呂曉亮 田宇明 張曉放 呂菲

摘 要：松材線蟲病發(fā)生后，松材線蟲各齡蟲體在感病樹體內(nèi)不斷運動、繁殖、擴散的過程伴隨著樹勢衰弱直至死亡，研究感病樹體內(nèi)松材線蟲的分布規(guī)律，對于分析掌握松材線蟲病的為害過程，提高疫病防控效率具有重要的參考價值。

關(guān)鍵詞：大連;松材線蟲;感病樹體;分布規(guī)律

一、研究背景

2016年10月，大連市沙河口區(qū)大頂山發(fā)現(xiàn)松材線蟲病危害情況，該疫情在遼寧省屬于首次發(fā)生，大連自此成為我國發(fā)生松材線蟲病的最北區(qū)域。松材線蟲病的易感染樹種黑松、赤松都是我市主要森林樹種，疫情的發(fā)生嚴重威脅我市森林安全。鑒于松材線蟲病的嚴重危害性，該疫情引起遼寧省政府和大連市政府的高度重視，立即組織各相關(guān)部門開展松材線蟲病防治工作。2017年6月大連市財政局下發(fā)文件，《大連地區(qū)松材線蟲病發(fā)病規(guī)律及防治措施研究》正式立項。自此，項目組依托南京林業(yè)大學、東北林業(yè)大學相關(guān)研究的技術(shù)支撐，同時從松材線蟲的形態(tài)學鑒定、分子檢測、感病樹體線蟲分布、媒介昆蟲等多個方向開展研究，探索符合本地實際疫情規(guī)律的松材線蟲病防治措施。

二、研究方法

從我市松材線蟲病典型感病林分中，選取感病樣木;將樣木伐倒，自樹干部分等距截取圓盤，自樹冠部分四個方向側(cè)枝截取木段;將圓盤和木段制成木屑樣本，再經(jīng)貝爾曼漏斗法獲取含有線蟲的水樣;在解剖鏡下查數(shù)定量水樣中線蟲數(shù)量，通過換算得到標準木橫向、縱向等各部位線蟲分布數(shù)量，據(jù)此分析總結(jié)分布規(guī)律。

1.外業(yè)調(diào)查

從中山區(qū)和沙河口區(qū)四處典型感病林分中，選取隔年枯死木、當年發(fā)病初期枯死木和當年發(fā)病晚期枯死木三種類型黑松疫木標準木共計11株，共截取樹干圓盤91個、側(cè)枝及枝梢木段143個，共制得木屑樣本900個。

（1）將感病黑松樣木伐倒，按立木朝向在樹皮上標注南北方向，將伐倒木編號;自地面伐根0m處至樹梢，按2m長度等距截取圓盤，圓盤厚度2cm左右;伐根處圓盤編為0號，伐根向樹梢方向圓盤依次編號，并在截取的圓盤上標記東南西北方向。

（2）截至上部樹冠部分主干較細處，取東南西北四個方向側(cè)枝，每個方向側(cè)枝取基部、中部、梢部三段，在每段上分別標注朝向和部位。

2.內(nèi)業(yè)檢測

用外業(yè)所采圓盤和木段等樣本，制取木屑樣品，按照貝爾曼漏斗法進行分離，獲得含線蟲的水樣，用于鏡檢計數(shù)。

（1）木屑樣本制?。涸谥睆酱笥?0cm的圓盤上取圓心及東南西北四個方向內(nèi)外共9個樣品，小于10cm的圓盤上取圓心及東西南本四個方向共5個樣品，側(cè)枝每個木段制取1個樣品。將所取樣品剪碎成木屑狀，每份木屑樣品統(tǒng)一保留8g。

（2）線蟲水樣制?。喊凑肇悹柭┒贩ㄒ蟛僮?，每份8g木屑樣品均用80ml純水浸泡，靜置6～24小時后，留取漏斗下方2ml指形管中線蟲提取液，即得8g木屑所含線蟲的溶液2ml。

（3）樣本鏡檢計數(shù)：將線蟲水樣搖勻，從上、中、下部位分別移取20μl，在解剖鏡下檢視計數(shù);將三次樣品所得線蟲數(shù)取平均值，作為20μl溶液中的線蟲數(shù)量，再據(jù)此換算出2ml最初樣品溶液中線蟲的總數(shù)量。

三、研究結(jié)論

1.研究結(jié)果

（1）所調(diào)查的11株樣木中各部位松材線蟲的數(shù)量顯示：橫向數(shù)量心材部分線蟲分布最少，中材部分線蟲分布最多，邊材部分居中;縱向數(shù)量樹冠上部及側(cè)枝上線蟲分布最多。具體數(shù)據(jù)見圖表1。

（2）在樹干內(nèi)各方向的松材線蟲數(shù)量分布以南面最多，北面最少。南>東>西>北。具體數(shù)據(jù)見圖表2。

2.結(jié)論分析

（1）松材線蟲在各樣木高度上的數(shù)量分布，從地徑到樹梢方向數(shù)量是由低到高分布。在樹木發(fā)病初期，在針葉變色剛開始褪綠時，樹體內(nèi)松材線蟲含量不多，在針葉開始發(fā)黃后，松材線蟲量大量存在。在感病初期是不均勻分布，樹體內(nèi)松材線蟲數(shù)量很少，隨著樹木枯死時間加長，松材線蟲在樹體內(nèi)的數(shù)量急驟增多，分布也變得均勻。

（2）人工接種試驗中，在2018年6月13日接種后，在10株接種樹的胸徑樹高處，松材線蟲數(shù)量的動態(tài)變化過程，可以看出在接種后的前4～5周，胸高處才有松材線蟲出現(xiàn)，說明在松樹感染松材線蟲后的5周后，才能檢測出松材線蟲。在接種后的第8～11周，胸高處的松材線蟲含量達到高峰值，接種后的第12周后，胸高處松材線蟲含量急驟減少，開始向樹冠方向遷移。見圖表3。

（3）圖表4和圖表5為林中8月完全枯死的標準木，對這兩株樹體各高度和部位的松材線蟲含量測量及分析，可以看出這個時期松材線蟲是向樹方向遷移的，這應(yīng)該是松材線蟲本身的生物學特性所決定的，這與媒介昆蟲松墨天牛的取食及產(chǎn)卵習性相關(guān)，松墨天年喜歡在樹冠上部取食，并多在上部產(chǎn)卵繁殖。

（4）在取樣時，還分別取了樹皮、活針葉、枯針葉、果、枝條頂芽、側(cè)枝、一年生細活枝、一年生細枯枝等，除樹皮和針葉外，其它各部分樣品均檢測出松材線蟲。

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