王曉琳 王昭順 付振鵬

【摘 要】 目的： 探討細胞蠟塊在IgG4相關(guān)性橋本甲狀腺炎細針吸取細胞學檢查中的應用價值。方法：對3例IgG4相關(guān)性橋本甲狀腺炎和5例非IgG4相關(guān)性橋本甲狀腺炎的細針穿刺細胞進行涂片并制作細胞蠟塊，通過免疫組織化學方法觀察分析IgG和IgG4的表達情況。結(jié)果：涂片中IgG及IgG4的表達均為陰性，非IgG4相關(guān)性橋本甲狀腺炎細胞蠟塊切片IgG及IgG4的表達均為陰性;IgG4相關(guān)性橋本甲狀腺炎細胞蠟塊IgG及IgG4均可見陽性表達，表達陽性細胞率分別為4%-7%和2%-3%。結(jié)論： 細胞蠟塊在IgG4相關(guān)性橋本甲狀腺炎的篩查中具有重要的診斷意義。

【關(guān)鍵詞】 ?細胞蠟塊;IgG4相關(guān)性橋本甲狀腺炎;細針吸取細胞學

【中圖分類號】 R446.9 ? ?【文獻標志碼】A ? ?【文章編號】1005-0019（2019）19-026-02 ?甲狀腺細針吸取細胞學檢查（fine needle aspiration FNAC）因其準確、快速、方便、安全性高的特點，已廣泛用于臨床。細胞學檢查在IgG4相關(guān)性橋本甲狀腺炎（Hashimoto's thyroiditis，IgG4 HT）診斷中的應用，目前未發(fā)現(xiàn)有相關(guān)報道。此研究嘗試探討細胞蠟塊檢測在IgG4 HT診斷中的應用價值。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 濰坊市中醫(yī)院2012-2018年因甲狀腺占位入院患者，選取超聲檢查考慮橋本甲狀腺炎，并且外周血TPOAb和TgAb升高，同時有FNAC、細胞蠟塊和術(shù)后常規(guī)病理資料的病例共8例。

1.2 方法

1.2.1 細針吸取制片 10ml一次性干燥注射器（7號針頭）快速經(jīng)皮膚刺入腫塊，取部分吸出物制成涂片4張，95%酒精迅速固定，分別行HE和免疫組織化學染色。

1.2.2 細胞蠟塊制備 將針頭及針管內(nèi)剩余部分立即用4%甲醛20ml反復抽吸沖洗入50ml尖底塑料試管內(nèi)后，以3000 r/分鐘離心15分鐘;此時可見細胞小團塊組織聚集在試管尖底部。用刀切取出細胞塊，再進行常規(guī)固定、脫水、石蠟包埋及連續(xù)切片，行HE和免疫組織化學染色。

1.2.3 免疫組化試劑 選用邁新單克隆抗體IgG、IgG4，Envision二步法對常規(guī)涂片、細胞切片及術(shù)后常規(guī)切片進行免疫組化染色，已知陽性片作陽性對照，PBS液替代一抗作陰性對照。

1.2.4 樣本分組并觀察分析 根據(jù)術(shù)后常規(guī)明確診斷，并分為IgG4 HT組和非IgG4 HT組，對比觀察涂片及細胞蠟塊切片中陽性細胞占全部細胞比例。

2 結(jié)果

HE染色制片，3例IgG4 HT及5例非IgG4 HT細胞學涂片中，可見極少或缺乏漿細胞。細胞蠟塊切片中，IgG4 HT組可見漿細胞存在，所占細胞百分比分別為5%、6%和8%，非IgG4 HT組漿細胞百分比均低于2%。術(shù)后組織切片中，IgG4 HT組可見多量漿細胞及淋巴細胞存在，漿細胞百分比分別為7%、7%和8%;非IgG4 HT組可見大量淋巴細胞及少許漿細胞存在，漿細胞百分比均低于3%。

免疫組化檢查，3例IgG4 HT及5例非IgG4 HT細胞學涂片中，IgG及IgG4表達均為陰性。細胞蠟塊切片中，IgG及IgG4陽性表達于漿細胞的胞膜和胞漿（圖3）。IgG4 HT組IgG陽性細胞數(shù)所占百分比分別為4%、5%和7%，IgG4陽性細胞數(shù)所占百分比分別為2%、3%和3%;非IgG4 HT組IgG及IgG4表達均為陰性。術(shù)后組織切片中，IgG4 HT組IgG陽性細胞數(shù)所占百分比分別為5%、6%和7%，IgG4陽性細胞數(shù)所占百分比分別為2%、3%和4%;非IgG4 HT組IgG及IgG4表達均為陰性。

3 討論

細胞蠟塊與傳統(tǒng)細胞涂片相比，細胞集中，背景清晰，清除部分血細胞及炎癥細胞，不會出現(xiàn)細胞重疊擁擠、厚薄不一的現(xiàn)象，在一定程度上，提高了細胞學診斷的陽性率。細胞蠟塊最大特點是標本易于保存，可以連續(xù)切片，除常規(guī)細胞染色外，還可進行免疫組織化學、免疫熒光、原位雜交及分子基因檢測等[1]，更好的滿足診斷需要。而傳統(tǒng)涂片免疫組化細胞成分復雜，有較強的非特異性背景著色，三維細胞團易于抗體及探針的進入，產(chǎn)生假陽性。同時脫落細胞有完整的細胞膜，雖經(jīng)乙醇固定，其胞膜上的類脂質(zhì)不能充分融解，影響試劑的滲透造成陽性細胞著色不良[2.3]，影響結(jié)果判斷。

有文獻認為，由于甲狀腺穿刺樣品細胞量較少，因此，細胞蠟塊僅在6%-31%的甲狀腺病變中具有診斷價值[4]?；仡櫛窘M的制片和免疫組化情況，細胞蠟塊切片IgG和IgG4檢測的陽性率均明顯優(yōu)于FNAC涂片，定位準確，顯示出較高的實用推廣價值。尤其是作為術(shù)前的檢測結(jié)果，對臨床治療方案的選擇具有一定意義，若能結(jié)合臨床特征及外周血IgG4檢測，指導意義更大，值得推廣應用。

參考文獻

[1] 尹迎春，王新美，李良，等.非小細胞肺癌胸腔積液細胞蠟塊檢測EGFR與K-ras基因突變和EML4-ALK融合基因及其臨床病理特征[J].中國胸心血管外科臨床雜志，2015，22（9）：870-874.

[2] 祝佳，朱濤.細胞塊石蠟切片在脫落細胞學中的應用[J].浙江臨床醫(yī)學，2006，8（10）：1100.

[3] Fetsch P A，Simsir A，Brosky K，Abati A. Comparison of three commonly used cytologic preparations in effusion immunocytochemistry[J].Diagn Cytopathol，2002，26（1）：61-63.

[4] Jain D，M alhur S R，lyer V K.Cell blocks in cytopathology：a review of preparative methods， utilify in diagnosis and role in ancillary studies[J].Cytopathology，2014，25（6）：356—371.