向洋

摘要：草履蟲是生物化學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、環(huán)?？茖W(xué)等領(lǐng)域使用較為普遍的試驗(yàn)與研究材料，為此對(duì)草履蟲的需求量較大，采用科學(xué)合理的方法對(duì)草履蟲進(jìn)行采集與培養(yǎng)有利于保障各類相關(guān)學(xué)科研究對(duì)草履蟲的需求。本文主要分析討論關(guān)于草履蟲采集與培養(yǎng)方法的相關(guān)內(nèi)容，希望通過(guò)文章中的相關(guān)闡述為草履蟲采集與培養(yǎng)方法的優(yōu)化與效果提升提供參考與幫助。

關(guān)鍵詞：草履蟲采集;草履蟲培養(yǎng);方法探討

草履蟲是生物化學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、環(huán)?？茖W(xué)等領(lǐng)域重點(diǎn)使用的試驗(yàn)與研究材料，作為一種單細(xì)胞試驗(yàn)動(dòng)物，現(xiàn)階段，對(duì)于草履蟲的研究已經(jīng)深入到水質(zhì)凈化、環(huán)境監(jiān)測(cè)及疾病診斷等領(lǐng)域。對(duì)于草履蟲的采集與培養(yǎng)，是保證各相關(guān)學(xué)科研究持續(xù)進(jìn)行的關(guān)鍵所在。

1 草履蟲采集的方法探討

草履蟲種群豐富，對(duì)于生存環(huán)境有一定的特殊要求，比如溫度、水質(zhì)、有機(jī)物含量等。通常情況下，在有機(jī)物含量豐富，光線較好，水溫在0℃-30℃的稻田、水塘等環(huán)境中會(huì)有大量的草履蟲生存。溫度也是進(jìn)行草履蟲采集時(shí)應(yīng)重點(diǎn)考慮的影響因素，以溫度為主要因素，根據(jù)溫度的高低情況，對(duì)草履蟲進(jìn)行采集的方法如下：

1.1 溫度適宜時(shí)的草履蟲采集方法

草履蟲在0℃-30℃溫度環(huán)境下適合生存，在該溫度區(qū)間內(nèi)，當(dāng)水溫保持在14℃-20℃情況下時(shí)，草履蟲大量繁殖，會(huì)在水面處聚集形成白色覆膜，為此也更有利于采集。進(jìn)行采集時(shí)，應(yīng)使用清潔試管或廣口瓶，于腐葉較多的水面進(jìn)行隨水采集，事后觀察容器內(nèi)水中是否有小白點(diǎn)游動(dòng)，有則證明草履蟲采集成功。

1.2 溫度較低時(shí)的草履蟲采集方法

溫度較低時(shí)，特別是在10℃及以下時(shí)，草履蟲的繁殖能力逐漸降低，數(shù)量大幅減少。但是此時(shí)的草履蟲活力較低，不樂(lè)于活動(dòng)，基本處于聚集而沉于水底的情況，相比溫度適宜的情況被認(rèn)為更易于采集。

上述分析的在溫度適宜與溫度較低情況下對(duì)草履蟲的采集，都屬于直接采集的方法，需要注意的是保持采集容器的干凈清潔。除此之外，聚氨酯泡沫塑料法與稻草墊培養(yǎng)采集法也是極為常用的草履蟲采集方法。具體分析如下：

1.3 聚氨酯泡沫塑料法

聚氨酯泡沫塑料法在使用的過(guò)程中，首先應(yīng)將聚氨酯泡沫塑料在水中浸泡半小時(shí)及以上，水下深度約在3-5cm。在滿足這些條件之后，聚氨酯泡沫塑料會(huì)吸飽水，將其取出，并將水?dāng)D入預(yù)備好的專用容器后便會(huì)實(shí)現(xiàn)草履蟲采集的目的。

1.4 稻草墊培養(yǎng)采集法

稻草墊培養(yǎng)采集法不同于野外直接采集草履蟲的方法，而是先培養(yǎng)后采集。具體方法的使用，主要是滿足溫度、有機(jī)物、時(shí)間等條件，溫度控制在20℃，有機(jī)物主要是依靠10kg左右的草墊以及水與葡萄糖配置的營(yíng)養(yǎng)液，時(shí)間應(yīng)滿足一周。草履蟲會(huì)在這些條件下被大量繁殖，從而實(shí)現(xiàn)采集的目的。

2 草履蟲培養(yǎng)的方法探討

現(xiàn)階段，草履蟲培養(yǎng)的方法主要包括三種，即植物培養(yǎng)法、動(dòng)物培養(yǎng)法和生物制品培養(yǎng)法。具體分析如下：

2.1 植物培養(yǎng)法

2.1.1 植物直接培養(yǎng)法

采用植物直接培養(yǎng)法，首先要對(duì)野生禾本科植物進(jìn)行截取，截取的位置以根部莖稈為主，截取的長(zhǎng)度以2cm為宜，截取后放入盛有水的培養(yǎng)容器當(dāng)中置于陽(yáng)光下，待根部莖稈上的草履蟲大量繁殖。該方法在使用過(guò)程中存在草履蟲純度不高，需要配套使用分離與純化的方法。

2.1.2 植物間接培養(yǎng)法

植物間接培養(yǎng)法在使用時(shí)需要先制備培養(yǎng)液，培養(yǎng)液的制備主要以新鮮干凈的稻草或麥粒為原料，經(jīng)沸水煮開、冷卻過(guò)濾后制成。培養(yǎng)液制成后，應(yīng)在對(duì)容器進(jìn)行封口靜置24h之后進(jìn)行草履蟲接種。

2.2 動(dòng)物培養(yǎng)法

使用動(dòng)物培養(yǎng)法首先需要制備培養(yǎng)液，培養(yǎng)液的種類主要包括蛋黃培養(yǎng)液、牛肉汁培養(yǎng)液和豬內(nèi)臟培養(yǎng)液。

2.2.1 蛋黃培養(yǎng)液

蛋黃培養(yǎng)液的配制主要使用熟蛋黃加水，搗碎攪拌成糊狀，然后靜置2小時(shí)而成。具體培養(yǎng)時(shí)，應(yīng)先加入唇滴蟲培養(yǎng)液，再進(jìn)行草履蟲接種。

2.2.2 牛肉汁培養(yǎng)液

牛肉汁培養(yǎng)液需用大約500ml水加50g牛肉進(jìn)行牛肉汁的熬制，然后置于干凈容器當(dāng)中冷藏。使用時(shí)，定期取少量加入到培養(yǎng)液中，可以有效增加草履蟲的繁殖能力。另外，與牛肉汁有相同促進(jìn)作用的還包括碳酸氫鈉等具有發(fā)酵作用的物質(zhì)。

2.2.3 豬內(nèi)臟培養(yǎng)液

豬內(nèi)臟培養(yǎng)液主要是使用豬的肝臟、胰臟等器官，切碎加水后靜置，使得臟器碎屑浸泡滿12小時(shí)后方可使用。通常情況下使用豬內(nèi)臟培養(yǎng)液可在三四天培養(yǎng)出大量草履蟲。

2.3 生物制品培養(yǎng)法

酵母、奶粉、牛奶、豆奶等都屬于生物制品，利用生物制品培養(yǎng)法培養(yǎng)的草履蟲單體個(gè)大、細(xì)胞質(zhì)清晰，屬于優(yōu)質(zhì)研究材料。酵母培養(yǎng)液的配制對(duì)溫度有較高地要求，要求溫度滿足室溫條件。具體配制過(guò)程中，需用少量酵母與少量水混合攪拌成糊狀，再加入300ml適量清水以靜置。期間，要保證器皿的清潔無(wú)污染及避免大量蒸發(fā)，為此應(yīng)加蓋蓋緊。而奶粉培養(yǎng)液的配制，主要是利用脫脂乳粉，將其搗碎后與清水混合攪拌成糊狀，然后加入500ml水煮沸，然后冷卻靜置。進(jìn)行草履蟲接種后，需要在保持環(huán)境溫度20℃左右后靜置三個(gè)月的時(shí)間，此時(shí)草履蟲進(jìn)入分裂生殖狀態(tài)，五天后進(jìn)入高峰生殖狀態(tài)。定期少量的在接種草履蟲的奶粉培養(yǎng)液中加入脫脂乳粉糊狀物，可以使得奶粉培養(yǎng)液長(zhǎng)期持續(xù)使用。通常情況下，使用生物制品培養(yǎng)法，控制好環(huán)境溫度，在三日之內(nèi)即可獲得大量草履蟲。

3 結(jié)語(yǔ)

草履蟲是重要的研究實(shí)驗(yàn)用材料，需求量大，其本身所具備的容易采集與容易培養(yǎng)的特點(diǎn)，使得只要掌握科學(xué)合理的草履蟲采集與培養(yǎng)方法就能夠保障各學(xué)科使用的需要。上述所提及的直接與間接草履蟲采集法，以及植物培養(yǎng)、動(dòng)物培養(yǎng)、生物制品培養(yǎng)等方法，是現(xiàn)階段使用最為普遍的方法，具有實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)豐富，成功率高的特點(diǎn)，對(duì)這些方法的掌握具有十足的必要性。

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（作者單位：廣安職業(yè)技術(shù)學(xué)院）