張 燁，朱文雅，李 唐

（山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護研究所，農(nóng)業(yè)有害生物綜合治理山西省重點實驗室，山西太原030031）

赤眼蜂（Trichogramma spp.）是一類體型微小的卵寄生蜂，與其他寄生或捕食性天敵相比，它能通過自身的產(chǎn)卵行為破壞寄主卵，將害蟲殺死于孵化階段，故常被作為一種重要的天敵昆蟲資源，廣泛應(yīng)用于農(nóng)林類害蟲的生物防治[1]。

赤眼蜂主要是通過在田間的淹沒式釋放來達到防治靶標(biāo)害蟲的目的[2-4]，根據(jù)其釋放方式的不同，可分為人工釋放和機械釋放。人工釋放即依靠人力將蜂卡懸掛于作物的特定部位，而機械釋放則需要借助飛行裝置對蜂卡進行高空投放。由于卡紙上通常為發(fā)育至蛹態(tài)后期的蜂，為了保證其在田間較高的羽化率，對釋放過程中及釋放后蜂卡的合理保護是非常有必要的?；诖?，一些具有保護性功能的釋放裝置被逐一研發(fā)，包括紙袋放蜂器[5]、盒式放蜂器[6]、杯型放蜂器[7-8]、球狀放蜂器[9-11]等。根據(jù)不同作物的生長環(huán)境特點，選擇合適的保護裝置作為釋放載體單獨或配套使用以防治靶標(biāo)害蟲，例如，將盒式放蜂器和球狀放蜂器應(yīng)用于玉米田防治玉米螟，將球狀放蜂器應(yīng)用于水稻田防治二化螟[12]，將紙袋放蜂器應(yīng)用于棉田防治棉鈴蟲[13]，將杯型放蜂器應(yīng)用于梨園防治梨小食心蟲等。此外，也有學(xué)者將懸浮溶液作為赤眼蜂無人機釋放時的保護介質(zhì)[14]。這些保護性措施均在一定程度上提升了赤眼蜂的田間釋放效率。

螟黃赤眼蜂（Trichogramma chilonis Ishii）寄主種類較為廣泛，可寄生的農(nóng)林類害蟲高達80 多種，是目前規(guī)?；a(chǎn)及應(yīng)用的赤眼蜂之一[15-17]。梨小食心蟲（Grapholita molesta Busck）是一種世界性分布的果樹害蟲，其寄主包括梨、桃、蘋果、李等薔薇科的多種果樹[18]，嚴(yán)重影響果實的品質(zhì)和產(chǎn)量[19]。除了松毛蟲赤眼蜂（Trichogramma dendrolimi Matsumura）和暗黑赤眼蜂（Trichogramma pintoi Voegele）[20-22]，螟黃赤眼蜂也是一種對梨小食心蟲具有潛在寄生能力的卵寄生蜂。已有學(xué)者探討了螟黃赤眼蜂對梨小食心蟲的防治效果，但相關(guān)研究集中在適宜蜂種的篩選，以及赤眼蜂釋放同生物農(nóng)藥噴施相結(jié)合的生物防治配套技術(shù)的應(yīng)用[23]，并未涉及到梨園不同栽培狀態(tài)及赤眼蜂不同釋放模式對蜂卡的出蜂情況及田間防效的影響。

本研究分別對套袋和無袋梨園，螟黃赤眼蜂經(jīng)常規(guī)釋放和保護釋放后蜂卡的出蜂、釋放后蜂種的存活及其對梨小食心蟲的田間防效情況進行了比較分析，旨在找到一種簡便高效的赤眼蜂釋放方法，以期為赤眼蜂的科學(xué)合理化利用提供技術(shù)支持和理論支撐。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

螟黃赤眼蜂：采自山西省運城市鹽湖區(qū)泓芝驛鎮(zhèn)梨園梨小食心蟲寄生卵，經(jīng)鑒定純化，以米蛾（Corcyra cephalonica Stainton）卵為寄主繁育多代建立穩(wěn)定的室內(nèi)飼養(yǎng)種群。飼養(yǎng)條件為溫度25 ℃、相對濕度75%、光周期15L∶9D。

米蛾卵：以麥麩混配大豆面、玉米面和小麥面作為人工飼料飼養(yǎng)米蛾，獲取新鮮干凈的米蛾卵并于紫外燈下照射30 min 以殺死卵內(nèi)胚胎，后用于螟黃赤眼蜂的繁育。

1.2 試驗方法

1.2.1 簡易杯形放蜂器的制備 一次性紙杯1 個，細鐵絲1 根。將細鐵絲沿紙杯內(nèi)壁穿過杯底，待鐵絲到達杯口處稍長些，將其向外彎折以勾住杯口外壁。使用時，將細鐵絲一端纏繞在果樹枝干，使杯口朝下懸掛于合適的放蜂位置。

1.2.2 蜂卡的批量繁育 將滅活后的新鮮米蛾卵均勻撒在涂有白乳膠的卡紙（長4.00 cm、寬2.50 cm）上，卵粒間無堆砌和重疊，待晾干后形成未寄生卵卡，保證1 000 粒卵/卡。選擇出蜂率較好的寄生卵卡作為蜂種，按照寄生卵卡∶未寄生卵卡＝1∶7 的數(shù)量比例進行接蜂，培養(yǎng)條件為溫度25 ℃、相對濕度75%、光周期15L∶9D。待米蛾卵寄生變黑后，選擇寄生率在90%以上的卵卡作為果園釋放蜂卡備用。

1.2.3 果園釋放赤眼蜂及釋放后存活情況和防效調(diào)查 于放蜂區(qū)選擇套袋梨園和無袋梨園，分別進行赤眼蜂的保護釋放和常規(guī)釋放。保護釋放：將蜂卡用膠棒黏于杯形放蜂器內(nèi)壁，用尾端鐵絲將其懸掛于果樹枝干，使放蜂點位于梨樹樹冠中部；常規(guī)釋放：將蜂卡直接用大頭針固定于梨樹樹冠中部葉片的背部。放蜂點在果園分布均勻，且保證每公頃450 張蜂卡。放蜂同時，選擇果園邊角及中心未設(shè)置放蜂點的梨樹，用大頭針將已滅活且未寄生的米蛾卵卡固定于梨樹樹冠中部葉片的背部，保證每公頃75 張卵卡。

放蜂時間分別為7 月中旬至下旬、8 月上旬至中旬，每批放蜂3 次，每次放蜂時間間隔3～5 d，具體時間根據(jù)當(dāng)?shù)貧夂蜃兓M行適當(dāng)調(diào)節(jié)。自每月第2 次放蜂結(jié)束起，開始回收前一次的蜂卡及卵卡，其中，蜂卡取回后直接于室內(nèi)鏡檢觀察，統(tǒng)計寄生卵數(shù)和出蜂卵數(shù)，計算出蜂率。卵卡取回后，先于溫度25 ℃、相對濕度75%、光周期15L∶9D 環(huán)境下培養(yǎng)至其出蜂，后鏡檢觀察，統(tǒng)計寄生卵數(shù)和出蜂卵數(shù)，計算出蜂率，方法同上。3 次放蜂結(jié)束后進行1 次防效調(diào)查，分別統(tǒng)計保護放蜂區(qū)、常規(guī)放蜂和未放蜂區(qū)梨果上寄生（黑卵）及未寄生（白卵）的梨小食心蟲卵數(shù)，計算防效。

1.3 數(shù)據(jù)處理及分析

試驗中所獲得的出蜂率數(shù)據(jù)先進行反正弦轉(zhuǎn)換。采用單因素方差分析及多重比較檢驗出蜂率在各處理間的差異顯著性，采用秩和檢驗分析寄生卵數(shù)在各處理間的差異顯著性，采用卡方檢驗分析防效在各處理間的差異顯著性。所有試驗數(shù)據(jù)均采用SPSS 20.0 軟件對其進行統(tǒng)計分析（P＜0.05）。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同栽培狀態(tài)及釋放模式下蜂卡的出蜂情況差異比較

表1 不同栽培狀態(tài)及釋放模式下蜂卡的出蜂情況

對不同栽培狀態(tài)及釋放模式下蜂卡的出蜂率情況進行方差分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在無袋和套袋梨園，蜂卡經(jīng)常規(guī)釋放和保護釋放后的出蜂率無顯著性差異（P＞0.05），均處于85%以上（表1）。分別將2 種釋放模式下的出蜂率值繪制成箱線圖，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，當(dāng)采用常規(guī)釋放時，蜂卡出蜂率分位值間的差距較大，數(shù)據(jù)分散程度較高，而保護釋放時，分位值間的差距較小且數(shù)據(jù)相對集中（圖1）。

2.2 不同釋放模式下，梨園赤眼蜂對米蛾卵卡的寄生及出蜂情況比較

對不同釋放模式下梨園赤眼蜂對米蛾卵卡的寄生卵數(shù)進行秩和檢驗，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，常規(guī)釋放和保護釋放后米蛾卵卡上的寄生卵數(shù)在套袋及無袋梨園所表現(xiàn)出的差異性一致。其中，7 月第1 次放蜂后，保護釋放區(qū)已寄生米蛾卵卡上的黑卵數(shù)顯著高于常規(guī)釋放區(qū)（P＜0.05），但7 月第2，3 次放蜂后，不同釋放區(qū)之間的黑卵數(shù)差異并不明顯（P＞0.05）；8 月3 次放蜂后，保護釋放區(qū)已寄生米蛾卵卡上的黑卵數(shù)均顯著高于常規(guī)釋放區(qū)（P＜0.05）（圖2 和圖3）。此外，結(jié)果還發(fā)現(xiàn)，常規(guī)釋放及保護釋放區(qū)回收的米蛾寄生卵卡，其出蜂率與所釋放蜂卡之間無顯著性差異（P＞0.05），均保持在80%以上（表2）。

表2 不同類型寄生卵卡間的出蜂情況

2.3 不同釋放模式下赤眼蜂對梨園梨小食心蟲的防效情況比較

從圖4 可以看出，對不同釋放模式下梨園梨小食心蟲的寄生率進行卡方檢驗，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，未放蜂區(qū)、常規(guī)釋放區(qū)和保護釋放區(qū)的梨小食心蟲寄生率之間差異顯著（P＜0.05）。具體表現(xiàn)為，梨園放蜂區(qū)梨小食心蟲的寄生率均顯著高于未放蜂區(qū)梨小食心蟲的寄生率，且保護釋放區(qū)要優(yōu)于常規(guī)釋放區(qū)。

3 結(jié)論與討論

3.1 不同釋放模式對蜂卡出蜂率及梨小食心蟲寄生率的影響

釋放蜂卡是赤眼蜂在田間應(yīng)用的常見方式，出蜂數(shù)量的多寡[24]和質(zhì)量的好壞直接關(guān)系到后期的防治效果。因此，采取適當(dāng)方法，適時適量地將蜂散放田間，是赤眼蜂應(yīng)用研究的關(guān)鍵環(huán)節(jié)[25]。

本研究在探討不同栽培狀態(tài)及釋放模式下蜂卡的出蜂情況時發(fā)現(xiàn)，在無袋和套袋梨園中，常規(guī)釋放和保護釋放下蜂卡的出蜂率基本保持一致。但相較于常規(guī)釋放，保護釋放下蜂卡的出蜂率波動較小，相對更穩(wěn)定。故筆者認(rèn)為，保護釋放雖不能顯著提升蜂卡的出蜂率，但對于維持各放蜂點出蜂的穩(wěn)定性方面具有積極作用。這主要是因為所釋放赤眼蜂大多處于待羽化期[25]，其從卵發(fā)育至蛹態(tài)后期的階段基本在室內(nèi)適宜條件下完成，成蜂羽化階段受外界環(huán)境因子影響時間較短，故紙杯放蜂器對蜂卡的保護作用并未能完全體現(xiàn)。此外，對不同釋放模式下梨園梨小食心蟲的寄生情況進行調(diào)查時發(fā)現(xiàn)，釋放螟黃赤眼蜂能夠有效提升梨小食心蟲的田間寄生率，相較于常規(guī)釋放，保護釋放下梨小食心蟲的田間寄生率相對更高。研究表明，螟黃赤眼蜂可作為防治梨小食心蟲的天敵資源之一，且保護釋放能夠提升其對梨小食心蟲的寄生效果。鑒于每次所釋放赤眼蜂為同一批次同一條件下繁育，其成蜂質(zhì)量應(yīng)大致相同，因此，推測造成寄生率差異的主要原因是不同釋放模式下成蜂存活情況的不同，這一結(jié)論在釋放后梨園赤眼蜂對米蛾卵卡的寄生試驗中得到證實。

3.2 不同釋放模式下， 梨園赤眼蜂對米蛾卵卡的寄生和出蜂情況比較

赤眼蜂釋放到田間后，易受到外界惡劣氣候條件、田間噴施化學(xué)農(nóng)藥及它種天敵攻擊等生存逆境的影響，因此，赤眼蜂羽化后在田間的存活情況是影響防治效果的一個重要因素[26]。

本研究通過在梨園放蜂區(qū)懸掛米蛾卵卡，借助卡紙上被寄生的黑卵數(shù)以反映釋放后園內(nèi)赤眼蜂的存活情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，7 月第1 次放蜂及8 月的3 次放蜂操作中，保護釋放區(qū)已寄生米蛾卵卡上的黑卵數(shù)均顯著高于常規(guī)釋放區(qū)，但7 月第2，3 次放蜂后，不同釋放區(qū)之間的黑卵數(shù)差異并不明顯。這主要是因為，7 月第2 次放蜂后不久便出現(xiàn)短時大量的降雨，且第2，3 次放蜂間隔時間較短，卵卡在梨園投放時間也很短，故回收后統(tǒng)計的黑卵數(shù)結(jié)果偏低，數(shù)值異常；7 月第3 次放蜂由于受不連續(xù)降雨的影響，時間相對靠后，處于7 月下旬，而同時段的梨小食心蟲動態(tài)監(jiān)測發(fā)現(xiàn)，該時間正是梨小的發(fā)生高峰期，推測此時梨園內(nèi)的野生赤眼蜂也正處于種群增長的時期。投放的米蛾卵卡位于梨園這樣一個開放的生態(tài)系統(tǒng)中，因此，統(tǒng)計的黑卵數(shù)除了人工釋放的螟黃赤眼蜂寄生量外，還應(yīng)包括梨園赤眼蜂自然種群的寄生量，這也解釋了為何回收后統(tǒng)計的黑卵數(shù)偏高，結(jié)果異于其他批次。基于此，筆者認(rèn)為，保護釋放能夠提升羽化后成蜂在田間的存活概率。此外，研究還發(fā)現(xiàn)，滅活米蛾卵在田間也可作為赤眼蜂天敵的優(yōu)良中間寄主，能夠被很好的寄生且維持一個相對較高的出蜂率。因此，在進行放蜂操作時，可同時投放一定數(shù)量的未寄生米蛾卵，為梨園卵寄生性天敵提供臨時的食源和寄生場所，以應(yīng)對短期突發(fā)性的惡劣天氣及由于害蟲種群密度過低造成的搜尋困難等不良因素的干擾。

現(xiàn)代生物防治主張充分利用生物手段對有害生物進行適度治理，尤其是希望通過天敵的引進、釋放對主要害蟲進行持續(xù)控制，最終目的是建立一個可以自我維持的系統(tǒng)以降低有害生物的種群水平[27]。因此，赤眼蜂在田間應(yīng)用時，無論以何種方式進行釋放，最終都希望能在釋放區(qū)建立一定的種群數(shù)量。但田間受自然環(huán)境及人為因素的干擾頻繁，影響赤眼蜂成蟲存活的因素有很多。董杰等[2]在探討溫度、濕度、食物和葉片等因子對松毛蟲赤眼蜂存活的時間影響時發(fā)現(xiàn)，在田間環(huán)境下，溫度和食物是影響赤眼蜂成蟲存活時間的主要因子，也有其他學(xué)者分別探討了溫度[28-30]和食物[31]對赤眼蜂壽命、生殖力、子代羽化率等生理指標(biāo)的影響，并認(rèn)為不適宜的溫度和不充足的食源會不同程度影響赤眼蜂的寄生潛能。本研究選址于運城市鹽湖區(qū)，該地區(qū)梨園防治梨小食心蟲的最佳時期為6 月中下旬至8 月中旬，而該時間段恰逢高溫酷暑，加上一定頻次的化學(xué)農(nóng)藥的施用，使得田間的氣候環(huán)境不太利于赤眼蜂對梨小食心蟲的后續(xù)防治。本研究利用以紙杯放蜂器為核心的保護釋放技術(shù)，緩解了田間高溫、風(fēng)雨及它種天敵對蜂卡的傷害，并為羽化后成蜂提供了庇護所。此外，補充中間寄主米蛾卵的操作，也一定程度解決了田間食物不充足或寄主密度相對較低時釋放赤眼蜂難以生存的困境，利于其種群的維系和建立。但試驗中也有一些問題需要后續(xù)研究來完善，例如，保護釋放后田間米蛾卵卡上的黑卵數(shù)相對常規(guī)釋放后更多，這種寄生量的相對增多是因為保護釋放后成蜂數(shù)量的增加還是成蜂壽命的延長導(dǎo)致。此外，赤眼蜂在田間寄生米蛾卵卡后，雖然能正常羽化出蜂，但其子代蜂的質(zhì)量如何需要進一步評估。