葉嬋琦 李瓊 單建貞 阮健

目前，原發(fā)性肝癌是我國第四常見的惡性腫瘤，其中肝細(xì)胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是最主要的組織病理學(xué)類型，占全部肝癌的85%～90%［1］。HCC 嚴(yán)重威脅人民的生命與健康，在中國發(fā)病率為全球發(fā)病率的2.51 倍，死亡率為全球死亡率的2.54倍［2］。由于HCC 早期確診困難，病情發(fā)展迅速，晚期治療方法局限，因此特異性的HCC 生物標(biāo)志物和作用靶點(diǎn)對(duì)于HCC患者的早期診斷和靶向治療的開發(fā)具有重要意義。磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（glypican3，GPC3）是GPC 家族中的一個(gè)亞型，由硫酸乙酰肝素（heparan sulfate，HS）鏈和核心蛋白組成，在多種信號(hào)通路中發(fā)揮作用，調(diào)控腫瘤的增殖及轉(zhuǎn)移［3］。GPC3在HCC中高表達(dá)，而在正常組織中不表達(dá)，因此作為HCC的特異性檢測(cè)標(biāo)志物目前已進(jìn)入臨床應(yīng)用。本文結(jié)合GPC3 的結(jié)構(gòu)和在HCC 中的作用機(jī)制，對(duì)GPC3在肝癌診治中的應(yīng)用進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 GPC3的結(jié)構(gòu)功能及在HCC發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制

GPC3 是由位于X 染色體上的GPC3 基因編碼的一個(gè)70 kDa的蛋白，由核心蛋白、位于C端的兩條HS鏈以及與細(xì)胞膜連接的磷脂酰肌醇錨（glycosylphosphatidylinositol，GPI）錨組成。GPC3 基因突變和功能缺失的患者出現(xiàn)過度生長綜合征，表現(xiàn)為發(fā)育異常，而這種發(fā)育異常也可在GPC3 缺失的裸鼠上觀察到。這種GPC3 功能的缺失可導(dǎo)致Wnt 信號(hào)通路的改變［3］。

經(jīng)典的Wnt 信號(hào)通路由Wnt 通過G 蛋白偶聯(lián)受體Frizzled（FZD）和低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5/6（LRP5/6）兩個(gè)共受體結(jié)合產(chǎn)生，隨后誘導(dǎo)β-catenin在細(xì)胞質(zhì)中累積，并向細(xì)胞核移動(dòng)，進(jìn)而促進(jìn)細(xì)胞增殖相關(guān)基因的表達(dá)［4］。Wnt 信號(hào)通路的異常激活可以導(dǎo)致多種腫瘤的發(fā)生。GPC3 在HCC 細(xì)胞中通過增加細(xì)胞膜上的Wnt蛋白的表達(dá)，再與其受體FZD形成復(fù)合物從而激活經(jīng)典的Wnt信號(hào)通路。GPC3的核心蛋白和HS 鏈均可以和Wnt 相互作用，Li 等［5］通過建立GPC3結(jié)構(gòu)模型，發(fā)現(xiàn)GPC3核心蛋白上的F41及其周圍殘基可形成Wnt結(jié)合槽，該槽可與Wnt3a上的一個(gè)中間區(qū)域相互作用，在FZD 缺乏的情況下可以促進(jìn)Wnt 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。用抗體阻斷該區(qū)域可以抑制Wnt的激活。該研究揭示了GPC3作為Wnt共受體的精確機(jī)制。HS 鏈可以穩(wěn)定FZD 并促進(jìn)復(fù)合物的形成，GPC3與Wnt的相互作用表明GPC3可能通過Wnt信號(hào)通路調(diào)控HCC 的發(fā)生發(fā)展［3］。c-Myc 和Cyclin D1 是Wnt 信號(hào)通路的下游增殖相關(guān)基因，Cyclin D1可以通過促進(jìn)肝細(xì)胞增殖和腫瘤形成從而引起肝細(xì)胞癌變，c-Myc 調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長、增殖和分化［6］。Li等［7］證明c-Myc過表達(dá)可增加GPC3水平，相反GPC3水平的升高也會(huì)使c-Myc表達(dá)升高，從而形成正反饋信號(hào)回路。GPC3的過表達(dá)引起Wnt信號(hào)通路的異常激活，促進(jìn)c-Myc 和Cyclin D1 等增殖相關(guān)基因的表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)HCC的發(fā)生發(fā)展。

Hippo 信號(hào)通路可以調(diào)節(jié)器官大小和發(fā)育，YAP是Hippo信號(hào)通路中起關(guān)鍵作用的轉(zhuǎn)錄共激活因子，在調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、組織再生和腫瘤形成中起著至關(guān)重要的作用。研究發(fā)現(xiàn)，HCC 組織中的YAP 表達(dá)較正常組織高，而經(jīng)靶向GPC3的抗體HN3處理的HCC細(xì)胞中，YAP 總水平則降低并且阻斷Wnt 信號(hào)通路，提示W(wǎng)nt 可能參與了YAP 信號(hào)的上游調(diào)控［8］。該研究中的GPC3沉默降低了腫瘤細(xì)胞增殖速度，重新導(dǎo)入重組YAP 能夠阻止GPC3 沉默引起的細(xì)胞凋亡。這表明YAP 在HCC 發(fā)生過程中調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖，且GPC3 可能作為其上游調(diào)控因子將Wnt 和YAP 聯(lián)系起來，共同調(diào)控HCC細(xì)胞的增殖。

2 GPC3在HCC臨床中的作用

2.1 GPC3在HCC中的診斷價(jià)值

2.1.1 組織中GPC3 的表達(dá) 研究表明，55.7%～100.0%的HCC組織中GPC3 mRNA高表達(dá)［9-10］。而在蛋白水平上，70%～90%的HCC 組織中GPC3 表達(dá)為陽性［11-13］。Capurro 等［11］通過免疫組織化學(xué)法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，72%的HCC患者表達(dá)GPC3，但在健康肝臟組織或良性肝病組織中未檢測(cè)到GPC3 的表達(dá)。Wang 等［12］通過免疫組織化學(xué)法比較HCC組織與肝細(xì)胞腺瘤和局灶性結(jié)節(jié)增生組織中GPC3蛋白的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)在HCC 組織中GPC3 陽性率為75.7%，而在其他組織中則未檢測(cè)到。Zhang 等［13］研究則發(fā)現(xiàn)，在87.1%的HBV陽性HCC組織中GPC3表達(dá)，而在肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌組織中不表達(dá)。目前，GPC3 在臨床上已經(jīng)作為HCC 的高特異性診斷標(biāo)志物?？紤]到HCC 的異質(zhì)性，Enan等［14］將與GPC3聯(lián)合CD3作為免疫組織化學(xué)檢測(cè)的靶標(biāo)，研究其對(duì)HCC診斷的作用，結(jié)果顯示兩者聯(lián)合檢測(cè)的敏感性為82%、特異性為100%，提示GPC3聯(lián)合多靶標(biāo)檢測(cè)的有效性。

2.1.2 血清中GPC3的水平 由于GPC3可以從細(xì)胞表面釋放，血清中GPC3水平也被認(rèn)為是HCC的潛在標(biāo)志物。HCC 患者血清中GPC3 蛋白水平陽性率為36.1%～95.0%，而血清GPC3 mRNA 陽性率則為28%～100%［15］。Nault 等［16］研究發(fā)現(xiàn)，相比于早期HCC 患者，晚期HCC 患者血清GPC3 水平顯著增加。然而，血清中GPC3水平在早期HCC和非HCC患者之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

由于檢測(cè)方法、抗體等因素不同，GPC3在不同患者血清中的檢測(cè)水平存在較大的差異，但大多數(shù)研究以及多項(xiàng)Meta 分析的結(jié)果表明，HCC 患者血清GPC3水平上調(diào)且明顯高于健康對(duì)照組和肝硬化或慢性肝炎患者，如Pisit 等［17］檢測(cè)到HCC 患者血清中的GPC3 含量平均值為46.3 ng/mL，而健康對(duì)照組的血清中未檢測(cè)到GPC3，Yu等［18］則指出HCC患者血清中GPC3 含量為（108.7±230.0）ng/mL，正常組織中GPC3含量為（4.0±7.7）ng/mL，而肝硬化或慢性肝炎患者中則為（6.87±9.1）ng/mL，這表明血清GPC3水平具有診斷HCC 的潛力［19-20］?，F(xiàn)已有Meta 分析結(jié)果指出，同時(shí)選用兩種或三種特異性標(biāo)志物可以更加精確地診斷HCC，通過對(duì)比聯(lián)合檢測(cè)GPC3、GP73、AFP 和單獨(dú)檢測(cè)的敏感性、特異性、診斷比值比（diagnostic odds ratio，DOR），發(fā)現(xiàn)聯(lián)合檢測(cè)的敏感性、特異性和DOR分別為0.91、0.84和57.51，其中聯(lián)合檢測(cè)的敏感性和DOR 均大于單獨(dú)檢測(cè)，提示這三種特異性標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)比單獨(dú)檢測(cè)GPC3、GP73 和AFP 的診斷價(jià)值更高［21-22］。

2.2 免疫療法

2.2.1 GPC3 靶向抗體 GC33 是針對(duì)GPC3 C 端30 kDa 片段的單克隆抗體。在異位和原位GPC3 陽性的肝癌異種移植模型中，GC33 均能抑制腫瘤生長［23］。在臨床應(yīng)用中，Nakano 等［24］構(gòu)建了GC33，并證實(shí)其抗腫瘤效果主要是由于抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用、細(xì)胞外基質(zhì)的消失以及巨噬細(xì)胞的顯著增加。在美國和日本開展的Ⅰ期臨床試驗(yàn)中，對(duì)晚期HCC 患者進(jìn)行了GC33 的劑量遞增研究，20例患者分別進(jìn)行2.5、5、10和20 mg/kg劑量的GC33治療。常見不良事件包括疲勞（50%）、便秘（35%）、頭痛（35%）和低鈉血癥（35%），不良事件的發(fā)生率與劑量無關(guān)。GPC3 高表達(dá)組的中位進(jìn)展時(shí)間為26.0周，明顯大于低表達(dá)組（7.1周），在最高計(jì)劃劑量之前未檢測(cè)到劑量限制毒性。另有13例患者接受每周5、10 或20 mg/kg 的GC33靜脈注射，常見的不良事件是淋巴細(xì)胞減少（77%），NK 細(xì)胞減少（77%），C 反應(yīng)蛋白增加（69%），發(fā)熱（62%）。54%的患者出現(xiàn)3 級(jí)不良事件，其中超過2 例患者出現(xiàn)血壓升高（23%）、淋巴細(xì)胞減少（23%）和血小板減少（15%）。無4級(jí)或5級(jí)不良反應(yīng)，無不良反應(yīng)導(dǎo)致死亡或停用；13例患者中7例病情穩(wěn)定，6例病情進(jìn)展，3例病情長期穩(wěn)定在5 個(gè)月以上。說明GC33 具有良好的耐受性［25-26］。另一項(xiàng)雙盲Ⅱ期臨床試驗(yàn)則對(duì)185 例早期系統(tǒng)化療失敗的晚期HCC患者進(jìn)行GC33治療，治療組和安慰劑組之間的不良事件發(fā)生率相同。治療組與安慰劑組的中位無進(jìn)展生存期和總生存期分別為2.6 個(gè)月vs.1.5個(gè)月（HR=0.97，P=0.87），8.7個(gè)月vs.10個(gè)月（HR=0.96，P=0.82）。在之前接受過治療的患者中GC33并未表現(xiàn)出臨床療效，盡管有潛在的跡象表明，更大劑量的GC33作用于GPC3高表達(dá)的患者可能會(huì)改善預(yù)后［27］，但仍需進(jìn)一步的臨床研究來驗(yàn)證這一假設(shè)。

除了GC33 之外，有研究者還構(gòu)建了其他單克隆抗體。Phung 等［28］利用高通量流式細(xì)胞術(shù)鑒定了對(duì)GPC3 具有高結(jié)合親和力的小鼠單克隆抗體YP7，YP7 識(shí)別一個(gè)與人源GC33 結(jié)合位點(diǎn)重疊的GPC3 C端表位，在小鼠移植瘤實(shí)驗(yàn)中顯示出明顯的抗腫瘤作用。Gao 等［29］研究發(fā)現(xiàn)，HS20 抗體可以干擾GPC3與Wnt3a 的結(jié)合，抑制Wnt/β-catenin 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，且在接種HCC 細(xì)胞的裸鼠體內(nèi)表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗腫瘤活性。Miao 等［8］利用靶向GPC3 的抗體HN3 發(fā)現(xiàn)，通過影響YAP信號(hào)通路能有效抑制HCC細(xì)胞生長。

此外，Yu等［30］構(gòu)建了新型靶向GPC3/CD3的雙特異性抗體，在體外使T 細(xì)胞作用于GPC3 陽性腫瘤細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)雙特異性抗體可以顯著抑制腫瘤生長，提示靶向GPC3/CD3 的雙特異性抗體具有作為HCC 治療藥物的潛力，相關(guān)臨床研究有待進(jìn)一步開展。

2.2.2 肽疫苗 Komori 等［31］在HCC患者中鑒定了人白細(xì)胞抗原（HLA）-A24 限制性CTL 表位GPC3 298-306 肽和HLA-A2 限制性表位GPC3 144-152 肽。針對(duì)這些表位研發(fā)的肽疫苗的臨床前研究提示其具有快速的抗腫瘤作用［32］。一項(xiàng)非隨機(jī)Ⅰ期臨床試驗(yàn)報(bào)道了上述兩種多肽疫苗用于晚期HCC患者具有高耐受性，33 例晚期HCC 患者接受GPC3 肽疫苗接種，未見劑量限制毒性和劑量特異性不良事件，4例患者出現(xiàn)3級(jí)血液不良事件，這些事件與治療無關(guān)而與疾病進(jìn)展有關(guān)［33］。該研究中所有患者在注射部位出現(xiàn)1級(jí)或2級(jí)局部皮膚反應(yīng)，在大多數(shù)患者中觀察到短暫的免疫相關(guān)事件，包括藥物發(fā)熱、皮疹和潮紅，5例患者出現(xiàn)輕微瘙癢癥狀，30例患者可出現(xiàn)GPC3特異性CTL應(yīng)答。在Ⅱ期對(duì)照研究中，35例接受手術(shù)后接種疫苗的患者和33例單獨(dú)接受手術(shù)的患者的1、2年復(fù)發(fā)率分別為28.6%、54.3%和39.4%、54.5%。25 例接受手術(shù)和接種疫苗的患者的腫瘤呈GPC3陽性，與僅接受手術(shù)的21例GPC3陽性患者相比，該組的復(fù)發(fā)率明顯降低（1年和2年復(fù)發(fā)率分別為24%和48%、52.4%和61.9%）［34］。這一結(jié)果表明，GPC3 肽疫苗對(duì)于接受切除或射頻消融的HCC患者可能具有輔助治療的作用。

除上述兩種疫苗，還有5 個(gè)GPC3 衍生的長肽可以誘導(dǎo)HLA Ⅱ類限制性的Th1 細(xì)胞應(yīng)答，這些肽誘導(dǎo)的Th1 細(xì)胞應(yīng)答與總生存時(shí)間延長密切相關(guān)［35］。盡管還缺乏臨床試驗(yàn)，但這些肽對(duì)于改善以GPC3肽為基礎(chǔ)的HCC 免疫治療具有相當(dāng)廣闊的前景。此外，有報(bào)道顯示，阻斷程序性死亡受體-1/程序性死亡受體-配體1（PD-1/PD-L1）可通過增加疫苗誘導(dǎo)的CTLs 的免疫應(yīng)答來增強(qiáng)GPC3 衍生肽的抗腫瘤作用［36］。這為在臨床上使用GPC3 肽疫苗聯(lián)合其他藥物提供了理論基礎(chǔ)。

2.2.3 免疫毒素 免疫毒素是抗體片段與毒素片段融合產(chǎn)生的嵌合結(jié)構(gòu)，主要通過抗體誘導(dǎo)的細(xì)胞信號(hào)失活和毒素誘導(dǎo)的蛋白合成抑制兩種機(jī)制使腫瘤消退。

Gao 等［37］構(gòu)建了免疫毒素HN3-PE38 和YP7-PE38，結(jié)果顯示HN3-PE38 對(duì)小鼠HepG2 的抗腫瘤作用高于YP7-PE38。YP7-PE38 識(shí)別C 端表位而不抑制Wnt 信號(hào)通路，而HN3-PE38 與GPC3 的N 端和C 端結(jié)合，且其抗腫瘤細(xì)胞毒性涉及Wnt 誘導(dǎo)的βcatenin 信號(hào)通路和YAP 信號(hào)通路的抑制。然而，PE38誘導(dǎo)的脫靶效應(yīng)和中和抗體導(dǎo)致了劑量限制和抗腫瘤療效降低。二代片段mPE24顯示出較低的脫靶效應(yīng)和較強(qiáng)的腫瘤抑制作用。Wang 等［38］構(gòu)建了HN3-mPE24，研究其在HCC 移植瘤小鼠中的安全性和抗腫瘤效果發(fā)現(xiàn)，HN3-mPE24 具有更高的GPC3結(jié)合能力，可顯著誘導(dǎo)腫瘤消退，延長生存，并減少不良反應(yīng)。免疫原性以及血清的半衰期可能會(huì)限制免疫毒素在臨床的應(yīng)用，有研究發(fā)現(xiàn)新構(gòu)建的HN3-ABD-T20 在血清中的半衰期延長，提示其在HCC 中具有較高的療效［39］。雖然還需進(jìn)一步的臨床研究，但目前的數(shù)據(jù)表明，靶向GPC3的免疫毒素有望用于HCC治療。

2.2.4 細(xì)胞免疫療法 Jiang 等［40］通過體內(nèi)研究表明，抗GPC3 CAR-T治療對(duì)含有來自患者異種移植肝癌小鼠模型有效。目前，有11 個(gè)臨床試驗(yàn)正在研究以GPC3 為靶點(diǎn)CAR-T 治療肝癌。一項(xiàng)已完成的Ⅰ期試驗(yàn)（NCT02395250）首次報(bào)道了CAR-GPC3 T 細(xì)胞在HCC患者的早期抗腫瘤活性和該療法的初步安全性，共有13例患者接受CAR-GPC3-T治療，觀察到有13例發(fā)熱、12例淋巴細(xì)胞減少、9例細(xì)胞因子釋放綜合征（cytokine release syndrome，CRS），其中8例1/2級(jí)的CRS 是可逆的，1 例CRS 為5 級(jí)，無神經(jīng)毒性［41］。該研究中的3年、1年、6 個(gè)月的總生存率分別為10.5%、42.0%、50.3%，有2例部分緩解，1例病情穩(wěn)定的患者生存44.2個(gè)月，證實(shí)以GPC3為靶點(diǎn)的CAR-T用于治療HCC患者的可行性。

此外，有研究發(fā)現(xiàn)，誘導(dǎo)IL12 表達(dá)或者共表達(dá)IL15和IL21的GPC3-CAR-T細(xì)胞均可以增強(qiáng)抗腫瘤活性［42-43］。Guo等［44］通過CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)敲除CAR-T 細(xì)胞上的PD-1 基因的表達(dá)，結(jié)果顯示PD-1 缺陷的CAR-T 細(xì)胞在體外表現(xiàn)出更強(qiáng)的抗腫瘤活性，且PD-1的缺失可以阻止GPC3-CAR-T細(xì)胞的死亡，提示免疫檢查點(diǎn)基因的編輯可以增強(qiáng)CART 對(duì)HCC 的治療作用。有研究也發(fā)現(xiàn)通過共表達(dá)可溶性PD-1 蛋白阻斷PD-1/PD-L1 通路，增強(qiáng)了GPC3-CAR-T 細(xì)胞的抗腫瘤活性［45］。Wu 等［46］通過將索拉非尼與CAR-T 細(xì)胞結(jié)合作用于小鼠，發(fā)現(xiàn)索拉非尼可以促進(jìn)CAR-T細(xì)胞的抗腫瘤作用。上述小鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)顯示CAR-T聯(lián)合靶向或免疫方法能更有效地治療HCC。目前本院正在開展針對(duì)GPC3 陽性患者的GPC3-CAR-T 細(xì)胞聯(lián)合或不聯(lián)合靶向、免疫治療的臨床Ⅰ期研究（NCT03980288）。

限制CAR-T的臨床應(yīng)用的因素還包括對(duì)機(jī)體的不良反應(yīng)，如“細(xì)胞因子風(fēng)暴”導(dǎo)致組織器官的衰竭、脫靶效應(yīng)而對(duì)正常組織產(chǎn)生的損傷作用。Liu等［47］通過分裂CAR-T 細(xì)胞的結(jié)構(gòu)，觀察到不同的結(jié)構(gòu)可以減少相關(guān)促炎因子的釋放，增加其對(duì)腫瘤治療的安全性。此外，自然殺傷（natural killer，NK）細(xì)胞釋放的細(xì)胞因子比CAR-T細(xì)胞作用產(chǎn)生的“細(xì)胞因子風(fēng)暴”更安全，且CAR-NK 可以降低自身免疫反應(yīng)和腫瘤轉(zhuǎn)化的危險(xiǎn)［48］，針對(duì)CAR-NK 的研究正在開展。Yu等［49］通過第二代特異性靶向GPC3 的CAR 技術(shù)構(gòu)建NK-92/9.28.z 細(xì)胞系，在體外觀察到該細(xì)胞系對(duì)GPC3陽性的HCC細(xì)胞具有細(xì)胞毒性，同時(shí)該細(xì)胞系對(duì)高水平和低水平GPC3 的HCC 異種移植瘤具有較高的抗腫瘤活性，而對(duì)GPC3 陰性的HCC 則無活性，這表明以GPC3為靶點(diǎn)的CAR-NK是治療GPC3陽性HCC 的一種新選擇。Huang 等［50］研究認(rèn)為共刺激信號(hào)在CAR-NK 治療HCC 中是必需的，構(gòu)建含不同共刺激結(jié)構(gòu)域的抗GPC3-CAR 質(zhì)粒，從而生成不同的CAR-NK-92 細(xì)胞，通過觀察不同結(jié)構(gòu)域?qū)AR-NK細(xì)胞增殖的影響以及CAR-NK-92 對(duì)HCC 細(xì)胞的作用，發(fā)現(xiàn)使用DNAM1 和2B4 這兩個(gè)共刺激域構(gòu)建的CAR-NK-92 在體外能增強(qiáng)HCC 細(xì)胞活性。靶向GPC3的CAR-NK在HCC治療中具有較大的潛能，這一方面還需要進(jìn)一步的研究。

2.3 基因療法

針對(duì)GPC3 的基因治療包括miRNA、shRNA 和siRNA 等分子的應(yīng)用。靶向GPC3 的miRNA 在肝癌異種移植模型中顯示出抗腫瘤作用。本課題組前期研究表明，使用GPC3 shRNA可顯著抑制HCC細(xì)胞的增殖和侵襲［51］，誘導(dǎo)細(xì)胞周期停滯在G1 期以及細(xì)胞凋亡［52］。此外，利用siRNA 敲低GPC3 可以通過下調(diào)YAP基因抑制HCC細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并可通過上調(diào)TGF-β 抑制HCC 細(xì)胞生長［8，53-54］。為了克服siRNA 在臨床應(yīng)用中不能有效傳遞的缺陷，Wang等［55］構(gòu)建了一種在體外表現(xiàn)出抗腫瘤作用的納米載體（NP-siRNA-GPC3 Ab），細(xì)胞毒性小，能顯著抑制小鼠原位HCC異種移植瘤的生長。而關(guān)于這方面的應(yīng)用還需要更多的臨床研究。

3 結(jié)語

綜上所述，雖然GPC3在HCC發(fā)生中的作用機(jī)制尚未完全明確，但已知GPC3可以通過多個(gè)信號(hào)通路影響HCC 的發(fā)生發(fā)展。而目前關(guān)于GPC3 在HCC 臨床中作用的研究已經(jīng)有很大的進(jìn)展，由于GPC3 在HCC 中的高表達(dá)，可以作為診斷HCC 的特異性標(biāo)志物，通過結(jié)合其他標(biāo)志物可以提高準(zhǔn)確性。靶向GPC3的免疫治療以及基因治療均表現(xiàn)出較好的發(fā)展前景，這些正在進(jìn)行的研究將有助于確定GPC3作為HCC 治療靶點(diǎn)的作用。將GPC3 靶點(diǎn)與其他治療手段相結(jié)合，如深入研究靶向GPC3-CAR-T 與其他現(xiàn)有治療方法的結(jié)合，改善已有治療手段的不足，將成為HCC治療的重要研究方向。