彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤患者Ki-67蛋白表達(dá)檢測(cè)的預(yù)后意義

馬禮勇

【摘要】 目的：研究彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤（DLBCL）患者Ki-67蛋白表達(dá)檢測(cè)的預(yù)后意義。方法：選取筆者所在醫(yī)院2017年6月-2018年6月收治的60例彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤患者為研究對(duì)象，均予以免疫組織化學(xué)檢測(cè)法，同時(shí)檢測(cè)Ki-67蛋白的表達(dá)，并予以CHOP治療方案，觀察分析Ki-67蛋白表達(dá)對(duì)患者預(yù)后的影響。結(jié)果：經(jīng)檢測(cè)，Ki-67蛋白低表達(dá)患者22例，Ki-67蛋白高表達(dá)患者38例。Ki-67蛋白低表達(dá)患者與Ki-67蛋白高表達(dá)患者年齡、性別、結(jié)外病變、IPL評(píng)分、LDH值、臨床分期對(duì)比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。經(jīng)過治療后Ki-67蛋白低表達(dá)組生存時(shí)間長于Ki-67蛋白高表達(dá)組，治療總有效率高于Ki-67蛋白高表達(dá)組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：針對(duì)DLBCL可依據(jù)Ki-67蛋白表達(dá)情況評(píng)價(jià)患者的預(yù)后情況，Ki-67蛋白表達(dá)越高說明患者預(yù)后越差，故在臨床上具有應(yīng)用價(jià)值。

【關(guān)鍵詞】 彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤 蛋白表達(dá)檢測(cè) 預(yù)后情況

[Abstract] Objective： To investigate the prognostic significance of Ki-67 protein expression in patients with diffuse large B-cell lymphoma. Method： Sixty patients with diffuse large B-cell lymphoma （DLBCL） admitted to our hospital from June 2017 to June 2018 were enrolled in the study. Immunohistochemistry was performed to detect the expression of Ki-67 protein. The CHOP treatment protocol was also used to observe the effect of Ki-67 protein expression on the prognosis of patients. Result： After test， there were 22 patients with low expression of ki-67 protein and 38 patients with high expression of ki-67 protein. There was no significant difference in age， sex， extranodular lesion， IPL score， LDH value， clinical stage in patients with low expression of Ki-67 protein and patients with high expression of Ki-67 protein （P>0.05）. After treatment， the survival time of Ki-67 protein low expression group was longer than that of Ki-67 protein high expression group， and the total effective rate of treatment was higher than that of Ki-67 protein high expression group， the differences were statistically significant （P<0.05）. Conclusion： The prognosis of patients with DLBCL can be evaluated according to the expression of Ki-67 protein. The higher the expression of Ki-67 protein， the worse the prognosis of patients， so it has clinical application value.

彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤作為臨床上常見的惡性腫瘤之一，在非霍金淋巴瘤組織學(xué)類型中最為常見，且占據(jù)新診斷的病例約為32.0%[1]。DLBCL在臨床表現(xiàn)、免疫表型、形態(tài)學(xué)等方面均具有一定的特異性，臨床常用治療多數(shù)采用蒽環(huán)類藥物與利托普單抗等免疫化學(xué)療法，盡管能夠達(dá)到65%的治愈率[2]，但在治療反應(yīng)和預(yù)后效果上差異較大，一些患者在治療后易反復(fù)發(fā)作，發(fā)生腫瘤轉(zhuǎn)移情況，導(dǎo)致治療效果欠佳。有研究顯示，Ki-67蛋白表達(dá)與DLBCL預(yù)后存在密切關(guān)系[3]。鑒于此，本次研究對(duì)DLBCL患者的Ki-67蛋白表達(dá)情況展開相應(yīng)的分析，具體報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析筆者所在醫(yī)院2017年6月-2018年6月收治的60例DLBCL患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：接受腹部與胸部CT檢查。排除標(biāo)準(zhǔn)：在活檢前均接受過相關(guān)治療。其中男38例，女22例，年齡18～79歲，平均（52.14±3.15）歲。臨床分期依據(jù)Ann Arbor分期標(biāo)準(zhǔn)原則分為Ⅰ～Ⅳ期，Ⅰ期8例，Ⅱ期26例，Ⅲ期20例，Ⅳ期6例。國際預(yù)后指數(shù)IPI評(píng)分根據(jù)NCCN標(biāo)準(zhǔn)分為Ⅰ～Ⅳ期，Ⅰ期（低危）10例，Ⅱ期（低中危）18例，Ⅲ期（高中危）20例，Ⅳ期12例（高危）。本次研究患者自愿參與且簽署知情同意書，研究通過醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

入選患者均在治療前對(duì)淋巴瘤標(biāo)本進(jìn)行活檢，應(yīng)用中性甲醛（10%）固定且包埋石蠟，應(yīng)用多聚賴氨酸打膠進(jìn)行免疫組織化學(xué)切片檢查，厚度3 ?m，應(yīng)用鏈霉菌抗生物素蛋白過氧化酶連結(jié)法（SP）進(jìn)行免疫組化染色，實(shí)際操作依據(jù)試劑盒進(jìn)行，Ki-67需先使用檸檬酸緩沖劑（ph=6.0）高壓高溫加熱進(jìn)行抗原修復(fù)處理[4-6]，使用S-P法進(jìn)行染色法處理。若Ki-67呈現(xiàn)為陽性，則表現(xiàn)為細(xì)胞核棕褐或棕黃色，使用×400高倍鏡進(jìn)行檢測(cè)，并隨機(jī)抽取每張切片目的視野區(qū)域5個(gè)，對(duì)陽性腫瘤細(xì)胞進(jìn)行計(jì)算去平均值則為陽性占比，按照淋巴組織Ki-67蛋白陽性占比分為高表達(dá)組（占比達(dá)到40%及以上）與低表達(dá)組（占比達(dá)到40%以下）。

治療方式：入院患者均予以CHOP治療方案，給予患者靜脈注射阿霉素（50 mg/m2，d 1）、環(huán)磷酰胺[750 mg/（m2·d），d1]、長春新堿（1.4 mg/m2，d 1）及口服潑尼松[100 mg/（m2·d）]每日，治療期間嚴(yán)密監(jiān)測(cè)患者血常規(guī)，每3天1次，維持白細(xì)胞>1.5×109/L[7-8]。

1.3 觀察指標(biāo)及療效判定標(biāo)準(zhǔn)

療效判定標(biāo)準(zhǔn)：依據(jù)血液病療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)劃分為CR（完全緩解，病灶完全消失，腫瘤標(biāo)志物恢復(fù)正常）、PR（部分緩解，病灶減小≥30%，且腫瘤標(biāo)志物恢復(fù)正常維持4周）、SD（穩(wěn)定，病灶減小<30%，腫瘤標(biāo)志物無明顯變化）、PD（進(jìn)展，病灶未減小，甚至有所增大），治療總有效率（RR）=（CR+PR）/總例數(shù)×100%，并對(duì)患者進(jìn)行隨訪，直到隨訪至死亡為止，記錄診治時(shí)間到死亡間隔時(shí)間。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

數(shù)據(jù)納入SPSS 22.0軟件分析，計(jì)量資料以（x±s）表示，t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，采用字2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 Ki-67蛋白表達(dá)和DLBCL臨床特征的關(guān)系

經(jīng)檢測(cè)，Ki-67蛋白低表達(dá)患者22例，Ki-67蛋白高表達(dá)患者38例。Ki-67蛋白低表達(dá)患者與Ki-67蛋白高表達(dá)患者年齡、性別、結(jié)外病變、IPI評(píng)分、LDH值、臨床分期對(duì)比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見表1。

2.2 Ki-67蛋白表達(dá)與DLBCL預(yù)后之間的關(guān)系

經(jīng)過治療后Ki-67蛋白低表達(dá)組生存時(shí)間長于Ki-67蛋白高表達(dá)組，治療總有效率高于Ki-67蛋白高表達(dá)組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表2。

3 討論

Ki-67蛋白是細(xì)胞核抗原，其表達(dá)會(huì)直接影響到細(xì)胞增殖，同時(shí)也會(huì)存在細(xì)胞周期S、G1、G2及M期中，由此可見Ki-67蛋白能夠作為特定細(xì)胞群增殖指數(shù)檢測(cè)的有效指標(biāo)之一，并且Ki-67蛋白表達(dá)的高低也與臨床許多常見腫瘤浸潤、分化、轉(zhuǎn)移及預(yù)后存在密切聯(lián)系[9]，臨床上也將此用在各類惡性腫瘤增殖狀態(tài)檢測(cè)標(biāo)志物中。本次研究結(jié)果顯示，Ki-67蛋白表達(dá)的高低和DLBCL患者年齡、性別、LDH、臨床分期等方面關(guān)系不大，這與俞文娟等[10]報(bào)道結(jié)果趨于一致。目前臨床上治療DLBCL常采用CHOP方案，但在治療后Ki-67蛋白表達(dá)高低在治療效果與生存期上差異較大，其中Ki-67蛋白表達(dá)為陽性時(shí)，也就表示該細(xì)胞正處于增殖狀態(tài)良好，活性較高，腫瘤負(fù)荷量大，容易使得癌細(xì)胞分化及轉(zhuǎn)移，導(dǎo)致疾病進(jìn)展加快，導(dǎo)致患者預(yù)后效果欠佳。車江雁等[11]報(bào)道中提到，MUM1與DLBCL患者預(yù)后有關(guān)，并且在陽性和陰性上對(duì)比OS與PFS有相關(guān)性，陰性預(yù)后比陽性預(yù)后效果更好，MUM1作為骨髓瘤相關(guān)基因，能夠在免疫系統(tǒng)發(fā)育中提示淋巴細(xì)胞活化劑B細(xì)胞分化程度[12]。由此說明在DLBCL預(yù)后評(píng)估中依據(jù)Ki-67蛋白表達(dá)水平能夠了解患者的預(yù)后情況，但同時(shí)也可結(jié)合如MUM1基因，更為準(zhǔn)確全面的評(píng)價(jià)預(yù)后，進(jìn)而來合理調(diào)整DLBCL患者的治療方案，盡可能地延長生存時(shí)間與質(zhì)量。

綜上所述，對(duì)于DLBCL可依據(jù)Ki-67蛋白表達(dá)情況評(píng)價(jià)患者的預(yù)后情況，值得臨床應(yīng)用推廣。

參考文獻(xiàn)

[1]張宇，楊明珍.HBV相關(guān)彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤臨床特征、BCL-2、CMYC表達(dá)及預(yù)后分析[J].安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2017，52（4）：570-574.

[2]章敬成，鐘俊武，賈永清，等.粉塵螨Derf2蛋白抑制Foxp3對(duì)小鼠彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤的影響[J].現(xiàn)代免疫學(xué)，2017，121（6）：500-504.

[3]黃亞妮，戈偉.MYC/Bcl-2蛋白共表達(dá)與彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤臨床特征的關(guān)系及其對(duì)預(yù)后的影響[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2018，15（31）：82-85.

[4]尹文娟，朱秀，楊海燕，等.原發(fā)中樞神經(jīng)系統(tǒng)彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤中bcl-2、C-MYC基因異常、蛋白表達(dá)及治療方案選擇對(duì)患者預(yù)后的影響[J].中華病理學(xué)雜志，2018，47（1）：32-38.

[5]蘇智祥，趙征，孫海鳳，等.彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤患者血清中白細(xì)胞介素10表達(dá)的臨床意義[J].中國腫瘤臨床與康復(fù)，2016，135（7）：794-797.

[6]胡名娟，李國偉，歐陽小明.彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤中MYC和BCL-2蛋白共表達(dá)的臨床病理意義[J].中南醫(yī)學(xué)科學(xué)雜志，2017，45（3）：283-287.

[7]張會(huì)平，徐瑞榮.彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤患者化療后復(fù)發(fā)相關(guān)因素分析[J].中國腫瘤臨床與康復(fù)，2019，26（1）：82-84.

[8]李林玉，張婷婷，張煦涵，等.Myc+和Bcl-2+Myc+年輕DLBCL患者中Bcl-6的表達(dá)及其臨床意義[J].腫瘤，2018，38（9）：46-53.

[9]韓琪，范姝瓊，張子臻，等.Bcl-2基因擴(kuò)增和蛋白表達(dá)與原發(fā)性胃腸道彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤臨床病理特征和免疫表型的關(guān)系[J].胃腸病學(xué)，2017，22（5）：266-271.

[10]俞文娟，曹利紅，王敬瀚，等.彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤患者蛋白表達(dá)檢測(cè)的預(yù)后意義[J].中華血液學(xué)雜志，2017，38（9）：784-788.

[11]車江雁，王寶宏.BCL2、BCL6、MUM1蛋白表達(dá)及其與彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤預(yù)后的關(guān)系[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生，2017，32（1）：25-27.

[12]宋斌，陳雁，胡平，等.彌漫型大B細(xì)胞淋巴瘤患者XIAP與Survivin蛋白的表達(dá)及其相關(guān)性[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2017，25（23）：3831-3834.

（收稿日期：2019-09-10） （本文編輯：馬竹君）