張春寶
(山東省威海市環(huán)翠區(qū)畜牧業(yè)發(fā)展中心 264200)
試驗動物來自威海市某種禽有限公司的羅斯308 父母代肉種雞。
乳酸菌制劑(干酪乳桿菌、植物乳桿菌,總菌數(shù)≥5.0×109 CFU/g,購自青島某生物科技有限公司)、發(fā)酵料(乳酸桿菌、枯草芽孢桿菌、酵母菌,總菌數(shù)≥2.0×109CFU/g,購自濰坊某公司)。
本試驗采用單因子隨機試驗設計,體況良好,產(chǎn)蛋均勻的220 日齡羅斯308 肉種雞180 只(要求各組雞平均體重差異不顯著(>0.05))。隨機分為3 組,每組6 個重復,每個重復10只雞。即對照組、試驗1 組和試驗2 組。乳酸菌制劑和發(fā)酵料均采用拌料的方式進行飼喂,具體詳見表1。
表1 試驗設計
試驗以玉米和豆粕為主要原料,按照羅斯308 肉種雞所需營養(yǎng)標準配制基礎日糧,各組試驗日糧均以粉料的形式飼喂。
整個試驗期保持原有飼養(yǎng)管理,免疫按試驗場自定免疫程序進行、搞好環(huán)境衛(wèi)生,其他按《肉種雞飼養(yǎng)營養(yǎng)標準》 和《肉種雞飼養(yǎng)管理手冊》 進行。
試驗雞采用單籠飼養(yǎng),試驗期間,專人負責飼養(yǎng),每天光照恒定16h,自然通風,自由采食、飲水,保持籠舍清潔衛(wèi)生。預試期7d,試驗期42d,試驗在威海市某種禽有限公司進行。
飼養(yǎng)期間觀察雞的精神狀況、生長情況、糞便情況以及大腸桿菌數(shù)量和乳酸菌數(shù)量變化情況。
在試驗期的7、20 和40d 從每個重復隨機選取1 只雞(不停飼),稱重后放血處死,無菌操作臺上剖開腹腔,無菌采集空腸、回腸和盲腸內(nèi)容物1g 樣品加入裝有9ml 無菌生理鹽水的試管中,在振蕩器上震蕩混勻做成1:10 的混懸液(即10-1),然后用0.9%的生理鹽水依次稀釋至10-2、10-3……10-9、10-10,選用伊紅-美蘭鑒別培養(yǎng)基和莫匹羅星鋰鹽改良MRS 培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌和乳酸桿菌,吸取3 個臨近稀釋濃度的稀釋液0.1ml 進行微生物計數(shù),以此來檢測大腸桿菌和乳酸桿菌的數(shù)量變化情況[1-3]。
乳酸菌對肉種雞腸道菌群的影響見表2。從表2 可以看出,在空腸中,第7 天試驗1 組中乳酸桿菌的數(shù)量比對照組和試驗2 組略多,差異顯著(<0.05),對照組和試驗2 組相比差異不顯著(>0.05);與對照組相比,試驗1、2 組均能降低大腸桿菌的數(shù)量,差異不顯著(>0.05)。20d 在空腸中試驗1 組比對照組和試驗2 組乳酸桿菌的數(shù)量多,但差異不顯著(>0.05);試驗1、2 組均能降低大腸桿菌數(shù)量,相比差異不顯著(>0.05)。40d 空腸中,與對照組相比,試驗1 組的乳酸桿菌數(shù)量差異顯著(<0.05),試驗2 組的數(shù)量下降,但差異不顯著(>0.05);試驗1、2 組均能抑制大腸桿菌的數(shù)量,減少大腸桿菌數(shù)量作用較對照組差異極明顯(P<0.01)。
在回腸中,第7 天與對照組相比,試驗1、2 組中乳酸桿菌數(shù)相互差異不顯著(>0.05);試驗1 組中大腸桿菌數(shù)量差異不顯著(>0.05),試驗2 組差異顯著(<0.05)。第20 和40 天時,與對照組相比,試驗1 組能顯著提高肉種雞回腸乳酸桿菌數(shù)量,差異顯著(<0.05),試驗2 組差異不顯著(>0.05)。在20 和40d 時與對照組相比,試驗1、2 組均能顯著(<0.05) 和極顯著(<0.01) 的減少大腸桿菌數(shù)量。
表2 乳酸菌對腸道中乳酸桿菌和大腸桿菌數(shù)量的影響(LgN cfu/g)
在盲腸中,第7 天和對照組相比,試驗1、2 組中乳酸桿菌和大腸桿菌數(shù)量相互差異不顯著(>0.05)。第20 天與對照組相比,試驗1、2 組中乳酸桿菌數(shù)量差異不顯著(>0.05),降低大腸桿菌的數(shù)量上差異顯著(<0.05)。第40 天和對照組相比,試驗1 組中能顯著提高乳酸桿菌的數(shù)量(<0.05),試驗2 組中對乳酸桿菌數(shù)量的提高呈負相關。試驗1、2 組均能顯著(<0.05)減少大腸桿菌數(shù)量。
由以上結果表明,乳酸菌制劑能很好地在腸道內(nèi)定植,抑制大腸桿菌等致病菌的生長繁殖,具有一定的代替抗生素添加劑的作用。另外,乳酸菌制劑和發(fā)酵料均能提高肉種雞腸道中乳酸桿菌的數(shù)量,并且從腸道前段到腸道后段(即空腸-回腸-盲腸) 有遞增趨勢;在20 和40d 對腸道菌群的調(diào)節(jié)作用明顯優(yōu)于第7 天。乳酸菌制劑在腸道內(nèi)定植抑制有害菌生長效果比發(fā)酵料效果明顯。由此得出,乳酸菌制劑可以很好地促進有益菌生長繁殖,抑制大腸桿菌等有害菌生長。