毛毅 曾義嵐 吳桂輝 江智豪 范琳

機(jī)體的免疫功能低下是引起潛伏性結(jié)核感染及活動(dòng)性結(jié)核病的因素之一[1]。宿主對(duì)結(jié)核分枝桿菌(MTB)免疫應(yīng)答主要由巨噬細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞(NK細(xì)胞)、淋巴細(xì)胞等完成，這些細(xì)胞可介導(dǎo)機(jī)體的固有及適應(yīng)性免疫應(yīng)答[2]，其中T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的適應(yīng)性免疫在結(jié)核病的發(fā)展及轉(zhuǎn)歸起著關(guān)鍵性的作用[3]。肺結(jié)核患者由于存在著耐藥、并發(fā)癥、年齡、聯(lián)合用藥等復(fù)雜因素的影響，使得不同患者的免疫應(yīng)答可能存著較大差異，患者的免疫應(yīng)答差異可能影響患者的療效，因此研究肺結(jié)核患者臨床特征對(duì)于免疫應(yīng)答的影響也可能成為未來(lái)結(jié)核病免疫治療研究的切入點(diǎn)。本研究連續(xù)性收集同濟(jì)大學(xué)附屬上海市肺科醫(yī)院的1000例肺結(jié)核患者的臨床信息及流式細(xì)胞(T淋巴細(xì)胞亞群及NK細(xì)胞)檢測(cè)結(jié)果，通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，以便能發(fā)現(xiàn)肺結(jié)核患者的各種臨床特征與流式細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果之間是否存在相關(guān)性。

資料和方法

一、研究對(duì)象

回顧性、連續(xù)性收集同濟(jì)大學(xué)附屬上海市肺科醫(yī)院2019年1月1日至5月25日收治的確診及臨床診斷為肺結(jié)核的患者1000例。肺結(jié)核的診斷根據(jù)《WS 288—2017肺結(jié)核診斷》[4]進(jìn)行。

二、儀器和方法。

1.儀器：采用Epics XL型流式細(xì)胞儀(美國(guó)Beckman Coulter公司)。

2.方法：抽取患者空腹靜脈血2 ml，肝素抗凝，進(jìn)行熒光標(biāo)記，100 μl全血與CD3-異硫氰酸熒光素(FITC)/CD16CD5藻紅蛋白(PE)熒光雙標(biāo)記單克隆抗體(法國(guó)Immunotech公司)室溫反應(yīng)20 min，加入Optilyse C溶血素(法國(guó)Immunotech公司)500 μl充分混勻，磷酸鹽緩沖液(PBS)洗滌重懸細(xì)胞，檢測(cè)血中CD3+T細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞、CD3-CD16+CD56+細(xì)胞(NK細(xì)胞)陽(yáng)性表達(dá)率。

三、記錄與收集

記錄患者所有外周血流式細(xì)胞染色結(jié)果、性別、年齡、初/復(fù)治、有無(wú)并發(fā)癥、有無(wú)并發(fā)肺外結(jié)核、痰抗酸染色涂片、呼吸道標(biāo)本(痰液和纖維支氣管鏡沖洗液)的BACTEC MGIT 960液體培養(yǎng)及藥物敏感性試驗(yàn)(簡(jiǎn)稱“藥敏試驗(yàn)”)、MTB分子生物學(xué)檢測(cè)(包括GeneXpert MTB/RIF檢測(cè)和MTB DNA/RNA檢測(cè))、胸部CT檢查(肺部病灶范圍、空洞數(shù)量、最大空洞直徑)。根據(jù)《中國(guó)耐多藥和利福平耐藥結(jié)核病治療專家共識(shí)(2019年版)》[5]的規(guī)定， MDR-TB(耐多藥結(jié)核病)是指結(jié)核病患者感染的MTB體外藥敏試驗(yàn)證實(shí)至少同時(shí)對(duì)異煙肼和利福平耐藥的結(jié)核病。XDR-TB(廣泛耐藥結(jié)核病)是指結(jié)核病患者感染的MTB體外藥敏試驗(yàn)證實(shí)同時(shí)對(duì)異煙肼和利福平耐藥，還對(duì)任何喹諾酮類藥品耐藥，以及3種二線注射類藥品(卷曲霉素、卡那霉素和阿米卡星)中的至少1種耐藥的結(jié)核病。初治肺結(jié)核：(1)尚未開始抗結(jié)核藥品治療的患者;(2)正進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化療方案用藥而未滿療程的患者;(3)不規(guī)則化療<1個(gè)月的患者。復(fù)治肺結(jié)核:(1)初治失敗的患者；(2)規(guī)則用藥滿療程后痰菌又復(fù)陽(yáng)的患者;(3)不規(guī)律化療>1個(gè)月的患者;(4)慢性排菌患者。

四、納入患者的臨床特征

1.一般情況：1000例肺結(jié)核患者，男625例，女375例，年齡為11～92歲，中位年齡33歲，年齡分布以20～<40歲為主，占44.0%。確診肺結(jié)核(以病原學(xué)、病理學(xué)結(jié)果作為確診依據(jù))479例；臨床診斷[以病原學(xué)(包括細(xì)菌學(xué)、分子生物學(xué))檢查為主，結(jié)合流行病史、臨床表現(xiàn)和胸部影像學(xué)特征、相關(guān)的輔助檢查及鑒別診斷等，進(jìn)行綜合分析做出診斷]521例。初治肺結(jié)核769例，復(fù)治肺結(jié)核231例；有1種或以上并發(fā)癥的患者170例，其中并發(fā)糖尿病123例、并發(fā)慢性阻塞性肺疾病(COPD)78例、并發(fā)支氣管擴(kuò)張56例、并發(fā)乙型病毒性肝炎45例、并發(fā)肺外結(jié)核者320例。

2.患者的臨床特征：1000例患者中，呼吸道標(biāo)本抗酸染色涂片陽(yáng)性298例，陽(yáng)性率29.8%。BACTEC MGIT 960培養(yǎng)陽(yáng)性479例，陽(yáng)性率47.9%；藥敏試驗(yàn)結(jié)果提示MDR-TB/XDR-TB 77例，GeneXpert MTB/RIF檢測(cè)陽(yáng)性339例，陽(yáng)性率33.9%。呼吸道標(biāo)本MTB的DNA/RNA檢測(cè)陽(yáng)性423例，陽(yáng)性率42.3%。

3. 胸部CT檢查重點(diǎn)觀察如下指標(biāo)。(1)肺部病灶范圍：無(wú)病灶累及肺野55例，累及1個(gè)肺野197例，累及2個(gè)肺野129例，累及3個(gè)肺野173例，累及4個(gè)肺野88例，累及5個(gè)肺野37例，累及6個(gè)肺野321例。(2)肺部空洞數(shù)量：無(wú)空洞780例，1個(gè)空洞138例，2個(gè)空洞48例，3個(gè)空洞16例，4個(gè)空洞13例，5個(gè)空洞1例，6個(gè)及以上空洞4例。(3)最大空洞直徑：在肺部有空洞的220例患者中，收集每例患者肺部最大的空洞直徑進(jìn)行分析，其中最大值為9.03 cm，最小值為0.10 cm，中位數(shù)為1.67 cm。

五、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

1.變量賦值標(biāo)準(zhǔn)：(1)呼吸道標(biāo)本抗酸染色分級(jí)賦值。-=0；+=1；++=2；+++=3；++++=4。(2)病灶范圍分級(jí)賦值。0個(gè)肺野=0；1個(gè)肺野=1；2個(gè)肺野=2；3個(gè)肺野=3；4個(gè)肺野=4；5個(gè)肺野=5；6個(gè)肺野=6。(3)分子生物學(xué)檢測(cè)(包括GeneXpert MTB/RIF檢測(cè)、MTB DNA/RNA檢測(cè))賦值。設(shè)定任何一項(xiàng)分子生物學(xué)檢測(cè)陽(yáng)性=1；所有標(biāo)本的分子生物學(xué)檢測(cè)陰性=0。(4)其他各項(xiàng)賦值。男性=1；女性=0。初治=1；復(fù)治=0。無(wú)肺外結(jié)核=0；并發(fā)肺外結(jié)核=1。無(wú)并發(fā)癥=0；有并發(fā)癥=1。藥敏試驗(yàn)全敏感=0，MDR-TB/XDR-TB=1。為了解各年齡段患者與流式細(xì)胞亞群數(shù)量的相關(guān)性，將患者分為0～歲、20～歲、40～歲及≥60歲4個(gè)年齡組進(jìn)行分析；引入4個(gè)啞變量：age1(0～<20歲=1，≥20歲=0)、age2(20～<40歲=1，<20歲及≥40歲=0)、age3(40～<60歲=1，<40歲及≥60歲=0)、age4(≥60歲=1，<60歲=0)。

2. 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:所有資料采用Excel 2013建立數(shù)據(jù)庫(kù)，數(shù)據(jù)采用Eviews 8.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。分別以流式細(xì)胞亞群計(jì)數(shù)“CD3+T細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞、CD3-CD16+CD56+細(xì)胞(NK細(xì)胞)”為因變量；以各臨床特征“性別、年齡、初/復(fù)治、有無(wú)并發(fā)癥、并發(fā)肺外結(jié)核、呼吸道標(biāo)本抗酸染色涂片、呼吸道標(biāo)本的BACTEC MGIT 960液體培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)、MTB分子生物學(xué)檢測(cè)(包括GeneXpert MTB/RIF檢測(cè)、MTB DNA/RNA檢測(cè))、胸部CT檢查(肺部病灶范圍、空洞數(shù)量、最大空洞直徑)”為自變量。采用最小二乘法建立多元線性逐步回歸模型，通過(guò)逐一剔除無(wú)明顯影響的臨床特征，最終建立多元線性逐步回歸模型，分析以上臨床特征對(duì)外周血流式細(xì)胞計(jì)數(shù)的影響。以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

一、 各項(xiàng)臨床特征與CD3+ T細(xì)胞的相關(guān)性分析

通過(guò)各項(xiàng)臨床特征與外周血CD3+T細(xì)胞檢測(cè)值進(jìn)行多元線性逐步回歸分析，最終模型顯示肺部病灶范圍與CD3+T細(xì)胞數(shù)量呈負(fù)相關(guān)，回歸系數(shù)-0.255，P<0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；表明肺部病灶范圍越大，CD3+T細(xì)胞數(shù)量越低?？顾崛旧科?yáng)性與CD3+T細(xì)胞數(shù)呈負(fù)相關(guān)，回歸系數(shù)-0.499，P<0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；表明隨著抗酸染色涂片陽(yáng)性程度越高，其CD3+T細(xì)胞數(shù)量越少(表1)。其余臨床特征經(jīng)過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)P值均>0.05，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，經(jīng)逐步回歸分析逐一剔除；證明這些臨床特征與CD3+T細(xì)胞的表達(dá)水平無(wú)明顯相關(guān)性。該項(xiàng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)的回歸模型R2=0.558，擬合度可，且模型的P<0.05，證明模型具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

二、 各項(xiàng)臨床特征與CD4+ T細(xì)胞的相關(guān)性分析

通過(guò)各項(xiàng)臨床特征與外周血CD4+T細(xì)胞檢測(cè)值進(jìn)行多元線性逐步回歸分析，最終模型顯示：0～<20歲年齡段(age1)與患者CD4+T細(xì)胞有相關(guān)性，回歸系數(shù)-4.710，P<0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明0～<20歲年齡段患者CD4+T細(xì)胞低于其他年齡段患者。患者的性別與CD4+T有相關(guān)性，回歸系數(shù)-2.150，P<0.05，表明在肺結(jié)核患者中男性患者CD4+T細(xì)胞數(shù)低于女性患者；此外，患者的呼吸道標(biāo)本MTB的分子生物學(xué)檢測(cè)結(jié)果與CD4+T淋巴的檢測(cè)數(shù)值有相關(guān)性，回歸系數(shù)1.433，P<0.05，表明分子生物學(xué)檢測(cè)陽(yáng)性的患者其CD4+T細(xì)胞比值高于分子生物學(xué)檢測(cè)呈現(xiàn)陰性的肺結(jié)核患者(表2)。其余臨床特征經(jīng)過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)P>0.05，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，經(jīng)逐步回歸分析逐一剔除，證明這些臨床特征與CD4+T細(xì)胞的表達(dá)水平無(wú)明顯相關(guān)性。該統(tǒng)計(jì)模型顯示回歸模型R2=0.334，模型的P<0.05，證明該項(xiàng)統(tǒng)計(jì)模型具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

三、 各項(xiàng)臨床特征與CD8+ T細(xì)胞的相關(guān)性分析

通過(guò)各項(xiàng)臨床特征與外周血CD8+T細(xì)胞檢測(cè)值進(jìn)行多元線性逐步回歸分析，最終模型顯示：初治/復(fù)治與CD8+T細(xì)胞數(shù)量有相關(guān)性，回歸系數(shù)1.247，P<0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，即初治患者CD8+T細(xì)胞數(shù)量大于復(fù)治患者；抗酸染色涂片陽(yáng)性同CD8+T細(xì)胞數(shù)量呈正相關(guān)，回歸系數(shù)0.442，P<0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明隨著抗酸染色涂片陽(yáng)性程度越高，其CD8+T細(xì)胞數(shù)量越高(表3)。其余臨床特征經(jīng)過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)P>0.05，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，經(jīng)逐步回歸分析逐一剔除，證明這些臨床特征與CD8+T細(xì)胞的表達(dá)水平無(wú)明顯相關(guān)性。該統(tǒng)計(jì)模型顯示回歸模型R2=0.331，模型的P<0.05，證明該項(xiàng)統(tǒng)計(jì)模型具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

四、各項(xiàng)臨床特征與NK細(xì)胞的相關(guān)性分析

通過(guò)各項(xiàng)臨床特征與外周血NK細(xì)胞檢測(cè)值進(jìn)行多元線性逐步回歸分析，最終模型顯示：是否并發(fā)肺外結(jié)核與NK細(xì)胞有相關(guān)性， 回歸系數(shù)0.375，P<0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，證明并發(fā)肺外結(jié)核患者NK細(xì)胞低于未并發(fā)肺外結(jié)核患者(表4)。其余臨床特征經(jīng)過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)P>0.05，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，經(jīng)逐步回歸分析逐一剔除，證明這些臨床特征與NK細(xì)胞的表達(dá)水平無(wú)明顯相關(guān)性。該統(tǒng)計(jì)模型顯示回歸模型R2=0.894，模型的P<0.05，證明該項(xiàng)統(tǒng)計(jì)模型具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

討 論

由于MTB是胞內(nèi)寄生菌，在結(jié)核病發(fā)病過(guò)程中宿主的T細(xì)胞(CD3+、CD4+、CD8+)及NK細(xì)胞在宿主免疫抵抗MTB感染中發(fā)揮著重要的作用[6]。MTB與宿主之間的相互作用決定著疾病的進(jìn)展，由此導(dǎo)致不同的患者可有不同的臨床特征及免疫表達(dá)特征[7]。本研究旨在通過(guò)大樣本統(tǒng)計(jì)學(xué)分析肺結(jié)核患者的臨床特征與其外周血免疫細(xì)胞表達(dá)水平之間的相關(guān)性。

表1 1000例肺結(jié)核患者各項(xiàng)臨床特征與外周血CD3+ T細(xì)胞的多元線性逐步回歸模型

表2 1000例肺結(jié)核患者各項(xiàng)臨床特征與外周血CD4+ T細(xì)胞的多元線性逐步回歸模型

表3 1000例肺結(jié)核患者各項(xiàng)臨床特征與外周血CD8+ T細(xì)胞的多元線性逐步回歸模型

表4 1000例肺結(jié)核患者各項(xiàng)臨床特征與外周血NK細(xì)胞的多元線性逐步回歸模型

一、肺結(jié)核患者臨床特征與CD3+T細(xì)胞數(shù)量的相關(guān)性

1．肺部病變范圍越大，CD3+T細(xì)胞數(shù)量越少：Morais-Papini[8]的研究指出肺部病變的程度會(huì)影響保護(hù)性細(xì)胞因子的分泌水平。Fan等[9]的研究顯示重癥空洞性肺結(jié)核患者的CD3+CD4+T細(xì)胞數(shù)量下降。本研究顯示肺部病灶范圍與CD3+T細(xì)胞的數(shù)量呈負(fù)相關(guān)，肺部病灶范圍越大，則CD3+T細(xì)胞數(shù)量越少，與前面的研究結(jié)果一致。因此，肺結(jié)核患者肺部病灶的病理?yè)p傷程度越重，越不利于患者的保護(hù)性細(xì)胞免疫水平的發(fā)揮。 T淋巴細(xì)胞亞群在結(jié)核病患者外周血中分布失衡，可能與疾病的發(fā)展相關(guān)，兩者互為因果[10]。

2．呼吸道標(biāo)本抗酸染色涂片陽(yáng)性程度越高，其CD3+T細(xì)胞數(shù)量越低：以往很少有學(xué)者關(guān)注抗酸染色涂片與患者T淋巴細(xì)胞數(shù)量的關(guān)系，而抗酸染色涂片的結(jié)果一定程度上反映了肺結(jié)核患者體內(nèi)感染MTB的載荷。本研究發(fā)現(xiàn)抗酸染色涂片與CD3+T細(xì)胞數(shù)量呈負(fù)相關(guān)，表明隨著抗酸染色涂片陽(yáng)性程度增加，其CD3+T細(xì)胞數(shù)量越低，患者免疫功能下降越明顯。因此研究痰抗酸染色與CD3+T淋巴細(xì)胞數(shù)量的相關(guān)性具有重要意義。

二、肺結(jié)核患者臨床特征與CD4+ T細(xì)胞數(shù)量的相關(guān)性

眾所周知，CD4+T細(xì)胞在控制結(jié)核感染中起著非常重要的作用，以CD4+T細(xì)胞特異性免疫應(yīng)答及其通過(guò)分泌γ干擾素(interferon-γ，IFN-γ)刺激負(fù)載MTB的巨噬細(xì)胞活化構(gòu)成了抗結(jié)核免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)。

1.患者的年齡與CD4+T細(xì)胞表達(dá)有關(guān)：林俊錦等[11]報(bào)道老年人肺結(jié)核組CD4+T細(xì)胞及CD4+/CD8+比值低于與青壯年組及健康組。井楠等[12]通過(guò)40例肺結(jié)核患者的研究發(fā)現(xiàn)老年患者的血清CD4+T細(xì)胞明顯低于青年、中年患者。但本研究則顯示0～<20歲年齡段患者CD4+T細(xì)胞數(shù)量低于其他年齡段患者。分析其原因：青少年肺結(jié)核患者的肺部病灶及免疫受損的程度可能嚴(yán)重于成年人及中老年患者。

2.肺結(jié)核患者中男性患者CD4+T細(xì)胞數(shù)低于女性患者：Hussain等[13]通過(guò)50例患者研究表明性別差異并未影響T淋巴細(xì)胞亞群；但是本次研究通過(guò)大樣本數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn)，肺結(jié)核患者CD4+T細(xì)胞數(shù)量男性低于女性患者。

3.分子生物學(xué)檢測(cè)陽(yáng)性肺結(jié)核患者的CD4+T細(xì)胞數(shù)量高于陰性者：本次研究還發(fā)現(xiàn)，分子生物學(xué)檢測(cè)陽(yáng)性患者CD4+T細(xì)胞數(shù)量大于分子生物學(xué)檢測(cè)陰性患者，表明當(dāng)機(jī)體被MTB感染，機(jī)體通過(guò)調(diào)節(jié)，提高CD4+T細(xì)胞數(shù)量，以增加IFN-γ的分泌抑制結(jié)核的免疫逃逸。因此分子生物學(xué)檢測(cè)陽(yáng)性可能與機(jī)體的CD4+T細(xì)胞數(shù)量密切相關(guān)。

三、肺結(jié)核患者臨床特征與CD8+ T細(xì)胞數(shù)量的相關(guān)性

1.復(fù)治肺結(jié)核患者CD8+T細(xì)胞數(shù)量低于初治患者：黃麗靜等[14]對(duì)76例肺結(jié)核患者的研究發(fā)現(xiàn)復(fù)治患者的CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)量大于初治患者，但來(lái)自沈潔等[15]的研究顯示：初/復(fù)治患者CD8+T淋巴細(xì)胞無(wú)明顯變化。本次研究的數(shù)據(jù)顯示，復(fù)治肺結(jié)核患者CD8+T細(xì)胞數(shù)量低于初治患者；這與國(guó)外研究結(jié)論一致，CD8+T細(xì)胞在MTB感染初期肺中的細(xì)胞數(shù)量會(huì)出現(xiàn)升高[16]。從理論上分析，復(fù)治肺結(jié)核患者病情普遍偏重、耐藥結(jié)核病發(fā)生率高，且經(jīng)過(guò)初治治療失敗、復(fù)發(fā)等過(guò)程的因素可能引起體內(nèi)某種調(diào)控機(jī)制影響CD8+T細(xì)胞增殖，從而導(dǎo)致細(xì)胞數(shù)量下降。

2.呼吸道標(biāo)本抗酸染色涂片陽(yáng)性程度增加，其CD8+T細(xì)胞表達(dá)的數(shù)量增加：本研究的數(shù)據(jù)還顯示抗酸染色涂片陽(yáng)性程度與CD8+T細(xì)胞數(shù)量呈正相關(guān)，即隨著抗酸染色涂片陽(yáng)性程度增加，其CD8+T細(xì)胞表達(dá)的數(shù)量增加，這個(gè)結(jié)論與國(guó)外某些學(xué)者的研究相似。Guglielmetti等[17]觀察到肺結(jié)核患者CD8+T細(xì)胞的陽(yáng)性數(shù)值較健康對(duì)照組增加。而Yang 等[18]的研究則認(rèn)為，盡管在MTB感染期間CD8+T細(xì)胞反應(yīng)強(qiáng)烈且持續(xù)，但CD8+T細(xì)胞不能完全識(shí)別受感染的巨噬細(xì)胞，導(dǎo)致CD8+T細(xì)胞的免疫保護(hù)效應(yīng)受到影響。此外，活動(dòng)性肺結(jié)核患者CD8+T細(xì)胞升高的原因還可能在于：(1)體內(nèi)的細(xì)胞毒性CD8+T細(xì)胞反應(yīng)性擴(kuò)增以抵抗MTB的入侵；(2)CD4+T細(xì)胞數(shù)量下降導(dǎo)致的CD8+T細(xì)胞數(shù)量升高。以上研究結(jié)論及推測(cè)仍然需要進(jìn)行深入研究予以證實(shí)。

四、肺結(jié)核患者臨床特征與NK細(xì)胞的相關(guān)性

NK細(xì)胞是CD3-CD16+CD56+的細(xì)胞亞群，可介導(dǎo)宿主的固有免疫反應(yīng)。Ye 等[19]研究發(fā)現(xiàn)，NK細(xì)胞在肺結(jié)核患者和健康對(duì)照組中差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本次研究結(jié)果則提示，并發(fā)肺外結(jié)核患者NK細(xì)胞數(shù)量低于未并發(fā)肺外結(jié)核患者，證實(shí)了NK細(xì)胞數(shù)量降低可能導(dǎo)致MTB的全身播散，從而導(dǎo)致肺外結(jié)核的增加。

此外，雖然陸恩詞和朱穎蔚[20]的研究提示肺結(jié)核并發(fā)糖尿病患者T淋巴細(xì)胞亞群低于單純肺結(jié)核，但是本次研究中并未發(fā)現(xiàn)肺結(jié)核的并發(fā)癥(本研究中170例患者發(fā)生并發(fā)癥，其中包括123例并發(fā)糖尿病)與CD3+T細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞及NK細(xì)胞表達(dá)具有相關(guān)性。

本次研究雖然樣本量較大，分析具有很強(qiáng)的客觀性，但尚存在一定的局限性，回顧性研究分析指標(biāo)較多，建立的多元線性回歸模型由于變量較多，變量間存在比較復(fù)雜的聯(lián)系和干擾，可能影響分析結(jié)果，亟待未來(lái)進(jìn)一步優(yōu)化研究方案、進(jìn)行更深入的研究來(lái)予以證實(shí)。

本次研究運(yùn)用多元線性回歸模型將肺結(jié)核患者的臨床特征與T淋巴細(xì)胞亞群中的CD3+T細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞、NK細(xì)胞進(jìn)行了大樣本的研究，發(fā)現(xiàn)肺結(jié)核患者的肺部病灶范圍及抗酸染色涂片與CD3+T細(xì)胞表達(dá)有關(guān)，肺部病灶范圍越大，CD3+T細(xì)胞數(shù)量越低；抗酸染色涂片陽(yáng)性程度越高，CD3+T細(xì)胞數(shù)量越少。患者的年齡、性別、分子生物學(xué)檢測(cè)結(jié)果與CD4+T細(xì)胞表達(dá)有關(guān)，0～<20歲年齡段患者CD4+T細(xì)胞低于其他年齡段患者，肺結(jié)核患者中男性患者CD4+T細(xì)胞數(shù)低于女性患者；分子生物學(xué)檢測(cè)陽(yáng)性患者的CD4+T細(xì)胞數(shù)量高于陰性患者?；颊叱踔?復(fù)治和抗酸染色涂片結(jié)果與CD8+T細(xì)胞表達(dá)有關(guān)，初治患者CD8+T細(xì)胞數(shù)量大于復(fù)治患者；抗酸染色涂片陽(yáng)性程度越高，CD8+T細(xì)胞數(shù)量越高。是否并發(fā)肺外結(jié)核與NK細(xì)胞的表達(dá)有關(guān)，并發(fā)肺外結(jié)核患者NK細(xì)胞低于未并發(fā)肺外結(jié)核患者。這些臨床特征相關(guān)性的免疫差異性表達(dá)可能成為未來(lái)免疫治療研究的切入點(diǎn)。

志謝本文統(tǒng)計(jì)學(xué)分析由上海外國(guó)語(yǔ)大學(xué)經(jīng)濟(jì)管理學(xué)院張耿教授指導(dǎo)，在此表示衷心感謝。