邵曙光 孫海霞 馮柳芳
隱匿性HBV感染(OBI)指乙型肝炎e抗原(HBeAg)陰性或核心抗體(抗-HBc)陽(yáng)性,血清或肝組織中可檢測(cè)到HBV DNA[1-3]。既往研究中多關(guān)注HBVS、BCP區(qū)的變異,對(duì)HBV C區(qū)變異關(guān)注較少。因此,本次研究對(duì)我院收治的80例OBI患者的臨床資料進(jìn)行回顧性分析,觀察患者HBV C區(qū)變異情況,旨在探討OBI患者HBV C區(qū)變異的臨床意義,現(xiàn)報(bào)道如下。
一、一般資料
回顧性分析我院2017年3月—2019年3月收治的80例OBI患者的臨床資料,其中男44例,女36例;年齡40~57歲,平均(47.25±7.06)歲;身體質(zhì)量指數(shù)(BMI):20~24 kg/m2,平均(22.13±1.68)kg/m2。本次研究通過(guò)我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)后開展。
二、納入與排除標(biāo)準(zhǔn)
(一)納入標(biāo)準(zhǔn):①均于我院確診為OBI;②18~65歲;③各項(xiàng)臨床資料完整。
(二)排除標(biāo)準(zhǔn):①伴有丙肝、丁肝或失代償肝硬化患者;②伴有嚴(yán)重心腦血管疾病或惡性腫瘤;③入院前存在嚴(yán)重感染或免疫疾病;④特殊人群,精神病或認(rèn)知障礙者。
三、方法
(一)實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)檢查:80例OBI患者入院后(治療前)2~3 d抽取清晨空腹靜脈血7 mL,離心后檢測(cè)HBeAg、HBV DNA、抗-HBc及HBV C區(qū)變異。其中HBeAg使用ELISA法檢測(cè),試劑盒來(lái)自上??迫A生物工程股份有限公司,若S/N<2.1判定為陰性(-),若S/N>2.1判定為陽(yáng)性(+);HBV DNA以核酸擴(kuò)增熒光定量檢測(cè);抗-HBc檢測(cè)方法為雙抗原夾心法,檢測(cè)儀器為全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及試劑盒均由美國(guó)雅培公司提供,經(jīng)ELISA法復(fù)檢后結(jié)果與初檢結(jié)果均為陽(yáng)性則判定抗-HBc為陽(yáng)性(+);HBV C區(qū)變異使用熒光PCR法檢測(cè),當(dāng)混合液A Ct值≤38、混合液B為陰性,則判定為HBV C區(qū)變異,當(dāng)Ct值為38~40,則重復(fù)檢測(cè),Ct值仍為38~40則判定為陰性。
(二)觀察指標(biāo):①分析HBeAg(+)與HBeAg(-)患者HBV C區(qū)變異情況;②分析不同HBV DNA含量HBeAg(-)患者HBV C區(qū)變異情況;③分析HBeAg(-)HBV C區(qū)變異患者抗-HBc(+)分布情況。
四、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
一、HBeAg(+)與HBeAg(-)患者HBV C區(qū)變異情況分析
80例OBI患者中HBeAg(+)55.00%(44/80),HBeAg(-)45.00%(36/80);其中HBeAg(-)組HBV C區(qū)變異率75.00%(27/36)顯著高于HBeAg(+)組34.09%(15/44),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=13.288,P=0.003)。
二、不同HBV DNA含量HBeAg(-)患者HBV C區(qū)變異情況分析
不同HBV DNA含量HBeAg(-)患者HBV C區(qū)變異率分別為100.00%、78.95%、16.67%,各組間對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=14.714,P=0.001)。見表1。
三、HBeAg(-)HBV C區(qū)變異患者抗-HBc(+)分布情況
27例HBeAg(-)HBV C區(qū)變異患者抗-HBc(+)率81.48%。
乙型肝炎病毒是現(xiàn)階段臨床發(fā)現(xiàn)的最小的一種DNA病毒,病毒復(fù)制時(shí)通過(guò)RNA中間體進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄復(fù)制,若逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程中缺乏校對(duì)酶則容易出現(xiàn)HBV DNA變異,出現(xiàn)變異后會(huì)導(dǎo)致HBV的標(biāo)志物出現(xiàn)免疫逃逸及致病性改變,大大的增加了診療工作的難度[4-5]。1896位點(diǎn)是HBV C區(qū)變異的常見位點(diǎn),是因G-A突變導(dǎo)致的氨基酸變異,即由TGG變異為TAG,此時(shí)C蛋白的翻譯受到影響出現(xiàn)終止,HBeAg轉(zhuǎn)陰[6]。
本次研究結(jié)果顯示,HBeAg(-)組HBV C區(qū)變異率顯著高于HBeAg(+)組,且不同HBV-DNA含量HBeAg(-)患者HBV C區(qū)變異以HBV DNA>107拷貝/mL為主,變異率為100.00%,可見OBI患者HBV C區(qū)變異與疾病的進(jìn)展及預(yù)后息息相關(guān)。劉鐵梅等[7]研究指出高含量HBV DNA患者出現(xiàn)HBV C區(qū)變異的幾率較高,與本次研究結(jié)果基本相符。同時(shí)肖曉光等[8]研究HBV C區(qū)變異的臨床意義時(shí)指出HBV C區(qū)變異會(huì)抑制病毒編碼eAg的能力,導(dǎo)致HBeAg消失,HBV出現(xiàn)免疫逃逸,HBV DNA呈現(xiàn)出高表達(dá),認(rèn)為HBV出現(xiàn)免疫逃逸與疾病慢性化及疾病進(jìn)展密切相關(guān),與本次研究結(jié)果一致。
同時(shí)本次研究還對(duì)HBeAg(-)HBV C區(qū)變異患者抗-HBc(+)分布情況進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)27例HBeAg(-)HBV C區(qū)變異患者抗-HBc(+)率81.48%,可見OBI且HBV C區(qū)變異患者多存在抗-HBc(+)。另外本次研究仍存在不足,如樣本量較少、缺乏HBV C區(qū)變異患者的治療效果觀察,因此在后期研究中仍需擴(kuò)大樣本量,觀察HBV C區(qū)變異患者的臨床治療效果,為OBI患者的診療工作提供充實(shí)、可靠的依據(jù)。