姜云
一、實驗部分
1.儀器與試劑。Acquity UPLC-Quattro Premier XETM質(zhì)譜聯(lián)用儀;電子天平;高速冷凍離心機為Sigma3-18K型SIR漩渦混合器;HLB固相萃取小柱(3mL/60mg)等。主要的試劑包括甲醇、三氯蔗糖對照物質(zhì)等。
2.標準溶液的配制。精確稱取三氯蔗糖對照品10mg,用甲醇溶解并定容至10mL;配置1.0g/L的標準儲備液,通過甲醇-水(體積比45∶55)逐步進行稀釋,確保濃度符合標準工作液要求。
3.樣品前處理。(1)均勻適量地稱取酒類樣品,準確加入甲醇-水15mL,旋渦混合1min,超聲提取15min,冷凍離心設置成10000r/min,離心10min,利用有機濾膜(0.22μm)過濾上清液,然后利用儀器進行測定。(2)均勻適量地稱取乳飲料、乳制品以及果蔬汁等樣品,加入超純水15mL,旋渦混合1min,超聲提取15min,冷凍離心設置成10000r/min,離心10min,將上清液全部取出,過Oasis HLB小柱,并通過超純水(3mL)淋洗上樣,將淋洗液全部棄除,通過真空條件進行2min的HLB柱抽干。洗脫環(huán)節(jié)選擇甲醇4.5mL,在洗脫液中加入超純水5.5mL,混勻后通過有機濾膜(0.22μm)進行過濾,然后利用儀器進行測定。(3)均勻適量地稱取冰淇淋、面包、炒貨、堅果類樣品,加入超純水15mL,旋渦混合1min,超聲提取15min,加入濃度為0.5mol/L的氧化鈉溶液1mL,漩渦混勻后加入濃度為0.42mol/L的硫酸鋅溶液1.5mL,充分混勻后加入濃度為0.5mol/L的氫氧化鈉溶液1.5mL,漩渦混勻,放置靜置。冷凍離心設置成10000r/min,離心10min,將上清液全部取出,通過甲醇進行稀釋,使其達到試驗樣品中甲醇和水的體積比45∶55,選擇有機濾膜(0.22μm)過濾之后進行儀器測試。
二、結果與討論
1.方法的線性范圍與檢出限。通過空白樣品提取并配制五個不同濃度的標準工作液,在優(yōu)化條件下進行測定,進樣量5μL,獲取質(zhì)量色譜圖,以基質(zhì)匹配標準工作液中三氯蔗糖的質(zhì)量濃度(X,μg/L)為橫坐標,以定量離子對的峰面積(Y)為縱坐標繪制標準曲線,回歸方程Y=1897.7X-2.22,r=0.9998。結果發(fā)現(xiàn),線性關系較好的范圍是0.2mg/L-20mg/L。依據(jù)定量離子對和定性離子對的峰面積比值,將0.4mg/kg的三氯蔗糖加入到空白樣品后,信噪比S/N為20.15,所以定量下限便以此濃度進行設定。通過這種方法測定食品內(nèi)三氯蔗糖含量,具有較高的靈敏度。
2.方法的回收率與精密度。選擇沒有目標分析物的樣品,開展加標回收率及精密度試驗。將各種濃度的標準物質(zhì)加入樣品后,放置0.5h,讓樣品均勻吸收標準物質(zhì),利用此法開展提取、凈化以及測定,回收率和精密度結果見表1。從表1可見,在0.4mg/kg、4mg/kg、10mg/kg的加標水平下,回收率為85%-98%,相對標準偏差處于1.7%-5.0%。試驗表明,該方法具有非常穩(wěn)定的回收率,完全可以進行實際樣品測定。