陳玉萍，戴碗琴，馬善源

上海交通大學(xué)附屬第一人民醫(yī)院松江分院檢驗科，上海 201600

結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌感染引起的慢性傳染性疾病，是一種傳染性很強(qiáng)，經(jīng)空氣傳播的疾病。一旦感染結(jié)核分枝桿菌，如不及時診斷并采取有效的控制措施，發(fā)展為結(jié)核病時，可累及全身多個器官，造成嚴(yán)重的身體損害[1]。肺結(jié)核的治療包括多種藥物的長期給藥，正確的使用抗結(jié)核藥物通常對結(jié)核治療效果顯著。然而，結(jié)核分枝桿菌有可能對一種或更多種的藥物產(chǎn)生耐藥性，使治療更加困難。耐藥結(jié)核的防治是一項長期的系統(tǒng)性工程，包括合理的使用抗結(jié)核藥物，及時診斷、規(guī)范治療和管理等。加強(qiáng)肺結(jié)核患者的督導(dǎo)和管理，采取積極措施減少耐藥菌的傳播，對指導(dǎo)臨床合理用藥有積極意義。

為了解松江區(qū)新發(fā)肺結(jié)核病患者不同性別和年齡的患病及耐藥情況，為耐藥結(jié)核病的防治提供參考依據(jù)，現(xiàn)對本院2014年1月至2018年12月1 114例肺科門診新登記結(jié)核病患者液體培養(yǎng)陽性并經(jīng)抗酸染色鏡檢確認(rèn)為抗酸桿菌的菌株進(jìn)行分析，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2014年1月至2018年12月本院肺科門診新登記結(jié)核病患者液體培養(yǎng)陽性并經(jīng)抗酸染色鏡檢確認(rèn)為抗酸桿菌的菌株1 114例。

1.2儀器與試劑 液體分枝桿菌快速全自動培養(yǎng)儀、液體分枝桿菌培養(yǎng)基、培養(yǎng)添加劑及消化液購自美國BD公司；抗酸染色液購自珠海BASO生物技術(shù)有限公司。

1.3方法

1.3.1涂片抗酸染色 囑患者留取即時痰、夜間痰、次日晨痰共3次，涂片抗酸染色操作和質(zhì)控方法均參照《結(jié)核病診斷實驗室檢驗規(guī)程》[2]。

1.3.2液體培養(yǎng) 挑取約5～<10 mL痰液至50 mL已標(biāo)記的離心試管中，加入等量的2%N-乙酰-L-半胱氨酸-NaOH標(biāo)本前處理液(<10 mL)，強(qiáng)力漩渦振蕩20 s后室溫靜置15～20 min，再加入pH6.8的無菌磷酸鹽緩沖液至50 mL，蓋緊蓋子,3 000×g離心15 min，倒掉上清液，沉淀中加入1～3 mL pH6.8的無菌磷酸鹽緩沖液制成懸濁液，取處理后標(biāo)本0.5 mL接種至已加入0.8 mL的分枝桿菌培養(yǎng)添加劑(分枝桿菌培養(yǎng)添加劑可以抑制雜菌生長促進(jìn)分枝桿菌培養(yǎng))的培養(yǎng)管進(jìn)行液體培養(yǎng)，接種完成后的培養(yǎng)管上機(jī)檢測。

1.3.3菌群鑒定及藥物敏感試驗 采用硝基苯甲酸和噻吩-2-羧酸肼鑒別培養(yǎng)法對上述液體培養(yǎng)陽性并經(jīng)抗酸染色確認(rèn)為抗酸桿菌的標(biāo)本進(jìn)行初篩及鑒定；采用傳統(tǒng)比濁法檢測獲得純培養(yǎng)的結(jié)核分枝桿菌菌株藥物敏感性。鑒定方法按照《結(jié)核病診斷實驗室檢驗規(guī)程》和《結(jié)核病耐藥監(jiān)測指南》[2-3]。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理 所有數(shù)據(jù)錄入Excel軟件，建立原始資料數(shù)據(jù)庫，使用SPSS 22.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料以例數(shù)和百分率表示，行χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1總體患病情況 經(jīng)鑒定，結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群患者1 007例。其中男734例，女273例，年齡分布為0～89歲，參照松江區(qū)肺結(jié)核疫情分析將年齡劃分為8個階段[4]。各年齡階段患病人群中，男性占大多數(shù)且主要集中在15～<45歲，隨著年齡的增長，男女比例呈上升趨勢，在65～<75歲年齡段達(dá)到高峰，男女比例為8.37(59∶7)，隨后在78～89歲下降到4.22(59∶14)。見表1、2。

表1 總體患病情況[n(%)]

表2 1 007例新發(fā)肺結(jié)核病患者性別年齡構(gòu)成[n(%)]

2.21 007例新發(fā)肺結(jié)核病患者耐藥情況 2014-2018年的耐藥率分別為15.51%(29/187)、22.11%(44/199)、17.09%(40/234)、14.28%(26/182)，13.17%(27/205)，四種一線藥物5年總單耐藥率鏈霉素最高為6.06%(61/1 007)，依次為異煙肼2.28%(23/1 007)、利福平0.60%(6/1 007)、乙胺丁醇0.10%(1/1 007)。5年的總耐藥率為16.48%(166/1 007)。單耐藥[9.04%(91/1 007)]>耐2種藥[3.57%(36/1 007)]>耐3種藥[2.28%(23/1 007)]>耐4種藥[1.59%(16/1 007)]。不同年齡段的耐藥人數(shù)不同，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=14.658，P=0.041)。見表3、4。

表3 1 007例新發(fā)肺結(jié)核病患者耐藥情況[n(%)]

表4 1 007例新發(fā)肺結(jié)核病患者耐藥情況

3 討 論

2014-2018年松江區(qū)新發(fā)肺結(jié)核病患者的患病率有較大幅度的上升，而總耐藥率呈下降趨勢。一方面與本區(qū)“三位一體”的防治模式有關(guān)[5]，另一方面本區(qū)結(jié)核預(yù)防工作尤其是登記率及疫情報告質(zhì)量提高，使結(jié)核患者的發(fā)現(xiàn)率升高。

本研究中肺結(jié)核病患者主要患病年齡段為15～<45歲，表明肺結(jié)核在本區(qū)主要危害社會勞動力人群的身體健康和生命安全，對社會生產(chǎn)和經(jīng)濟(jì)發(fā)展影響較大[6]。65～89歲年齡段近5年患病率依次為11.23%(21/181)，11.06%(22/199)，12.39%(29/234)，16.48%(30/182)，18.05%(37/205)，呈上升趨勢，與上海人口老齡化有關(guān)，現(xiàn)在的老年人經(jīng)歷過我國結(jié)核病流行最嚴(yán)峻的年代，絕大多數(shù)人曾感染過結(jié)核分枝菌，埋下了復(fù)燃的“種子”。隨著城市人口流動加劇，加大了老年人再感染肺結(jié)核的概率。老年肺結(jié)核感染既有內(nèi)源性復(fù)燃因素，也有外源性再次感染的可能[7-8]，對本區(qū)疫情構(gòu)成的影響不容忽視。

有研究顯示，當(dāng)機(jī)體處于免疫力低下或受損的情況下，感染肺結(jié)核的概率比較大，男女之間患病的陽性率不同，且女性比男性的陽性率高[9-10]。而本研究發(fā)現(xiàn)各年齡組新發(fā)肺結(jié)核病患病人數(shù)男性多于女性，與2010年全國第5次結(jié)核病流行病學(xué)抽樣調(diào)查結(jié)果一致[11]。這與男性承受的體力勞動較多，青壯年大批涌入城市務(wù)工，以及男性往往有吸煙、飲酒等不良嗜好等綜合因素有關(guān)，提示應(yīng)加強(qiáng)中青年男性的結(jié)核病預(yù)防控制工作。

耐藥水平是檢測結(jié)核病控制成效的重要指標(biāo)[12]，本研究中新發(fā)肺結(jié)核病患者對4種抗結(jié)核藥物的總耐藥率從高到低依次為鏈霉素、異煙肼、利福平、乙胺丁醇，從耐藥數(shù)量的分布來看，單耐藥>耐2種藥>耐3種藥>耐4種藥。藥物因素是造成耐藥結(jié)核病的基礎(chǔ)，濫用藥物、不規(guī)范治療及對患者的督導(dǎo)管理不善，患者的治療依從性差是產(chǎn)生耐藥的主要原因，但研究提示，傳播才是耐藥性結(jié)核病的重要原因[13]。結(jié)核分枝桿菌傳統(tǒng)細(xì)菌學(xué)檢測方法耗時長，痰培養(yǎng)需要4～6周，表型藥物敏感雖然具有較高的準(zhǔn)確度和認(rèn)可度，但獲得數(shù)據(jù)的周期較長，藥物敏感試驗需要的時間會在痰培養(yǎng)時間的基礎(chǔ)上再加1個月，這就嚴(yán)重影響了患者的診療進(jìn)度，使結(jié)核分枝桿菌的傳播不能及時控制。因此需要推廣快速、準(zhǔn)確、經(jīng)濟(jì)的新結(jié)核病檢測技術(shù)，縮短肺結(jié)核及耐藥肺結(jié)核的診斷時間，減少耐藥結(jié)核菌的傳播[13-14]。

綜上所述，松江區(qū)新發(fā)肺結(jié)核病患者的患病及耐藥情況均以青壯年男性為主，需要加強(qiáng)醫(yī)防合作，采取得力措施，合理作息，定期體檢，減少青壯年男性耐藥的發(fā)生。