曾林峰,宋國壽,彭小琴,黃 薇,黃海玲,李建喜
(1.江西省南昌市南昌動物園管理處,江西 南昌 330025;2.江西省家畜血吸蟲病防治站,江西 南昌 330023)
羊駝又稱駝羊,原產(chǎn)于南美洲西部和南部的草原和高原上,主要分布在秘魯、智利等國,屬駱駝科。2018年2月5日本園5只羊駝發(fā)生腸道產(chǎn)氣莢膜梭菌感染,其中3只急性死亡,2只經(jīng)治療后痊愈。報告如下。
該群5只羊駝為本園于2011年從外省引進,日常以青菜、胡蘿卜、苜蓿草和自制窩頭為食,身體健康。2018年2月5日早晨發(fā)現(xiàn)3只羊駝突然生病,可見口水直流,精神萎靡,趴臥在地,無食欲。經(jīng)治療無效,于當日晚上死亡。剖檢發(fā)現(xiàn)腸道淤血,并有出血點。其他臟器無肉眼可見變化。2 d后,其余2只羊駝發(fā)病,經(jīng)治療后痊愈。
后發(fā)病的2只羊駝主要表現(xiàn)為精神差,無食欲,腹瀉,里急后重。早期腹瀉物為無色胨狀物,后期出現(xiàn)紅白相間的胨狀物,甚至血便。飲水少,小便少,毛發(fā)枯燥。治療好轉(zhuǎn)后未見腹瀉,精神好轉(zhuǎn),少量進食。好轉(zhuǎn)2 d后排出正常顆粒狀大便,精神食欲完全正常。
3.1 材料 無菌采集病死羊駝的腸道、心、肝、腎等病料。
3.2 試驗方法
3.2.1 細菌形態(tài)學檢查 無菌采集病料進行涂片和觸片,進行革蘭染色并鏡檢。
3.2.2 細菌的分離培養(yǎng) 將無菌病料分別接種在肝片肉湯和葡萄糖血瓊脂平板上,在厭氧環(huán)境下,置于37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)8~24 h,觀察細菌培養(yǎng)特性。取培養(yǎng)物鏡檢,觀察細菌形態(tài)。
3.2.3 細菌純化培養(yǎng) 挑取葡萄糖血瓊脂平板上的典型菌落,接種于綿羊血瓊脂平板上37 ℃培養(yǎng)8~12 h。
3.2.4 生化試驗 將綿羊血瓊脂平板上細菌分別接種于葡萄糖、乳糖、麥芽糖、甘露醇、蔗糖、果糖、淀粉發(fā)酵管及牛乳培養(yǎng)基,37 ℃培養(yǎng)8~12 h后觀察。
3.2.5 腸毒素檢查 取腸道內(nèi)容物50 mL,加4倍生理鹽水稀釋,搖勻后,3 000 r/min離心10 min,取上清液進行小鼠腹腔接種(0.5 mL/只),觀察其發(fā)病、死亡情況,以判斷是否有腸毒素的存在。對照組小鼠注射生理鹽水0.5 mL/只。
4.1 細菌形態(tài)學檢查 經(jīng)100倍油鏡檢查,涂片可見兩端鈍圓,革蘭陽性桿菌,有夾膜,單個存在或排成鏈狀。
4.2 細菌分離培養(yǎng)特性 肝片肉湯培養(yǎng)基經(jīng)37 ℃培養(yǎng)8 h后,肝片肉湯渾濁,有氣泡產(chǎn)生;培養(yǎng)24 h,管底形成白色沉淀物。葡萄糖血瓊脂平板經(jīng)37 ℃培養(yǎng)8 h,生長出灰白色、光滑、扁平、半透明、邊緣整齊的菌落,菌落周圍呈現(xiàn)雙溶血環(huán),內(nèi)環(huán)為完全溶血,外環(huán)為不完全溶血。涂片鏡檢為革蘭陽性桿菌,與病料涂片上的細菌形態(tài)一致。
4.3 生化試驗 能發(fā)酵葡萄糖、乳糖、麥芽糖、蔗糖和果糖,產(chǎn)酸產(chǎn)氣,不分解甘露醇和淀粉。在牛乳培養(yǎng)基上產(chǎn)生洶涌發(fā)酵現(xiàn)象。上述生化反應結果符合產(chǎn)氣夾膜梭菌的生化特征。
4.4 腸毒素檢查 注射腸內(nèi)容物上清液的小鼠于接種10 h后死亡,對照組存活。說明病死羊駝腸內(nèi)存在腸毒素。
根據(jù)臨床癥狀、剖檢結果和實驗室檢驗,診斷該疾病為產(chǎn)氣莢膜梭菌引起的羊駝腸毒血癥。
痊愈的2只羊駝每只體重約50 kg,由于靜脈注射操作困難,僅每日肌內(nèi)注射頭孢曲松鈉2 g/只。連續(xù)治療2周后痊愈。