李志紅
隨著生活水平的提升,人們更加重視生活飲用水的質(zhì)量。國(guó)家相關(guān)部門將飲用水的微生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)歸納為:細(xì)菌總數(shù)<100CFU/ml,總大腸菌群和耐熱大腸菌群不得檢出,不得檢測(cè)出致病菌。但水中所存在的部分微生物在實(shí)際檢測(cè)時(shí)有一定的難度,如何做好這些微生物的檢測(cè)尤為關(guān)鍵。
一、水樣的采集
水樣的采集是開展后續(xù)檢測(cè)的第一步,也是整個(gè)檢測(cè)工作中直觀重要的環(huán)節(jié)。水樣采集包括自來(lái)水樣品采集和地表水樣品采集兩類,自來(lái)水樣品采集一般是從自來(lái)水龍頭直接獲取,需要注意的一點(diǎn)是,在采集前需要先對(duì)水龍頭作殺菌處理,可以選用酒精燈外焰加熱,然后等待水流出10分鐘左右再采集。地表水樣品采集需要保證其深度和樣品的有效性,采集深度一般為15cm左右,可以選擇井水、江河湖水;如果水樣中含有氯,則需要在采集前加入硫代硫酸鈉溶液清除余氯。除此之外,水樣采集過程中要做好記錄,包括采集時(shí)的溫度、濕度、采集人員、方法等,確保水樣不會(huì)出現(xiàn)被污染的情況,轉(zhuǎn)運(yùn)和保存過程中也需要重點(diǎn)控制,并確保水樣采集后在4h內(nèi)完成微生物檢測(cè)。
二、菌落總數(shù)的檢測(cè)
菌落總數(shù)檢測(cè)常用的方式為平皿計(jì)數(shù)法,先對(duì)所使用的器皿做滅菌處理,而后將培養(yǎng)瓊脂倒在平板,同時(shí)用吸管吸取1ml水樣滴至平板,均勻涂開;當(dāng)培養(yǎng)時(shí)間滿足48h要求后,即可進(jìn)行培養(yǎng)皿中菌落數(shù)的計(jì)算工作。另外,需要再進(jìn)行平行接種試驗(yàn),設(shè)置空白對(duì)照組繼續(xù)培養(yǎng)。
三、總大腸菌落的檢測(cè)
總大腸菌落的代表是大腸桿菌,目前對(duì)總大腸菌落的檢測(cè)方法主要是濾膜法、多管發(fā)酵法及酶底法。濾膜法是指采用微孔濾膜對(duì)水樣加以過濾,通常選用的微孔濾膜濾徑為0.45μm,先制作品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基,而后在培養(yǎng)基上貼上濾膜,接種微生物,當(dāng)培養(yǎng)基在培養(yǎng)箱中的培養(yǎng)時(shí)間足夠24h后即可開始檢測(cè)。多管發(fā)酵法指利用多個(gè)試管對(duì)大腸菌落加以檢測(cè),其操作流程如下:先在兩個(gè)50ml的燒瓶中加入事先配制好的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液,各加入100ml水樣;在10支含有5ml三倍乳糖蛋白胨發(fā)酵管中各加入10ml水樣,充分混合均勻后在37℃環(huán)境下培養(yǎng)24h,24h未產(chǎn)氣的繼續(xù)培養(yǎng);培養(yǎng)工作完成后,取出試管在MPN表上查表記錄。
四、耐熱大腸菌落的檢測(cè)
耐熱大腸菌群指可以在44.5℃環(huán)境下生存的大腸菌群,通常采用濾膜法和多管發(fā)酵法加以檢測(cè),其檢測(cè)原理是通過不斷提升微生物培養(yǎng)溫度,從而區(qū)分自然環(huán)境與糞便中的大腸桿菌。
五、大腸埃希氏菌的檢測(cè)
目前,通常采用濾膜法和酶底物檢驗(yàn)法對(duì)大腸埃希氏菌加以檢測(cè)。濾膜法是選用NA-MUG培養(yǎng)基并加入熒光物質(zhì),在37℃環(huán)境下培養(yǎng);酶底物檢驗(yàn)法是指在44.5℃環(huán)境下選用EC-MUG培養(yǎng)基,向菌群培養(yǎng)代謝所產(chǎn)生的酶中加入熒光底物,最后用紫外燈照射計(jì)算菌落數(shù)量。
生活飲用水的水質(zhì)事關(guān)人們的身體健康,在檢測(cè)過程中要嚴(yán)格按照相關(guān)的規(guī)范操作,有針對(duì)性地對(duì)各種微生物加以檢測(cè),以此確保人們對(duì)生活飲用水可以喝得放心、喝得健康。