劉俐君，歐云文，趙小波，王 勤，張 蕾，李清竹，黎丁箕，何麗霞，李 印

布魯氏菌病(Brucellosis，簡稱布病)，又稱地中海弛張熱、馬耳他熱、波狀熱，是由布魯氏菌(brucella)引起的一種人獸共患傳染病。世界動物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為B類動物疫病，我國也將其列為二類動物疫病，是國家《中長期動物疫病防治規(guī)劃(2012—2020年)》優(yōu)先防治的動物疫病之一[1]。我國主要流行的是羊、牛和豬3種布魯氏菌，其中以羊布魯氏菌病最為多見，其次是牛種布魯氏菌，母畜胎膜發(fā)炎、流產、公畜不育、睪丸炎、腱鞘炎和關節(jié)炎為主要臨床特征[1]。該病主要呈地方性流行，發(fā)病無季節(jié)性，但春夏季發(fā)病率較高[1-2]。人的感染與其職業(yè)、飲食和生活習慣密切相關，感染后則表現出發(fā)熱伴寒戰(zhàn)、多汗、乏力、不孕不育、頭痛、神經痛、骨關節(jié)和肌肉疼痛等癥狀[3-4]。目前，全球多個國家(地區(qū))均有布病報告，我國部分地區(qū)也曾廣泛流行，給畜牧業(yè)持續(xù)健康發(fā)展和人類健康造成嚴重威脅[5-10]。

達州市地勢以山區(qū)和丘陵為主，十分適合發(fā)展草食牲畜養(yǎng)殖業(yè)，但該地區(qū)地域面積廣，人口基數大，牲畜跨省流通頻繁，布病防控形勢復雜嚴峻。因此，為了掌握達州地區(qū)羊布病流行現狀和趨勢，現對2015—2018年布病監(jiān)測結果進行綜合分析，以期為該地區(qū)羊布病的防控提供參考依據。

1 材料與方法

1.1 材 料

1.1.1血清樣本 以達州市7個縣(市、區(qū))的奶山羊、引入羊、種公羊、種母羊和4月齡以上的商品羊為采樣對象，按照血清制備方法離心制備血清，—20 ℃冷凍保存。

1.1.2診斷試劑 布病虎紅平板凝集試驗(RBT)、試管凝集試驗(SAT)抗原、布病標準陽性血清、陰性血清由中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所提供，均在有效期內。

1.2 方 法

1.2.1抽樣方案 每年6～8月在達州市7個縣(市、區(qū))進行多階段抽樣，采用發(fā)現疫病或證明無疫的樣本量公式計算抽樣量。第一階段：以預估流行率計算樣本量，置信區(qū)間(CI)設為95%，可接受誤差設為5%，預期流行率設為50%，計算出各縣(市、區(qū))需抽選鄉(xiāng)(鎮(zhèn))數量，并用簡單隨機法抽選鄉(xiāng)(鎮(zhèn))；第二階段：鄉(xiāng)(鎮(zhèn))級抽選轄區(qū)內的所有羊場(戶)，進入羊場(戶)后，按發(fā)現疫病或證明無疫計算樣本量，置信區(qū)間(CI)設為95%。根據文獻[11]報道虎紅平板凝集試驗的樣品率標準差(Sp)為92%，因此，2015-2018年羊布病的預期個體陽性率分別設定為15%、6%、3%和1%，RBT初篩為布病陽性的羊場(戶)，需全群采樣。

1.2.2問卷調查 按照流行病學調查方法，對養(yǎng)殖場(戶)的基本信息、飼養(yǎng)方式、引種管理、生物安全措施以及業(yè)主對布病的認知度等內容進行問卷調查，并歸類存檔。

1.2.3實驗室檢測 采用虎紅平板凝集試驗對血清樣品進行初篩，對疑似陽性樣品進行試管凝集試驗復核，具體操作方法參照《動物布魯氏菌病診斷技術》(GB/T 18646-2002)。結果判定：采用虎紅平板凝集試驗檢測，結果為陽性者判為疑似陽性樣品；疑似陽性樣品經試管凝集試驗檢測，結果為陽性者判為確診陽性樣品；群體內至少檢出1個確診陽性樣品的群體為陽性群體。

1.2.4統(tǒng)計分析 采用Excel 2007進行資料整理，運用Epi info 7進行風險因素分析；用ArcGIS 10.6 繪制區(qū)域分布圖；用SPSS 20.0軟件對監(jiān)測數據進行卡方檢驗和Fisher確切概率檢驗。檢驗水準為α=0.05。

2 結 果

2.1抽樣結果 2015—2018年，在達州市7個縣(市、區(qū))抽取1 900個規(guī)模場(存欄量≥50只)和1 299個散養(yǎng)戶(存欄量<50只)，共采集羊血清樣品69 630份。

2.2問卷調查結果 對全市59個布病陽性養(yǎng)殖場(戶)及相鄰的布病陰性養(yǎng)殖場(戶)進行問卷調查，結果發(fā)現：近1年內引羊(OR=9.11，95%CI：1.08～77.29)、新購入羊只不隔離(OR=6.78，95%CI：1.33～34.45)、臨產母羊不與其他羊隔離飼養(yǎng)(OR=5.63，95%CI：1.61～19.72)是布病感染養(yǎng)殖場和在場內擴散的主要風險因素。通過對KAPs測試結果分析發(fā)現：一是該地區(qū)養(yǎng)殖場(戶)主動防疫和個人防護意識薄弱，對布病認識不到位；二是該地區(qū)多為山地和丘陵，羊養(yǎng)殖模式以放牧居多，且規(guī)模小、設施設備簡陋、防疫條件差、養(yǎng)殖模式落后、家畜流動性大。

2.3檢測結果概況 2015—2018年，對達州市3 199個場點抽檢的69 630份羊血清樣品進行了實驗室檢測，全市共監(jiān)測到59個陽性場(戶)，檢出陽性樣品835份，場(戶)平均陽性率為1.84%，樣品平均陽性率為1.20%。2015—2018年場(戶)陽性率分別為6.30%、2.30%、0.80%和0.18%，陽性率下降趨勢差異具有統(tǒng)計學意義(n=3 199, χ2=66.415，P<0.05)；2015—2018年陽性樣品率分別為4.55%、1.90%、0.61%和0.01%，陽性率逐年下降差異具有統(tǒng)計學意義(n=69 630, χ2=1 121.088，P<0.01)(表1)。

表1 2015—2018年達州市羊布病監(jiān)測結果
Tab.1 Surveillance results of goat brucellosis in Dazhou, 2015-2018

年度場戶數/個陽性數/個場戶陽性率(%)樣品數/份陽性數/份樣品陽性率(%)2015444286.318 2683764.552016769182.3413 8102631.9020171 417120.8532 0011950.61201856910.1815 55110.01合計3 199591.8469 6308351.20

2.4區(qū)域分布情況 2015-2018年，從區(qū)域分布分析，全市除渠縣外，其余6個縣(市、區(qū))均檢測出布病陽性場點，場(戶)平均陽性率為0%～4.77%，其中達川區(qū)場(戶)平均陽性率最高，為4.77%，與其他縣(市、區(qū))比較，差異具有統(tǒng)計學意義(n=3 199, χ2=34.612,P<0.05)；其次為萬源市，其場(戶)平均陽性率為3.61%。2015年，達川區(qū)場(戶)陽性率、最高，為14.55%，與其他縣(市、區(qū))比較，差異具有統(tǒng)計學意義(n=444, Fisher 確切概率檢驗，P=0.012)；2016年，萬源市場(戶)陽性率最高，為11.11%，與其他縣(市、區(qū))比較，差異具有統(tǒng)計學意義(n=769, Fisher 確切概率檢驗，P=0.01)；2017年，萬源市場(戶)陽性率最高，為3.08%，與其他縣(市、區(qū))比較，差異具有統(tǒng)計學意義(n=1 417, Fisher 確切概率檢驗，P=0.02)；2018年，全市除宣漢縣檢測出1份陽性樣品外，其余6個縣(市、區(qū))均未檢測出布病陽性樣品(圖1)。

圖1 2015—2018年達州市不同縣(市、區(qū))羊場布病陽性率情況Fig.1 Brucellosis positive rate of goat farm in different counties, 2015—2018

2.5不同規(guī)模養(yǎng)殖場(戶)監(jiān)測情況 2015-2018年，該地區(qū)不同規(guī)模的養(yǎng)殖場(戶)均監(jiān)測出布病陽性樣品，其中存欄量<50只的場(戶)出現陽性場(戶)數最多，場(戶)陽性率為2.00%，場(戶)陽性率與存欄規(guī)模呈負相關，但不同規(guī)模養(yǎng)殖場(戶)之間比較，差異無統(tǒng)計學意義(n=3 199, χ2=0.497,P>0.05)。2015年，存欄量<50只的場(戶)的場(戶)陽性率最高，為9.21%，其中存欄量<100只與存欄量≥100只的場(戶)陽性率比較，差異具有統(tǒng)計學意義(n=444, χ2=3.958,P<0.05)；2016年，存欄量<50只的場(戶)的場(戶)陽性率亦最高，為4.71%；2017年，存欄量在50～100只的養(yǎng)殖場的場(戶)陽性率最高，為1.62%；2018年，僅在存欄量≥100只的養(yǎng)殖場中監(jiān)測出陽性樣品(表2)。

表2 2015—2018年達州市不同規(guī)模羊場(點)布病監(jiān)測結果
Tab.2 Brucellosis surveillance results of different large-scale goat farm in Dazhou, 2015-2018

年份養(yǎng)殖規(guī)模(只)存欄量≥10050≤存欄量<100存欄量<50合計2015年場戶數191112141444陽性數781328陽性率(%)3.667.149.216.302016年場戶數289289191769陽性數45918陽性率(%)3.401.734.712.342017年場戶數2683707791417陽性數26412陽性率(%)0.741.620.510.842018年場戶數133248188569陽性數1001陽性率(%)0.750.000.000.18合計陽性率(%)1.73(14/881)1.86(19/1 019)2.00(26/1 299)1.84(59/3 199)

2.6陽性場點監(jiān)測情況 2015-2018年，監(jiān)測為布病陽性場(戶)的樣品平均陽性率為30.56%，2017年陽性場(戶)的樣品陽性率最高，2018年陽性場(戶)的樣品陽性率最低，差異具有統(tǒng)計學意義(n=4 025, χ2=40.787,P<0.01)。陽性場(戶)的布病以隱性感染為主，無明顯臨床癥狀或放養(yǎng)過程流產不易被發(fā)現，因此，陽性場(戶)的樣品陽性率均普遍較高(表3)。

表3 2015—2018年達州市羊布病陽性場(點)監(jiān)測結果
Tab.3 Surveillance results of goat brucellosis positive farm in Dazhou, 2015—2018

年度場戶數/個存欄量/只樣品數/份陽性樣品數/份樣品陽性率(%)2015282 3162 09458828.082016181 4971 26444735.3620171280151219437.892018117515510.65合計594 7894 0251 23030.56

3 討 論

布病作為重要的人獸共患病，在我國多個地區(qū)流行，按照布魯氏菌病診斷方法和疫區(qū)判定標準，四川省共有48個布病疫區(qū)縣，主要分布在阿壩、甘孜、涼山、成都、雅安、內江和綿陽市(州)[12]。達州地處川渝陜3省(市)結合部, 是四川東出北上門戶，屬布病凈化區(qū)域。1985年，達州市從市外引入的山羊中首次監(jiān)測到布病。近年來，四川省大力發(fā)展草食牲畜，隨著活羊價格波動，羊的交易調運頻繁，布病的防控形勢變得復雜嚴峻。2014年，達州市疾病預防控制中心首次報告了達州地區(qū)人間布病病例，隨后達州市、縣兩級動物疫病預防控制中心在轄區(qū)內開展了羊場布病監(jiān)測凈化工作。為提高抽樣的精準度，在計算第一階段抽樣量時，預估流行率設為50%，采取最大采樣量。達州地區(qū)羊場規(guī)模化程度較低，生物安全等級差，不同批次、日齡的羊混養(yǎng)，養(yǎng)殖場(戶)一旦引入布病陽性羊，極易在群體中傳播，隨著布病凈化工作的推進，個體陽性率逐漸降低。因此，2015—2018年羊布病的預期個體陽性率分別設為15%、6%、3%和1%。

2015—2018年，達州市3 199個場(戶)、69 630份羊血清的布病監(jiān)測結果表明，該地區(qū)共監(jiān)測出59個陽性場(戶)，835份陽性樣品，場(戶)平均陽性率為1.84%，樣品平均陽性率為1.20%，場(戶)陽性率下降趨勢差異具有統(tǒng)計學意義(n=3 199, χ2=66.415,P<0.05)，樣品陽性率逐年下降差異具有統(tǒng)計學意義(n=69 630, χ2=1121.088,P<0.01)。從區(qū)域分布分析，發(fā)現該地區(qū)除渠縣外，其余6個縣(市、區(qū))均檢測出布病陽性場(戶)，其中達川區(qū)場(戶)陽性率最高，為4.77%，與其他縣(市、區(qū))比較，差異具有統(tǒng)計學意義(n=3 199, χ2=34.612,P<0.05)，全市各縣(市、區(qū))場(戶)陽性率均呈總體下降趨勢，主要呈點狀散發(fā)性流行。這一系列數據的變化主要歸因于該市采取檢疫、監(jiān)測、檢測、陽性場點全群撲殺、無害化處理等綜合防控措施，全面開展了畜間布病專項監(jiān)測、凈化工作，全市陽性場(戶)數逐年減少，樣品陽性率從4.55%下降至0.01%，顯著低于四川省樣品布病陽性率的平均水平(0.65%)[13]。從養(yǎng)殖場規(guī)模分析，發(fā)現該地區(qū)不同規(guī)模的養(yǎng)殖場(戶)均監(jiān)測出布病陽性樣品，其中存欄量<50只的場(戶)出現陽性場點數最多，場(戶)陽性率為2.00%，場(戶)陽性率與存欄規(guī)模呈負相關，但不同規(guī)模養(yǎng)殖場(戶)之間比較，差異無統(tǒng)計學意義(n=3 199, χ2=0.497,P>0.05)。經流行病學調查分析發(fā)現，養(yǎng)殖戶防疫意識薄弱，養(yǎng)殖模式落后，防疫條件差，未經檢疫隨意引種、種羊交換和買賣現象頻繁是散養(yǎng)戶高機率發(fā)生和流行布病的主要因素。

總體而言，布病的監(jiān)測、凈化工作已取得初步成效，但要想鞏固防控成果還需進一步做好以下工作。一是對養(yǎng)殖戶加強宣傳與培訓工作，提高其主動防疫和個人防護意識；二是制定行之有效的檢疫監(jiān)管政策和措施，切斷疫病傳入和擴散的渠道，從源頭上預防疫病發(fā)生；三是爭取各級政府和主管部門的重視，保障監(jiān)測和撲殺經費，對經濟價值不高的牲畜全群撲殺；四是加強與衛(wèi)生等相關部門的信息共享，形成合力，聯(lián)防聯(lián)控，才能保障畜牧業(yè)持續(xù)、健康發(fā)展和人類健康。

利益沖突：無