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      湯姆青霉PT95和Q1菌株產(chǎn)酶活力及抗菌活性研究

      2019-11-05 09:15:20趙文婧喬宏萍
      天然產(chǎn)物研究與開發(fā) 2019年10期
      關(guān)鍵詞:脂肪酶青霉湯姆

      趙文婧,喬宏萍

      太原師范學(xué)院生物系,晉中 030619

      青霉(Penicillium)是自然界中極為常見的的一種菌屬,通過分解有機(jī)物來生長(zhǎng),是一類雜食性真菌。它與人類生活息息相關(guān),既能給人類帶來有益的方面,比如醫(yī)藥中的抗生素——青霉素的使用;也會(huì)給自然界帶來一定的危害,例如在微生物實(shí)驗(yàn)室中,它是一種常見的污染菌。在實(shí)驗(yàn)室適當(dāng)?shù)脑黾油庑裕箍諝廨^為干燥,并讓其生長(zhǎng)環(huán)境的溫度處于較低的狀態(tài),可以有效的減輕青霉的危害。微生物在生長(zhǎng)代謝過程中所產(chǎn)生的消化酶,不僅有助于提高動(dòng)物飼料轉(zhuǎn)化率、消除抗?fàn)I養(yǎng)因子,還有助于動(dòng)物的生長(zhǎng);降低海洋動(dòng)物體內(nèi)膽固醇含量,減少排泄物和生長(zhǎng)環(huán)境中氮、有機(jī)磷含量,減少對(duì)其周邊環(huán)境的污染。

      隨著我國(guó)畜牧業(yè)的發(fā)展和生物工程技術(shù)的不斷進(jìn)步,酶制劑在飼料工業(yè)中的應(yīng)用越來越多。由于酶制劑能夠消除飼料中的某些抗?fàn)I養(yǎng)因子的負(fù)面作用,提高飼料消化率,改善動(dòng)物生產(chǎn)性能,降低生產(chǎn)成本,因此日益受到飼料界的重視。

      目前,關(guān)于湯姆青霉代謝產(chǎn)物產(chǎn)消化酶活性測(cè)定以及抑菌實(shí)驗(yàn)方面的研究鮮為少見。因此,對(duì)湯姆青霉產(chǎn)生的消化酶活性進(jìn)行測(cè)定,同時(shí)輔以抑菌實(shí)驗(yàn)可以為微生態(tài)制劑產(chǎn)品和飼用酶制劑的的廣泛使用等提供科學(xué)依據(jù)。

      1 材料與方法

      1.1 菌株

      PenicilliumthomiiPT95菌株,保存在查氏(CA)斜面上[1]。

      PenicilliumthomiiQ1菌株,保存在馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)斜面上。

      大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌由山西大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院韓建榮教授惠贈(zèng)。

      1.2 培養(yǎng)基

      四種誘導(dǎo)培養(yǎng)基分別為:發(fā)酵培養(yǎng)基、酪素瓊脂培養(yǎng)基、羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)瓊脂培養(yǎng)基、淀粉瓊脂培養(yǎng)基。

      馬鈴薯葡萄糖(PDB)液體培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基。

      1.3 主要試劑

      三氯乙酸(TCA),2%可溶性淀粉溶液,檸檬酸鈉,L-酪氨酸,羧甲基纖維素鈉(CMC-Na),結(jié)晶乙酸鈉,對(duì)硝基苯酚,麥芽糖,干酪素,Na2HPO4,HCL,酒石酸鉀鈉,NaOH,苯酚,葡萄糖,NaCO3,冰乙酸,對(duì)硝基苯酚棕櫚酸酯,二硝基水楊酸,檸檬酸,福林試劑,NaH2PO4,無水亞硫酸鈉,二硝基亞砜(DMSO)等,均為分析純。

      福林試劑:福林試劑原液∶蒸餾水=1∶2。

      酪氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液:取酪氨酸 0.1 g,加入1 mol/L HCL 6 mL,再用 0.1 mol/L HCL 定容至100 mL,最后用蒸餾水稀釋10倍即為酪氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。

      DNS指示劑:稱取18.2 g酒石酸鉀鈉,加入50 mL蒸餾水,50 ℃水浴攪拌溶解,再依次加入水楊酸0.6 g、無水亞硫酸鈉0.5 g、 NaOH 2.1 g、苯酚0.5 g,待全部溶解后,冷卻并用蒸餾水定容至100 mL,4 ℃棕色瓶貯存[2]。

      1.4 消化酶活力測(cè)定

      1.4.1 湯姆青霉產(chǎn)消化酶初篩

      將湯姆青霉PT95菌株、Q1菌株分別接種于酪素、CMC-Na、淀粉瓊脂培養(yǎng)基平板上,25 ℃培養(yǎng)2天,觀察是否產(chǎn)生透明圈完成湯姆青霉發(fā)酵液產(chǎn)生的消化酶的初篩。

      1.4.2 湯姆青霉產(chǎn)消化酶復(fù)篩

      將初篩中長(zhǎng)有透明圈的湯姆青霉PT95、Q1菌株接種于發(fā)酵培養(yǎng)基,28 ℃、160 rpm振蕩培養(yǎng)96 h,發(fā)酵物4 000 rpm 離心10 min,所獲得的上清液就是待測(cè)粗酶液。

      1.4.3 蛋白酶活力測(cè)定

      采用福林-酚試劑法進(jìn)行蛋白酶活力測(cè)定[3,4]。

      1.4.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

      取16只試管分別編號(hào),按表1進(jìn)行操作,每個(gè)濃度設(shè)3組重復(fù);將不含酪氨酸的試管(0)作為空白對(duì)照組, 用分光光度計(jì)測(cè)定680 nm處各濃度梯度的酪氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的OD值,橫坐標(biāo)為酪氨酸濃度,縱坐標(biāo)為OD值,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

      表1 蛋白酶標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

      1.4.3.2 待測(cè)粗酶液的處理

      根據(jù)孫建南[5]方法進(jìn)行蛋白酶活力測(cè)定。

      蛋白酶活力單位定義:每min水解酪蛋白釋放1 μg酪氨酸的酶量定義為1個(gè)蛋白酶單位(U)。

      式中:K:吸光常數(shù)

      OD:樣品平行試驗(yàn)的平均光密度

      4:試管中反應(yīng)液總體積(mL)

      10:反應(yīng)10 min

      N:稀釋倍數(shù)

      1.4.4 纖維素酶活力測(cè)定

      采用CMC-Na法測(cè)定其纖維素酶的活力[6,7]。

      1.4.4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

      取16支試管分別編號(hào),按表2進(jìn)行下列的各項(xiàng)操作,每個(gè)濃度設(shè)3組重復(fù),將不含葡萄糖的試管(0)作為空白對(duì)照組,在 550 nm處用分光光度計(jì)測(cè)定各個(gè)濃度梯度的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度值,然后將縱坐標(biāo)定為葡萄糖濃度,橫坐標(biāo)定為吸光度值,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

      表2 纖維素酶標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

      1.4.4.2 待測(cè)粗酶液的處理

      根據(jù)羅佳[8]方法進(jìn)行纖維素酶活力測(cè)定。 纖維素酶活力單位定義:在50 ℃,1 mg酶每min催化纖維素水解生成1 μg葡萄糖定為一個(gè)活力單位(U)。

      纖維素酶活力單位(U)=

      式中:N一酶液的稀釋倍數(shù),此處為10

      30一糖化所用時(shí)間,min

      1一反應(yīng)酶液的mL數(shù)

      1.4.5 淀粉酶活力測(cè)定

      采用二硝基水楊酸比色法測(cè)定淀粉酶的活力[9-11]。

      1.4.5.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

      取19支試管分別編號(hào),按表3進(jìn)行下列的各項(xiàng)操作,每個(gè)濃度設(shè)3組重復(fù), 以不含麥芽糖的試管(0)作為空白對(duì)照組調(diào)零,在520 nm處用分光光度計(jì)測(cè)定各個(gè)濃度梯度的麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的OD值,將縱坐標(biāo)定為麥芽糖量,橫坐標(biāo)定為吸光度值,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算出OD值所對(duì)應(yīng)的麥芽糖含量。

      表3 淀粉酶標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

      1.4.5.2 待測(cè)粗酶液的處理

      根據(jù)史永昶[11]方法進(jìn)行淀粉酶活力測(cè)定。

      淀粉酶活力單位定義:在60 ℃,pH為5.6時(shí),以單位體積樣品在30 min釋放1 mg麥芽糖所需要的酶量為一個(gè)麥芽糖單位(MMU)[2]。

      淀粉酶活性U按下式計(jì)算:

      U=麥芽糖含量(mg)×淀粉原液總體積(mL)

      ×稀釋倍數(shù)/樣品重

      1.4.6 脂肪酶活力的測(cè)定

      采用對(duì)硝基苯酚法進(jìn)行脂肪酶活力測(cè)定[12,13]。

      1.4.6.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

      取16支試管分別編號(hào),按表4進(jìn)行下列的各項(xiàng)操作,每個(gè)濃度設(shè)3組重復(fù),以不含對(duì)硝基苯酚的試管(0)調(diào)零,在410 nm 處用分光光度計(jì)測(cè)定各個(gè)濃度梯度對(duì)硝基苯酚的OD值,將橫坐標(biāo)定為對(duì)硝基苯酚濃度,縱坐標(biāo)定為吸光度值,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

      表4 脂肪酶標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

      1.4.6.2 待測(cè)粗酶液的處理

      根據(jù)李蓓[12]方法進(jìn)行脂肪酶活力測(cè)定。

      脂肪酶活力單位定義為:在一定條件下,以1min內(nèi)催化水解底物p-NPP產(chǎn)生1 μmol p-NP所需的酶量為1個(gè)酶活單位(U)。

      脂肪酶活計(jì)算公式為:U=1 000×n×V×c/t

      其中n為稀釋倍數(shù)

      c為所測(cè)吸光度值對(duì)應(yīng)的濃度(mmol/L);

      t為反應(yīng)時(shí)間(單位:min);

      V為反應(yīng)體系的總體積(單位:L)。

      1.5 抑菌實(shí)驗(yàn)

      1.5.1 指示菌活化

      用移液槍吸取100 μL大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌保存液接種于50 mL牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基中,37 ℃、150 rpm振蕩培養(yǎng)24 h。

      1.5.2 湯姆青霉PT95和Q1菌株發(fā)酵液制備

      用接種環(huán)挑取湯姆青霉菌株于100 mL PDB培養(yǎng)基中,置于25 ℃、200 rpm振蕩培養(yǎng)5天,留湯姆青霉菌株發(fā)酵濾液備用。

      1.5.3 牛津杯法檢測(cè)發(fā)酵液的抑菌活性

      用移液槍吸取200 μL活化好的各指示菌株于冷卻后的無菌培養(yǎng)皿中,牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(25 mL)滅菌后冷卻至50 ℃左右時(shí)倒入相應(yīng)加入指示菌株的培養(yǎng)皿中,采用牛津杯法檢測(cè)發(fā)酵液的抑菌活性,37 ℃下培養(yǎng)12~24 h,觀察是否有抑菌圈出現(xiàn)并用十字交叉法測(cè)量抑菌圈直徑大小。

      抑菌率=(抑菌圈直徑-牛津杯直徑)/

      抑菌圈直徑×100%

      1.5.4 最小抑菌濃度的測(cè)定

      將湯姆青霉PT95和Q1菌株的發(fā)酵濾液在50 ℃下旋轉(zhuǎn)濃縮至原體積的五分之一,然后加入95%乙醇沉淀,使其終濃度為75%,4 ℃冰箱放置2天后離心,棄去沉淀,重復(fù)一次,上清液50 ℃下濃縮得浸膏,冷卻干燥成凍干粉備用[14]。

      準(zhǔn)確稱取一定量的發(fā)酵液凍干粉,用2.5%的DMSO分別配制成濃度為5.12、2.56、1.28、0.64、0.32、0.16 mg/mL的樣品溶液[15]。采用牛津杯法用樣品溶液以及最佳抑菌效果的菌種來測(cè)定,置于37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h,觀察各培養(yǎng)皿中菌落形成情況,是否有抑菌圈出現(xiàn)并用十字交叉法測(cè)量抑菌圈直徑大小。

      1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

      實(shí)驗(yàn)均設(shè)三次重復(fù),以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差來表示實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),用SPSS軟件進(jìn)行方差分析和相關(guān)性分析,同時(shí)用Duncan多重比較法進(jìn)行多個(gè)均數(shù)間的兩兩比較[16]。

      2 結(jié)果

      2.1 湯姆青霉產(chǎn)蛋白酶活力測(cè)定

      2.1.1 蛋白酶標(biāo)準(zhǔn)曲線

      圖1為蛋白酶標(biāo)準(zhǔn)曲線,兩者線性關(guān)系良好,方程可表示為y=0.011 5x-0.028 9,R2=0.993 8。

      圖1 蛋白酶標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.1 Standard curve of protease

      當(dāng)OD值為1時(shí),酪氨酸的濃度即吸光常數(shù)K,K=89.47。

      2.1.2 酶活力測(cè)定

      表5 湯姆青霉蛋白酶活力

      從表5可以看出,湯姆青霉PT95與Q1之間所產(chǎn)的蛋白酶活力相比差異較顯著(P<0.05),PT95菌株的蛋白酶活力是Q1菌株的1.38倍。Uttatree 等[17]報(bào)道了枯草芽孢桿菌B.subtilisBUU1 液體發(fā)酵24 h 產(chǎn)蛋白酶活力為26.455 U??梢钥闯鰷非嗝箖芍昃甑牡鞍酌富盍ο鄬?duì)較高,后續(xù)可以開展發(fā)酵優(yōu)化實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步提高蛋白酶活力,用于酶制劑的開發(fā)。

      2.2 湯姆青霉產(chǎn)纖維素酶活力測(cè)定

      2.2.1 纖維素酶標(biāo)準(zhǔn)曲線

      圖2為纖維素酶標(biāo)準(zhǔn)曲線,兩者線性關(guān)系良好,方程表示為y=0.071 1x-0.001 8,R2=0.999 4。

      圖2 纖維素酶標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.2 Standard curve of cellulase

      2.2.2 酶活力測(cè)定

      表6 湯姆青霉纖維素酶活力

      從表6可以看出,湯姆青霉PT95與Q1菌株的纖維素酶活力差異較顯著(P<0.05),PT95菌株的纖維素酶活力是Q1菌株的1.6倍。真菌是目前工業(yè)生產(chǎn)更是纖維素酶的主要菌種,其中絲狀真菌以木霉屬、曲霉屬和青霉屬為主,纖維素酶產(chǎn)量高于其他微生物,所以被廣泛使用于纖維素酶產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)[18],但湯姆青霉的纖維素酶活力從實(shí)驗(yàn)結(jié)果來看并不是很高,推測(cè)可能和湯姆青霉PT95和Q1菌株主要以產(chǎn)生富含類胡蘿卜素的菌核為主,以產(chǎn)生抗氧化物質(zhì)度過生長(zhǎng),并不是以產(chǎn)生纖維素酶為主的;也有可能是沒有做發(fā)酵優(yōu)化以提高纖維素酶活力,后續(xù)可以開展此方面研究來看是否有幫助。

      2.3 湯姆青霉產(chǎn)淀粉酶活力測(cè)定

      2.3.1 淀粉酶標(biāo)準(zhǔn)曲線

      圖3為淀粉酶標(biāo)準(zhǔn)曲線,方程表示為y=2.983x+0.038 6,R2=0.997 2。

      圖3 淀粉酶標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.3 Standard curve of amylase

      2.3.2 酶活力測(cè)定

      表7 湯姆青霉淀粉酶活力

      從表7可以看出,湯姆青霉PT95和Q1菌株所產(chǎn)的淀粉酶活力差異不大,PT95菌株的蛋白酶活力僅比Q1菌株大0.277 U。淀粉酶是指分解淀粉及糖原等高分子聚合物的酶的總稱。淀粉酶主要作用于直鏈淀粉、可溶性淀粉和糖原等,根據(jù)其催化特點(diǎn),通常分為α-淀粉酶和β-淀粉酶。淀粉為動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育提供重要的能量來源,而淀粉的消化與吸收離不開淀粉酶的參與和調(diào)控。研究發(fā)現(xiàn),家禽日糧中添加淀粉酶產(chǎn)品,有助于提高家禽對(duì)淀粉的消化和利用率;在復(fù)胃動(dòng)物基礎(chǔ)飼糧中補(bǔ)充適量淀粉酶,對(duì)其生產(chǎn)性能的改善具有促進(jìn)作用。張帥等[19]利用黑曲霉對(duì)橘皮進(jìn)行固體發(fā)酵生產(chǎn)淀粉酶和纖維素酶。結(jié)果顯示優(yōu)化后淀粉酶活力達(dá)196 U/g,從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出湯姆青霉PT95和Q1菌株的產(chǎn)淀粉酶活力并不高,需要進(jìn)行優(yōu)化并添加發(fā)酵底物。

      2.4 湯姆青霉產(chǎn)脂肪酶活力測(cè)定

      2.4.1 脂肪酶標(biāo)準(zhǔn)曲線

      圖4為脂肪酶標(biāo)準(zhǔn)曲線,方程表示為y=14.791x+0.018 7,R2=0.996。

      圖4 脂肪酶標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.4 Standard curve of lipase

      2.4.2 酶活力測(cè)定

      表8 湯姆青霉脂肪酶活力

      從表8可以看出,湯姆青霉PT95與Q1之間產(chǎn)的脂肪酶活力差異極顯著(P<0.01),PT95菌株的脂肪酶活力是Q1菌株的1.7倍。脂肪酶又稱三?;视王;纸饷?。在脂肪代謝過程中能夠?qū)⒅舅獬蓜?dòng)物可以直接吸收的小分子物質(zhì)。在動(dòng)物體內(nèi),脂肪酶控制著脂質(zhì)代謝的整個(gè)過程。因此,脂肪酶是動(dòng)物機(jī)體內(nèi)重要的消化酶。用于生產(chǎn)脂肪酶的微生物菌種主要包括黑曲霉和假絲酵母等。何茹等從葡萄中分離出1 株產(chǎn)脂肪酶的內(nèi)生黑曲霉菌株并對(duì)其發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化試驗(yàn),脂肪酶活力可達(dá)18.75 U[20],湯姆青霉PT95和Q1菌株在沒有優(yōu)化的基礎(chǔ)上脂肪酶活力已有一定的量級(jí),后續(xù)研究中可以對(duì)其進(jìn)行優(yōu)化以提高活力進(jìn)行酶制劑的開發(fā)利用。

      2.5 最佳抑菌效果菌株的篩選

      從表9和表10可以看出枯草芽孢桿菌可以作為具有最佳抑菌效果的指示菌株,兩株菌株對(duì)其的抑菌率分別可以達(dá)到56.37%和53.73%,且抑菌圈直徑也最大。湯姆青霉PT95菌株發(fā)酵濾液對(duì)大腸桿菌有抑菌活性但是相比較枯草芽孢桿菌來說活性較低,對(duì)金黃色葡萄球菌沒有抑菌作用;Q1菌株發(fā)酵液對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌均有抑菌作用,但遠(yuǎn)低于枯草芽孢桿菌。從表11可以看出湯姆青霉PT95和Q1發(fā)酵濾液對(duì)枯草芽孢桿菌的最小抑菌濃度為0.64和0.32 mg/mL。

      表9 發(fā)酵液對(duì)不同指示菌株的抑菌圈直徑

      注:每行數(shù)據(jù)中帶不同字母表示差異顯著(P<0.05),“-”表示沒有出現(xiàn)抑菌圈。

      Note:There are significant differences in different letters in each row of data (P<0.05),"-" means no bacteriostatic circle.

      表10 發(fā)酵液對(duì)不同指示菌株抑菌率大小

      注:每行數(shù)據(jù)中帶不同字母表示差異顯著(P<0.05)“-”表示沒有抑菌效果。

      Note:There are significant differences in different letters in each line of data (P<0.05),"-" means no bacteriostasis effect.

      3 討論

      眾所周知,我國(guó)養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展迅速,集約化養(yǎng)殖規(guī)模不斷擴(kuò)大。為了防止養(yǎng)殖過程中病害的暴發(fā),抗生素被大量使用。但是抗生素導(dǎo)致耐藥性的產(chǎn)生及殘留藥物通過食物鏈影響人類健康問題日益突出。因此,尋找新型環(huán)保的抗生素替代品成為了當(dāng)下的研究熱點(diǎn)[21,22]。

      表11 發(fā)酵液對(duì)指示菌的最小抑菌濃度測(cè)定

      注:“-”表示無抑菌活性或者無抑菌圈;“+”表示菌落的數(shù)量,+的數(shù)量越多,表示菌落數(shù)越多;“*”表示抑菌圈大小,*的數(shù)量越多,表示抑菌圈越大。

      Note:"-" means no bacteriostatic activity or no bacteriostatic circle;"+" denotes the number of colonies,and the more + denotes the number of colonies;"*" denotes the size of the bacteriostatic zone,and more “*” denotes larger bacteriostatic zone.

      益生菌作為替代抗生素成為新型的飼料添加劑,受到人們的廣泛關(guān)注。研究表明,益生菌具有增強(qiáng)養(yǎng)殖動(dòng)物免疫力、促進(jìn)餌料的消化吸收、改善養(yǎng)殖環(huán)境等作用。益生菌本身無毒無害,不殘留,不產(chǎn)生抗藥性,是未來養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的應(yīng)用研究重點(diǎn)[23]。隨著飼料添加劑研究的不斷深入,人們發(fā)現(xiàn)纖維素酶、蛋白酶和淀粉酶等酶制劑在動(dòng)物體內(nèi)發(fā)揮重要作用,因此對(duì)于益生菌中添加復(fù)合酶制劑將成為新的研究熱點(diǎn)。而青霉在自然界中廣泛存在,與人類生活息息相關(guān),因此對(duì)青霉代謝產(chǎn)物的研究有助于對(duì)其理化特性的進(jìn)一步分析從而更好地發(fā)揮其功能。本實(shí)驗(yàn)所用湯姆青霉PT95和Q1菌株是可以在菌核中積累類胡蘿卜素的[1],但其能否產(chǎn)生消化酶,并用于飼用酶制劑中有待實(shí)驗(yàn)證實(shí),而本文中選取蛋白酶、纖維素酶、淀粉酶、脂肪酶4種消化酶作為檢測(cè)指標(biāo),對(duì)菌株產(chǎn)生的酶活力進(jìn)行了測(cè)定,從實(shí)驗(yàn)結(jié)果中可以看出兩株菌株淀粉酶活力差異不大,而脂肪酶活力差異極顯著,其余兩種酶活力差異顯著,結(jié)果說明湯姆青霉PT95和Q1菌株可以作為益生菌進(jìn)行飼用酶制劑的開發(fā)利用,整體來看,PT95菌株的消化酶活力大于Q1菌株,可能PT95菌株中有其他作用機(jī)制有待探索。

      抑菌實(shí)驗(yàn)可以看出湯姆青霉PT95以及Q1菌株對(duì)枯草芽孢桿菌都表現(xiàn)出了極強(qiáng)的抑菌活性,下一步可以對(duì)其進(jìn)行優(yōu)化培養(yǎng)以提高兩株菌株的抑菌活性,并可以對(duì)其抑菌機(jī)理進(jìn)行深入研究,以期開發(fā)出相關(guān)的抑菌活性產(chǎn)品應(yīng)用于醫(yī)藥、食品等領(lǐng)域。

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