Y染色體長(zhǎng)臂異染色質(zhì)區(qū)延長(zhǎng)對(duì)輔助生殖妊娠結(jié)局和新生兒健康情況的影響

范麗娟，薛冰，程燕，朱愛(ài)珍*

(1.西北婦女兒童醫(yī)院輔助生殖中心，西安 710003；2.運(yùn)城市中心醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)科，運(yùn)城 044000)

Y染色體是人類最小的染色體，其在男性性別分化和精子發(fā)生中起重要作用[1-2]。Y染色體長(zhǎng)臂大部分由異染色質(zhì)組成，容易發(fā)生長(zhǎng)度變異[3]。Y染色體長(zhǎng)臂末端的異染色質(zhì)區(qū)延長(zhǎng)(Yqh+)是臨床較常見(jiàn)的男性染色體結(jié)構(gòu)變異，長(zhǎng)期以來(lái)被認(rèn)為是一種正常的多態(tài)現(xiàn)象，沒(méi)有任何的功能和表型[4-5]。然而，也有研究報(bào)道Yqh+在不育男性中的發(fā)生率約為6.8%，顯著高于生育力正常男性(發(fā)生率3.74%)[6]；Yqh+不育男性接受體外受精/卵胞漿內(nèi)單精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)助孕治療后受精率、著床率和臨床妊娠率較染色體正常不育男性更低[7-8]。目前尚無(wú)Yqh+患者子代健康情況的報(bào)道。因此，我們進(jìn)行了一項(xiàng)單中心回顧性研究，探討男性染色體Yqh+對(duì)IVF/ICSI-ET妊娠結(jié)局和新生兒健康情況的影響。

資料與方法

一、研究對(duì)象

收集2014年1月至2017年12月就診于西北婦女兒童醫(yī)院輔助生殖中心，接受IVF/ICSI-ET助孕治療的患者為研究對(duì)象。按照嚴(yán)格的納入標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn)，共納入1 705對(duì)夫妻。

納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)所有周期均為第1次治療周期，女方促排卵方案為GnRH-a降調(diào)節(jié)方案或拮抗劑方案；(2)夫妻雙方均進(jìn)行染色體核型檢測(cè)，排除夫妻雙方合并其它性染色體或常染色體異常病例；(3)所有患者在進(jìn)行助孕治療前均經(jīng)過(guò)體格檢查、內(nèi)分泌相關(guān)檢查、遺傳學(xué)檢查，男方至少進(jìn)行兩次精液分析。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并存在嚴(yán)重的生殖系統(tǒng)疾病及異常者，如男方存在重度精索靜脈曲張、隱睪癥，女方存在嚴(yán)重的子宮內(nèi)膜異位癥等；(2)男方重度少精子癥(精子計(jì)數(shù)<5×106活動(dòng)精子/ml)和無(wú)精子癥患者均行Y染色體微缺失檢查，具有Y染色體微缺失的男性；(3)供精治療周期以及采用微刺激促排卵、黃體期促排卵和高孕激素狀態(tài)下促排卵的周期。

根據(jù)人類染色體方法學(xué)進(jìn)行染色體核型檢測(cè)，將最終入組病例分為Yqh+組(男方檢測(cè)到Y(jié)qh+，67例)和對(duì)照組(男方未檢測(cè)到Y(jié)qh+，1 638例)；又根據(jù)受精方式不同，分別比較IVF助孕周期和ICSI助孕周期中Yqh+組和對(duì)照組患者的一般情況、妊娠結(jié)局及新生兒出生情況。

二、研究方法

1.IVF/ICSI-ET：促排卵方案為GnRH-a降調(diào)節(jié)方案和拮抗劑方案。當(dāng)2/3以上優(yōu)勢(shì)卵泡直徑發(fā)育至17 mm時(shí)用重組HCG(默克雪蘭諾，意大利)或人源HCG(珠海麗珠醫(yī)藥)扳機(jī)。34～36 h后，在陰道B超引導(dǎo)下經(jīng)陰道穿刺負(fù)壓抽吸取卵術(shù)，記錄獲卵數(shù)。女方取卵當(dāng)日，男方取精，根據(jù)不同精液參數(shù)標(biāo)準(zhǔn)，選擇IVF或ICSI人工授精。根據(jù)女方年齡、身體條件、獲卵數(shù)、性激素水平、子宮內(nèi)膜厚度和胚胎級(jí)別等因素決定在取卵后第3天(或第5天)進(jìn)行胚胎(或囊胚)移植。黃體支持方案為取卵日開(kāi)始每日肌肉注射黃體酮(浙江仙琚)60 mg，同時(shí)每日口服地屈孕酮(雅培，美國(guó))20 mg。胚胎移植后第14天(或囊胚移植后第12天)測(cè)血HCG。胚胎移植后第28天(或囊胚移植后第26天)行盆腔超聲檢測(cè)，B超下見(jiàn)孕囊即為臨床妊娠。孕11周停止黃體支持。

2.授精方式選擇：按照世界衛(wèi)生組織(WHO)《人類精液實(shí)驗(yàn)室檢查及處理》第5版標(biāo)準(zhǔn)，根據(jù)患者的精液分析結(jié)果選擇不同的助孕方法：當(dāng)前向運(yùn)動(dòng)精子(即a+b級(jí))計(jì)數(shù)>5×106個(gè)/ml時(shí)納入IVF治療周期；當(dāng)前向運(yùn)動(dòng)精子計(jì)數(shù)<5×106個(gè)/ml時(shí)納入ICSI治療周期。

3.染色體核型檢測(cè)：抽取外周血淋巴細(xì)胞培養(yǎng)后行標(biāo)準(zhǔn)G顯帶分析染色體核型。計(jì)數(shù)20個(gè)細(xì)胞中期分裂相，分析5個(gè)核型，異常者加倍計(jì)數(shù)、分析。按照《人類細(xì)胞遺傳學(xué)國(guó)際命名制(ISCN，2009)》進(jìn)行核型描述及診斷，以Y染色體長(zhǎng)臂異染色質(zhì)區(qū)長(zhǎng)度增加定義為Yqh+。

4.隨訪：隨訪期限為嬰兒出生后1年。

三、觀察指標(biāo)及計(jì)算方法

主要觀察指標(biāo)包括妊娠率、活產(chǎn)率和新生兒出生健康情況；次要觀察指標(biāo)包括正常受精率、卵裂率、胚胎種植率、HCG陽(yáng)性率、異位妊娠率、流產(chǎn)率、持續(xù)妊娠率和新生兒Apgar評(píng)分、新生兒性別比例等[9]。

其中HCG陽(yáng)性率=HCG陽(yáng)性周期數(shù)/移植周期數(shù)×100%；IVF正常受精率=第1天(D1)出現(xiàn)2PN卵子數(shù)/IVF加精卵子總數(shù)×100%；ICSI正常受精率=D1出現(xiàn)2PN卵子數(shù)/注射MⅡ卵子總數(shù)×100%；卵裂率=卵裂胚胎數(shù)/受精卵子數(shù)×100%；胚胎種植率=種植胚胎數(shù)/移植胚胎數(shù)×100%；臨床妊娠率=臨床妊娠周期數(shù)/移植周期數(shù)×100%；持續(xù)妊娠率=妊娠持續(xù)到20周以后周期數(shù)/臨床妊娠周期數(shù)×100%；活產(chǎn)率=活產(chǎn)周期數(shù)/新鮮移植周期數(shù)×100%；流產(chǎn)率=流產(chǎn)周期數(shù)/臨床妊娠周期數(shù)×100%；異位妊娠率=異位妊娠周期數(shù)/臨床妊娠周期數(shù)×100%；出生缺陷率=出生缺陷嬰兒數(shù)/活產(chǎn)嬰兒數(shù)×100%。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS 13.0軟件進(jìn)行。計(jì)量資料比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料比較采用卡方檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

一、納入患者的整體情況

在本研究納入的1 705對(duì)夫妻中，男方Y(jié)qh+共67例(Yqh+組)，對(duì)照組1 638例。Yqh+組中有36例患者(53.73%)依據(jù)個(gè)人精液分析結(jié)果選擇IVF治療周期，31例(46.27%)選擇ICSI治療周期；對(duì)照組中877例患者(53.54%)選擇IVF周期，761例(46.46%)選擇ICSI周期。

二、IVF治療周期中Yqh+組和對(duì)照組的妊娠結(jié)局及新生兒出生情況比較

1.一般資料比較：IVF治療周期中Yqh+組和對(duì)照組間的男方年齡、女方年齡、體重指數(shù)(BMI)、基礎(chǔ)FSH和LH水平比較無(wú)顯著性差異(P>0.05)。IVF治療周期中兩組間扳機(jī)日血清E2水平和獲卵數(shù)比較無(wú)顯著性差異(P>0.05)。Yqh+組和對(duì)照組的正常受精率[(59.43±16.84)% vs.(56.74±19.33)%]、卵裂率[(81.49±14.69)% vs.(81.73±2.63)%]比較亦無(wú)顯著性差異(P>0.05)(表1)。

表1 IVF治療周期中Yqh+組與對(duì)照組一般情況比較[(-±s)，n(%)]

2.新鮮周期妊娠結(jié)局比較：IVF治療周期中分別有17例Yqh+組患者和502例對(duì)照組患者行新鮮周期移植。兩組患者新鮮周期移植前子宮內(nèi)膜厚度和血清孕酮(P)水平比較無(wú)顯著性差異(P>0.05)。Yqh+組的HCG陽(yáng)性率(52.94% vs. 63.94%)、胚胎種植率(43.48% vs. 47.90%)、臨床妊娠率(52.94% vs. 60.96%)、持續(xù)妊娠率(88.89% vs. 94.12%)均略低于對(duì)照組，但無(wú)顯著性差異(P>0.05)；Yqh+組流產(chǎn)率有高于對(duì)照組的趨勢(shì)(11.11% vs. 5.23%)，但無(wú)顯著性差異(P>0.05)；Yqh+組的異位妊娠率顯著高于對(duì)照組(11.11% vs. 1.63%)(P=0.04)。Yqh+組活產(chǎn)率略低于對(duì)照組(41.18% vs. 54.18%)，但無(wú)顯著性差異(P>0.05)(表2)。

表2 IVF治療Yqh+組與對(duì)照組新鮮周期妊娠結(jié)局比較[(-±s)，%]

注：與對(duì)照組比較，*P<0.05

3.新生兒出生情況比較：IVF治療周期中Yqh+組共出生7例新生兒，對(duì)照組出生338例新生兒。兩組患者新生兒Apgar評(píng)分和出生缺陷率比較無(wú)顯著性差異(P>0.05)；Yqh+組的男嬰出生率略高于對(duì)照組(85.71% vs. 51.78%)，但無(wú)顯著性差異(P>0.05)(表3)。

表3 IVF治療周期Yqh+組與對(duì)照組新生兒出生情況比較[(-±s)，%]

三、ICSI治療周期中兩組妊娠結(jié)局和新生兒出生情況比較

1.一般資料比較：ICSI治療周期中Yqh+組和對(duì)照組間的男方年齡、女方年齡、BMI、基礎(chǔ)FSH和LH水平比較均無(wú)顯著性差異(P>0.05)。ICSI治療周期中兩組患者扳機(jī)日血清E2水平、獲卵數(shù)、正常受精率和卵裂率比較均無(wú)顯著性差異(P>0.05)(表4)。

2.新鮮周期妊娠結(jié)局比較：ICSI治療周期中分別有19例Yqh+組患者和460例對(duì)照組患者行新鮮周期移植。兩組患者新鮮周期移植前內(nèi)膜厚度和血清P水平比較無(wú)顯著性差異(P>0.05)；與對(duì)照組比較，Yqh+組的HCG陽(yáng)性率、胚胎種植率、臨床妊娠率、持續(xù)妊娠率、流產(chǎn)率、異位妊娠率、活產(chǎn)率均無(wú)顯著性差異(P>0.05)(表5)。

表4 ICSI治療周期Yqh+組與對(duì)照組一般情況比較[(-±s)，n(%)]

表5 ICSI治療周期Yqh+組與對(duì)照組妊娠結(jié)局比較[(-±s)，%]

3.新生兒出生情況比較：ICSI治療周期中Yqh+組共出生15例新生兒，對(duì)照組出生329例新生兒。兩組患者新生兒Apgar評(píng)分和出生缺陷率比較無(wú)顯著性差異(P>0.05)；Yqh+組男嬰出生率略高于對(duì)照組(66.67% vs. 52.58%)，但尚無(wú)顯著性差異(P>0.05)(表6)。

表6 ICSI治療周期Yqh+組與對(duì)照組新生兒出生情況比較[(-±s)，%]

討 論

Yqh+的臨床意義一直存在爭(zhēng)議。1987年Hsu等[10]首先報(bào)道了Yqh+是一種正常的染色體多態(tài)性，因?yàn)楫惾旧|(zhì)區(qū)不能編碼蛋白[11-12]。但近年來(lái)越來(lái)越多研究發(fā)現(xiàn)男性染色體Yqh+可能與生育力下降有關(guān)[13-15]。2015年Li等[15]發(fā)現(xiàn)Yqh+男性無(wú)精子癥和少精子癥發(fā)病率高于非Yqh+男性。Xiao等[8]發(fā)現(xiàn)Yqh+者行IVF-ET助孕治療其受精率、著床率、臨床妊娠率顯著低于非Yqh+者。活產(chǎn)率和新生兒健康情況也是IVF助孕治療最關(guān)鍵的質(zhì)控指標(biāo)，但目前尚無(wú)Yqh+對(duì)IVF/ICSI-ET活產(chǎn)率和新生兒健康情況影響的研究。

本研究回顧性分析Yqh+組和對(duì)照組IVF/ICSI-ET助孕治療新鮮周期的妊娠結(jié)局和新生兒健康情況。在前述觀察指標(biāo)中，Yqh+組和對(duì)照組的HCG陽(yáng)性率、臨床妊娠率、活產(chǎn)率和新生兒出生健康情況等觀察指標(biāo)比較均無(wú)顯著性差異(P>0.05)；僅在IVF治療周期中，Yqh+組異位妊娠率顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，但這可能與納入樣本例數(shù)較少有關(guān)，尚需后續(xù)研究進(jìn)一步研究探討。

值得注意的是，在IVF治療周期中，Yqh+組HCG陽(yáng)性率、種植率、臨床妊娠率、持續(xù)妊娠率和活產(chǎn)率均略低于對(duì)照組。而在ICSI治療周期中，這種現(xiàn)象并未出現(xiàn)。這與Xiao等[8]的研究結(jié)果相似。Xiao等[8]曾報(bào)道在IVF治療周期中，Yqh+者種植率和臨床妊娠率均顯著低于非Yqh+者，而在ICSI治療周期中，Yqh+者種植率和臨床妊娠率與非Yqh+者比較無(wú)顯著性差異。因此Xiao等[8]認(rèn)為Yqh+可能對(duì)男性生育能力有一定的影響；對(duì)于IVF治療結(jié)局不良的Yqh+不育者，采用ICSI方式人工授精可能會(huì)改善其助孕治療結(jié)局。

本研究結(jié)果顯示，在IVF治療周期和ICSI治療周期中，Yqh+組與對(duì)照組的新生兒出生健康情況比較無(wú)顯著性差異。本研究首次報(bào)道了Yqh+者的子代健康情況，結(jié)果顯示Yqh+可能對(duì)子代健康狀況無(wú)明顯影響。

綜上所述，Yqh+可能對(duì)IVF/ICSI-ET妊娠結(jié)局和新生兒健康情況無(wú)明顯影響。Yqh+是否增加IVF新鮮移植周期中異位妊娠的風(fēng)險(xiǎn)，尚需要更大樣本量和更具特異性的研究加以探討和驗(yàn)證。