎn)學(xué)報(bào)，1995，19（4）：335-342.

[10]GISBERTE，CONKLINDB，PIEDRAHITARH.EffectsofdelayedfirstfeedingonthenutritionalconditionandmortalityofCaliforniahalibutlarvae[J].JournalofFishBiology，2004，64（1）：116-132.

[11]YOSEDAK，DANS，SUGAYAT，etal.EffectsoftemperatureanddelayedinitialfeedingonthegrowthofMalabargrouper（Epinephelusmalabaricus）larvae[J].Aquaculture，2006，256（1）：192-200.

[12]單秀娟.鮸（Miichthysmiiuy）早期生長(zhǎng)存活過程和消化生理機(jī)制的研究[D].中國(guó)科學(xué)院研究生院（海洋研究所），2008.

[13]GISBERTE，WILLIOTP.LarvalbehaviourandeffectofthetimingofinitialfeedingongrowthandsurvivalofSiberiansturgeon（Acipenserbaeri）larvaeundersmallscalehatcheryproduction[J].Aquaculture，1997，156（1-2）：63-76.

[14]YúFERAM，PASCUALE，PoloA，etal.Effectofstarvationonthefeedingabilityofgiltheadseabream（SpamsaurataL.）larvaeatfirstfeeding[J].JournalofExperimentalMarineBiologyandEcology，1993，169（2）：259-272.

[15]KOLKOVSKIS，TANDLERA，KISSILGW，etal.Theeffectofdietaryexogenousdigestiveenzymesoningestion，assimilation，growthandsurvivalofgiltheadseabream（Sparusaurata，Sparidae，Linnaeus）larvae[J].FishPhysiology&Biochemistry，1993，12（3）：203-209.

[16]陳大剛，葉振江，段鈺，等.許氏平鲉繁殖群體的生物學(xué)及其苗種培育的初步研究[J].海洋學(xué)報(bào)，1994，16（3）：94-101.

[17]LH，ZHANGX，XID，etal.UseofcalceinandalizarinredSforimmersionmarkingofblackrockfishSebastesschlegeliijuveniles[J].ChineseJournalofOceanologyandLimnology，2014，32：88-98.

[18]LH，ZHANGX，F(xiàn)UM，etal.UseoftetracyclinehydrochlorideandalizarincomplexoneforimmersionmarkingblackrockfishSebastesschlegelii[J].ChineseJournalofOceanologyandLimnology，2014，32：810-820.

[19]席丹，張秀梅，呂紅健，等.許氏平鲉早期異速生長(zhǎng)模式的研究[J].中國(guó)海洋大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2014（12）：28-34.

[20]陳穎.山東省漁業(yè)資源增殖放流現(xiàn)狀及前景分析[D].煙臺(tái)：煙臺(tái)大學(xué)，2017.

[21]BAISC，LEEKJ.DifferentlevelsofdietaryDL-α-tocopherylacetateaffectthevitaminEstatusofjuvenileKoreanrockfishSebastesschlegeli[J].Aquaculture，1998，161：405-414.

[22]LEESM，KIMJD.DietaryoptimumphosphoruslevelofjuvenileKoreanrockfish（Sebastesschlegeli）[J].FisheriesandAquaticSciences，1998，1（2）：180-186.

[23]LIMSR，CHOISM，WANGXJ，etal.EffectsofdehulledsoybeanmealasafishmealreplacerindietsforfingerlingandgrowingKoreanrockfishSebastesschlegeli[J].Aquaculture，2004，231（1）：457-468.

[24]劉立明，姜海濱，王茂劍，等.黑鲪仔、稚、幼魚生長(zhǎng)、發(fā)育與成活率變化的研究[J].中國(guó)海洋大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2013，43（03）：25-31.

[25]郭浩宇，張秀梅，高天翔.人工隱蔽物及投喂頻率對(duì)許氏平鲉幼魚生長(zhǎng)和行為的影響[J].中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)，2015，22（2）：319-331.

[26]XID，ZHANGX，LH，etal.Predictionofcannibalisminjuvenileblackrockfish，Sebastesschlegelii（Hilgendorf，1880），basedonmorphometriccharacteristicsandpairedtrials[J].Aquacultureresearch，2017，48（6）：3198-3206.

[27]XID，ZHANGX，LH，etal.Cannibalisminjuvenileblackrockfish，Sebastesschlegelii（Hilgendorf，1880），rearedundercontrolledconditions[J].Aquaculture，2017，479：682-689.

[28]KENDALLJRAW.Earlylifehistorystagesoffishesandtheircharacters[J].Ontogenyandsystematicsoffishes，1984，24：11-22.

[29]ALVAREZ-GONZLEZCA，CERVANTES-TRUJANOM，TOVAR-RAMREZD，etal.DevelopmentofdigestiveenzymesinCaliforniahalibutParalichthyscalifornicuslarvae[J].FishPhysiologyandBiochemistry，2005，31（1）：83-93.

[30]COMABELLAY，MENDOZAR，AGUILERAC，etal.DigestiveenzymeactivityduringearlylarvaldevelopmentoftheCubangarAtractosteustristoechus[J].FishPhysiologyandBiochemistry，2006，32（2）：147.

[31]CHENBN，QINJG，KUMARMS，etal.OntogeneticdevelopmentofdigestiveenzymesinyellowtailkingfishSeriolalalandilarvae[J].Aquaculture，2006，260（1-4）：264-271.

[32]CUVIER-PRESA，KESTEMONTP.DevelopmentofsomedigestiveenzymesinEurasianperchlarvaePercafluviatilis[J].FishPhysiologyandBiochemistry，2001，24（4）：279-285.

[33]KIMBG，DIVAKARANS，BROWNCL，etal.Comparativedigestiveenzymeontogenyintwomarinelarvalfishes：Pacificthreadfin（Polydactylussexfilis）andbluefintrevally（Caranxmelampygus）[J].FishPhysiologyandBiochemistry，2001，24（3）：225-241.

[34]MAH，CAHUC，ZAMBONINOJ，etal.Activitiesofselecteddigestiveenzymesduringlarvaldevelopmentoflargeyellowcroaker（Pseudosciaenacrocea）[J].Aquaculture，2005，245（1-4）：239-248.

[35]CARAJB，MOYANOFJ，S.CRDENAS，etal.Assessmentofdigestiveenzymeactivitiesduringlarvaldevelopmentofwhitebream[J].JournalofFishBiology，2003，63（1）：48-58.

[36]BARAGIV，LOVELLRT.Digestiveenzymeactivitiesinstripedbassfromfirstfeedingthroughlarvadevelopment[J].TransactionsoftheAmericanFisheriesSociety，1986，115（3）：478-484.

[37]OOZEKIY，BAILEYKM.Ontogeneticdevelopmentofdigestiveenzymeactivitiesinlarvalwalleyepollock，Theragrachalcogramma[J].MarineBiology，1995，122（2）：177-186.

[38]COUSINJCB，LAURENCINFB.Histologicalalterationsobservedinturbot，ScophthalmusmaximusL.fromdays15to40afterhatching[J].Aquaculture，1987，67（1）：218-220.

[39]ZAMBONINOINFANTEJL，CAHUCL.Ontogenyofthegastrointestinaltractofmarinefishlarvae[J].ComparativeBiochemistry&PhysiologyPartC，2001，130（4）：477-487.

[40]DOUGLASSE，GAWLICKAA，MANDLAS，etal.Ontogenyofthestomachinwinterflounder：characterizationandexpressionofthepepsinogenandprotonpumpgenesanddeterminationofpepsinactivity[J].JournalofFishBiology，1999，55（5）：897-915.

Abstract：Toinvestigatethecharacteristicchangesofdigestiveenzymeswithdevelopmentandearlystarvationinblackrockfish（Sebastesschlegelii），thenew-bornlarvaeweredividedinto6groups，i.e.C，D1，D2，D3，D4andS，whichrepresentedthatthelarvaewerefirstfedon1d，2d，3d，4d，5dandnotfedatall，respectively.Wemeasuredtheactivitiesofamylase，lipaseandtrypsinoflarvaeineachgroupwithgrowth.Theresultsshowedthatthespecificactivitiesofdigestiveenzymesfluctuatedduringpre-larvalstageandbecomesteadyafter22d.Thetotalactivitiesofdigestiveenzymeswereatalowandstablelevelduringlarvalandjuvenilestagesandincreasedsignificantlyafter26d.Theactivitiesoftheseenzymeswerenotdifferentsignificantlybetweenthesurvivedgroupsatthesamedayage.However，thetotallength，bodyweightandSGRofblackrockfishinD2andD3groupsweresignificantlylowerthanthoseinCandD1groups，whichindicatedthedelayedfirstfeedingaffectedthegrowthanddevelopmentofblackrockfishsignificantly，andtheinfluencescouldhardlybeeliminatedafteralongtime.Accordingtotheseresults，wesuggestthatthenew-bornlarvaeofblackrockfishbefirstfedin1～2d，whichwouldbehelpfultomitigatestarvation，promoteregularlydevelopmentandlowerlarvaldeathrate.

Keywords：Sebastesschlegelii;delayedfeeding;starvation;digestiveenzyme;growthanddevelopment

（收稿日期：2019-07-09;修回日期：2019-07-30）