劉海俠 劉森

摘要：傳染性法氏囊病也稱(chēng)為“甘保羅病”，是由一種雙RNA病毒（傳染性法氏囊病病毒，IBDV）感染引起的，是一種高度接觸性傳染病。從患禽法氏囊中最容易分離到該病毒，但也可從其他器官分離到。感染可呈亞臨床型和臨床型。通過(guò)病史、癥狀和剖檢可初診，確診可進(jìn)行血清學(xué)診斷。該病尚無(wú)治療方法，養(yǎng)禽場(chǎng)需做好衛(wèi)生防疫管理。

關(guān)鍵詞：雞;傳染性法氏囊病;臨床表現(xiàn);診斷;預(yù)防

中圖分類(lèi)號(hào)：$858.31 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：2095-9737（2020）06-0127-02

1病原與傳播

IBDV隨患禽糞便被排出，并通過(guò)污染物在舍間傳播。該病毒十分穩(wěn)定，從雞舍中很難被根除，病毒野毒株的毒力差異較大。在歐洲首次發(fā)現(xiàn)了可造成高發(fā)病率和高死亡率的超強(qiáng)毒株。在東半球都有這類(lèi)病毒的傳播，1999年在南美檢測(cè)到該類(lèi)病毒。美國(guó)在2009年檢測(cè)到該類(lèi)病毒。在我國(guó)，該病仍然是養(yǎng)雞業(yè)的主要傳染病之一。近幾年來(lái)，經(jīng)過(guò)科研部門(mén)及廣大獸醫(yī)工作者的共同努力，使該病在一定程度上得到了有效控制。

采集發(fā)病早期雞的樣本，接種8～11日齡無(wú)抗體雞胚，可分離到IBDV。絨毛尿囊膜接種比尿囊腔接種更敏感。分離IBDV也可采用源自法氏囊的細(xì)胞培養(yǎng)物和已建立的禽源和哺乳動(dòng)物源細(xì)胞系，可在雞胚成纖維細(xì)胞分離到一些毒株。IBDV細(xì)胞適應(yīng)株能夠產(chǎn)生細(xì)胞病變，可用于血清學(xué)定量試驗(yàn)。已確認(rèn)IBDV有兩種血清型，二者之間的抗原差異很大。血清型Ⅱ型能感染雞和火雞，但不會(huì)造成臨床發(fā)病或免疫抑制。已經(jīng)鑒定出IBDV變異株與標(biāo)準(zhǔn)株存在著主要抗原的差異。

2臨床表現(xiàn)

傳染性法氏囊病是一種高度接觸性傳染病，感染結(jié)果取決于雞的日齡、品種以及病毒毒力。感染可呈亞臨床型和臨床型。3周齡之前的感染通常呈亞臨床型。臨床型感染最常見(jiàn)于3～6周齡雞，但18周齡的雞也曾出現(xiàn)過(guò)嚴(yán)重感染。早期的亞臨床感染可造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失，因此也是最重要的疾病表現(xiàn)形式。該病可破壞法氏囊、胸腺和脾臟中的未成熟淋巴細(xì)胞，從而出現(xiàn)嚴(yán)重的、長(zhǎng)期性免疫抑制。體液免疫（B細(xì)胞）應(yīng)答受到的影響最嚴(yán)重;細(xì)胞介導(dǎo)（T細(xì)胞）的免疫應(yīng)答受影響的程度較小。早期感染IBDV引起免疫抑制的雞，對(duì)疫苗接種不能夠產(chǎn)生良好的免疫應(yīng)答，易發(fā)生由正常的非致病性的病毒和細(xì)菌引起的感染。IBDV感染?？稍斐沙Ｒ?jiàn)病加重。變異毒株感染幼禽可引起亞臨床感染，而早期感染，可造成嚴(yán)重的長(zhǎng)期性免疫抑制和法氏囊萎縮。在臨床感染時(shí)，常于潛伏期3～4天后突然發(fā)病。雞表現(xiàn)有嚴(yán)重的虛脫、共濟(jì)失調(diào)、水樣下痢、羽毛臟亂、肛門(mén)周?chē)鄯x、啄肛和泄殖腔炎癥。死亡率可達(dá)20%以上。在1周內(nèi)即可康復(fù)，肉雞增重延緩3～5天。有母源抗體存在時(shí)可改變臨床病程。

3病理變化

大體剖檢可見(jiàn)法氏囊腫大、水腫，呈淡黃色，偶爾出血。胸部、股部和腿部的肌肉常見(jiàn)充血和出血。IBDV感染后的康復(fù)雞，由于法氏囊濾泡發(fā)生破壞且不能再生，而使法氏囊萎縮、變小。

4血清學(xué)診斷

血清學(xué)診斷方法有瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)（AGP）、熒光抗體技術(shù)、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）、中和試驗(yàn)等?，F(xiàn)主要介紹應(yīng)用熒光抗體技術(shù)檢測(cè)IBDV。

（1）材料的準(zhǔn)備。載玻片和蓋玻片（若干）、冰凍切片機(jī)、熒光標(biāo)記的抗IBDV抗體、丙酮和甘油（足量）。

（2）試驗(yàn)操作。步驟1：制片。檢測(cè)法氏囊一般采用觸片或冰凍切片，觸片按常規(guī)方法進(jìn)行。冰凍切片將病雞的法氏囊切成約3cm×3cm的小塊，置冷臺(tái)上，以6%明膠做支持物，迅速冷凍。立即用冰凍切片機(jī)切片，溫度在-16～-20℃之間。切片厚約5um，丙酮固定，準(zhǔn)備染色。標(biāo)本如需保存，應(yīng)在-20℃以下密封保存。步驟2：染色。首先將熒光抗體用0.005M、pH值為7.2的PBS稀釋?zhuān)跇?biāo)本片上滴加熒光抗體稀釋液，然后置濕盒中，37℃感作30min取出。接著先以pH值為7.2的PBS沖洗，繼以自來(lái)水沖洗5min左右，后以蒸餾水沖洗，自然干燥或風(fēng)扇吹干。最后滴加緩沖甘油封片（無(wú)熒光甘油9份，pH值為7.2的PBS 1份）。步驟3：鏡檢。以熒光顯微鏡于暗室中觀察。

（3）結(jié)果判定。若胞漿內(nèi)不出現(xiàn)顆粒狀或彌散狀特異熒光判為陰性，用“一”表示。若胞漿內(nèi)出現(xiàn)顆粒狀或彌散狀特異熒光判為陽(yáng)性：“+”表示1%～25%的細(xì)胞出現(xiàn)熒光;“++”表示25%～50%的細(xì)胞出現(xiàn)熒光;“+++”表示50%～75%的細(xì)胞出現(xiàn)熒光;熒光強(qiáng)度用“++++”表示75%以上的細(xì)胞出現(xiàn)熒光。

5預(yù)防與控制

該病尚無(wú)治療方法。對(duì)污染雞場(chǎng)在空舍后進(jìn)行嚴(yán)格的消毒，效果有限?？墒褂枚喾N不同的低致病性的雞胚苗或細(xì)胞苗，在1～21日齡時(shí)進(jìn)行點(diǎn)眼、飲水或皮下注射。母源抗體對(duì)疫苗的免疫應(yīng)答有干擾，使用毒力稍強(qiáng)的疫苗株可減少較高水平抗體的影響。對(duì)于肉雞群（以及一些商品蛋雞），將育雛早期階段的雛雞母源抗體維持在較高水平，可減少早期感染以及隨后出現(xiàn)的免疫抑制。

種雞群在生長(zhǎng)期，應(yīng)進(jìn)行一次或多次免疫接種，首次可使用活苗免疫，開(kāi)產(chǎn)前用油乳劑滅活苗再次免疫。可使用雞胚、法氏囊組織或細(xì)胞培養(yǎng)制成的滅活苗。與活苗相比，滅活苗產(chǎn)生的抗體水平更高、更均勻，免疫期也更長(zhǎng)。應(yīng)使用病毒中和試驗(yàn)或ELISA等血清學(xué)定量檢測(cè)方法，定期監(jiān)測(cè)種雞的抗體水平。如果母雞的抗體水平下降，則應(yīng)再次免疫接種，使其后代維持足夠的免疫力。