鐘育富,劉升*,張琪,盧裕億
1(上海海洋大學(xué) 食品學(xué)院,上海, 201306)2(北京市農(nóng)林科學(xué)院蔬菜研究中心,北京, 100097)
菜心,全國(guó)各地普遍種植,周年生產(chǎn),菜心屬于葉菜類蔬菜[1],因其品質(zhì)柔嫩,清新可口,深受廣大消費(fèi)者喜愛(ài)。菜心中含水量占92%,富含大量的蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物、豐富的VC和其他礦物質(zhì),極其具有營(yíng)養(yǎng)價(jià)值[2]。菜心采收后在20 ℃存放1 d容易失水,葉綠素總量下降25%,第2天會(huì)開(kāi)始出現(xiàn)葉片黃化[3],容易出現(xiàn)黃化、失水萎蔫等現(xiàn)象,流通腐損率極高約30%。25 ℃條件下,菜心只能存放2 d左右。
乙烯作為重要激素之一,會(huì)加速果蔬的衰老和劣變,加快葉綠素的分解,被認(rèn)為是調(diào)控果蔬品質(zhì)優(yōu)劣的關(guān)鍵激素。菜心采后在冷藏過(guò)程會(huì)產(chǎn)生少量乙烯,加快菜心的黃化和衰老,縮短了菜心商品壽命。因此菜心冷藏期間需要采取各種措施,以減少菜心乙烯釋放量[4]。而1-甲基環(huán)丙烯(1-methylcyclopropene,1-MCP)可與乙烯受體上的金屬離子結(jié)合,可抑制復(fù)合物的形成,阻斷乙烯誘導(dǎo)信號(hào)傳導(dǎo)[5-8]。因此,在乙烯大量產(chǎn)生之前,采用1-MCP先與乙烯受體結(jié)合,阻斷乙烯與受體的結(jié)合。1-MCP大量被使用到果蔬保鮮上,以延緩了落花、落果和果實(shí)成熟等現(xiàn)象[9]。張魯斌等[10]、ZHANG[11]研究發(fā)現(xiàn),采用1-MCP處理能夠有效地抑制菜心呼吸和延緩葉片黃化的速度,但會(huì)使呼吸高峰提前了1 d。而徐港明等[12]研究發(fā)現(xiàn),1-MCP可以延緩菜心蛋白質(zhì)、可溶性糖等營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的下降,保持菜心抗氧化活性,增強(qiáng)自身抗性,延長(zhǎng)菜心的商品壽命。
臭氧作為一種安全的消毒滅菌的方式,已成為農(nóng)產(chǎn)品貯藏保鮮的重要方法之一[12]。臭氧不僅對(duì)果蔬有殺菌抑制作用,而且處理過(guò)程中對(duì)果蔬造成其他影響很小[13]。同時(shí),臭氧也可以降解果蔬中釋放的乙烯,調(diào)節(jié)果蔬的代謝,降低果蔬的呼吸作用,還可誘導(dǎo)其表皮氣孔縮小,減少水分蒸騰[14],同時(shí)還可以影響酶的活性[15-16]。陸勝民等[9]研究表明臭氧抑制了青花菜的黃化,延緩了青花菜中葉綠素的降解,抑制了類胡蘿卜素的合成。梁蕓志等[17]研究表明臭氧處理可抑制黃瓜的的失重率,維持葉綠素和VC含量,提高其采后貯藏品質(zhì)。而徐冬穎等[16]研究表明臭氧可抑制菠菜葉綠素及VC含量的下降。因此,本文采用1-MCP和臭氧處理菜心,結(jié)合防霧抑菌膜包裝,以無(wú)膜包裝作為對(duì)照,研究不同處理方式對(duì)菜心冷藏營(yíng)養(yǎng)及品質(zhì)的影響。
1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
試驗(yàn)品種為“四九”菜心,2019年6月24號(hào)采自北京市房山區(qū)廣泰農(nóng)場(chǎng),采后立即運(yùn)輸至國(guó)家蔬菜技術(shù)研究中心。挑選長(zhǎng)度均勻、無(wú)病蟲(chóng)害和機(jī)械損傷、生長(zhǎng)良好的菜心用于實(shí)驗(yàn)。防霧抑菌膜采購(gòu)于上海復(fù)命新材料有限公司,主要由聚乙烯薄膜和納米材料混合制成,主要有防霧功能,具有一定的抑菌效果。
1.1.2 儀器與設(shè)備
CYYL-36 型壓差預(yù)冷裝置,日本樽崎產(chǎn)業(yè)株式會(huì)社;YDHI91610C 型多點(diǎn)測(cè)溫儀,北京昆侖通態(tài)自動(dòng)化軟件科技有限公司;KOITO-PCLH冷庫(kù),日本小糸公司;PR-100折射儀,日本ATAGO公司;Thermo D-37520高速冷凍離心機(jī),塞維斯科技(北京)有限公司;UV-1800紫外可見(jiàn)分光光度計(jì),島津國(guó)際貿(mào)易有限公司;HW.SY11-K恒溫水浴鍋,北京市長(zhǎng)風(fēng)儀器儀表公司;UWA-K-015型電子秤,北京華瑞京科商貿(mào)中心。
1.2.1 不同處理方法
將挑選好的菜心移進(jìn)壓差預(yù)冷庫(kù),將溫度自測(cè)儀的探針?lè)謩e插入不同塑料筐的菜心中部,每筐4個(gè),記錄菜心溫度,然后將標(biāo)準(zhǔn)可折疊塑料箱放于標(biāo)準(zhǔn)托盤(pán)上,碼放在風(fēng)道兩側(cè),蓋上擋風(fēng)簾,利用抽風(fēng)扇使箱體兩側(cè)造成壓力差,預(yù)冷庫(kù)庫(kù)溫設(shè)為0 ℃。將菜心中心溫度預(yù)冷至3 ℃左右,停止預(yù)冷。預(yù)冷結(jié)束后,菜心采用4種不同處理。
(1)1-MCP+防霧抑菌膜:菜心放置在10 μL/L 1-MCP熏蒸24 h,然后采用防霧抑菌膜包裝;
(2)臭氧+防霧抑菌膜:0.56 mg/L臭氧處理菜心10 min,然后采用防霧抑菌膜包裝;
(3)防霧抑菌膜:菜心直接用防霧抑菌膜包裝,每袋12根。
(4)CK:菜心沒(méi)有防霧膜包裝貯藏在0 ℃作為對(duì)照組。每種處理都貯藏在0 ℃下,每4 d測(cè)1次,每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)。
1.2.2 失重率
采用稱重法,每個(gè)處理分3組菜心,測(cè)定其初始質(zhì)量(M0)與冷藏后的質(zhì)量(Mt),與初始質(zhì)量比較,換算成失重率,如公式(1)所示:
(1)
1.2.3 硬度
選取菜心中部,用GY-4數(shù)顯硬度計(jì)測(cè)定菜心硬度,單位N。
1.2.4 可溶性固形物
將菜心切成細(xì)碎塊狀,稱取菜心3~5 g,放入紗布后,用研缽研碎,將研磨后的汁液滴在已調(diào)零的折射儀PR-100上,在折射儀上直接讀數(shù),以蒸餾水的讀數(shù)為對(duì)照,每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)。
1.2.5 VC含量
A:5%鉬酸銨;B:0.05 mol/L草酸-0.2 mmol/L EDTA提取液;C:5%硫酸;D:偏磷酸-乙酸混合液。測(cè)量方法:選取1 g樣品,加入5 mL的提取液B,放置在13 000 r/min的高速冷凍離心機(jī)中,在4 ℃溫度環(huán)境下離心30 min,離心后收集上清液。取2 mL上清液依次加入3 mL提取液B,0.5 mL試劑D,1 mL試劑C,2 mL試劑A,添加完成后搖勻上述混合液。將混合液在80 ℃水浴鍋中加熱10 min,冷卻后加蒸餾水定容至10 mL。以草酸-EDTA為空白對(duì)照,測(cè)定760 mm處吸光度值。每個(gè)樣品重復(fù)處理3次,計(jì)算結(jié)果用每100 g樣品中VC含量表示。VC計(jì)算如公式(2)所示:
(2)
式中:ω,標(biāo)準(zhǔn)曲線的VC含量,mg/g;V1,比色體積,mL;V,樣品提取液的總體積,mL;V2,加樣量,mL;M,樣品質(zhì)量。
1.2.6 可溶性蛋白
參考考馬斯亮藍(lán)G-250法測(cè)定。將菜心樣品切碎后,用磨樣機(jī)磨成粉末,稱量1.0 g樣品,加入5 mL蒸餾水后,在4 ℃、13 000 r/min離心30 min,收集上清液,取1 mL上清液,加入5.0 mL考馬斯亮藍(lán)G-250溶液,充分混合放置2 min后,采用分光光度計(jì)在波長(zhǎng)595 nm處測(cè)定吸光度值,重復(fù)3次。
1.2.7 黃化指數(shù)
隨機(jī)選取3組菜心,根據(jù)每顆菜心的黃化面積分為5個(gè)等級(jí):0級(jí)葉片,無(wú)黃化葉片;1級(jí)葉片,黃化面積占總?cè)~片0%~25%;2級(jí)葉片,黃化面積占總?cè)~片25%~50%;3級(jí)葉片,黃化面積占總?cè)~片50%~75%;4級(jí)葉片,黃化面積占總?cè)~片75%~100%。
(3)
1.2.8 葉綠素
先配制好V(丙酮)∶V(乙醇)=2∶1的混合液,將菜心樣品切碎后,用磨樣機(jī)磨成粉末,稱取1 g樣品,放入20 mL試管中,加入5 mL混合液,配平,在4 ℃下13 000 r/min離心30 min,使葉綠素得以充分提取。取上清液,以提取液為對(duì)照,在645 nm和663 nm波長(zhǎng)下測(cè)定其吸光度值,重復(fù)3次。根據(jù)公式(4)計(jì)算葉綠素含量:
葉綠素含量/[mg·g-1Fw)]=
(4)
式中:V為提取液的體積,20 mL;W為樣品質(zhì)量,1 g。
1.2.9 感官評(píng)分[18]
感官評(píng)價(jià)分為1~9分,9分為剛采收時(shí)的新鮮果實(shí),7分為好,5分為菜心商品性界限,3分為不能銷售但可食用,1分為不能食用,其中6分為菜心的銷售界限。感官評(píng)分考慮色澤、形態(tài)、氣味等方面,感官評(píng)分由3名專業(yè)人員打分,取平均值[19]。
采用Origin 8.5繪圖,以SPSS 19.0軟件進(jìn)行顯著性分析。
如圖1所示。貯藏過(guò)程中,1-MCP+防霧抑菌膜、臭氧+防霧抑菌膜和防霧抑菌膜處理的菜心感官品質(zhì)顯著優(yōu)于對(duì)照組(P<0.01)。貯藏4 d,對(duì)照組菜心感官評(píng)分降為6.03分。而貯藏28 d,1-MCP+防霧抑菌膜、臭氧+防霧抑菌膜和防霧抑菌膜處理的感官評(píng)價(jià)得分分別為6.56、6.33、5.86分,普通冷藏的菜心已接近商品界限,而其他處理組貯藏時(shí)間遠(yuǎn)遠(yuǎn)長(zhǎng)于對(duì)照組。因此1-MCP+防霧抑菌膜、臭氧+防霧抑菌膜、防霧抑菌膜和CK處理的貯藏壽命分別為28、28、24、4 d。實(shí)驗(yàn)說(shuō)明1-MCP、臭氧處理和薄膜包裝都可以有效的延長(zhǎng)菜心的保質(zhì)期。
表1 菜心的感官評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)[19]Table 1 Standard of Chinese flowering cabbage sensory evaluation
失重率是衡量菜心新鮮度的主要指標(biāo)之一,其中CK處理的菜心在整個(gè)貯藏期間失重明顯,貯藏4 d,失重率便高達(dá)8.9%。而1-MCP、臭氧處理和薄膜包裝處理下的菜心貯藏28 d失重率僅僅為4.17%、4.31%、4.82%。方差分析結(jié)果表明,不同處理方法對(duì)菜心感官評(píng)價(jià)和失重率的影響差異顯著(P<0.05)。菜心流通過(guò)程中的水分損失主要由蒸騰作用引起,而低溫結(jié)合薄膜包裝能夠抑分水分散失,其中薄膜包裝對(duì)菜心失重起主要作用。而1-MCP處理前期可以抑制菜心呼吸強(qiáng)度,延緩菜心衰老[20]。因此,菜心經(jīng)壓差預(yù)冷、1-MCP+防霧抑菌膜可以更好的延長(zhǎng)菜心的貯藏時(shí)間。
圖2 不同處理方法處理后的菜心Fig.2 Chinese flowering cabbage at different treatment methods
黃化是菜心衰老的一個(gè)重要標(biāo)志,其乙烯密切相關(guān)[21]。葉綠素含量是菜心冷藏品質(zhì)的關(guān)鍵指標(biāo),葉綠素分解速度的快慢可以直接影響菜心的黃化速度[22]。如圖2所示,4種不同處理方法相比,CK處理的菜心葉綠素在貯藏期間下降明顯,這是由于失水和乙烯的產(chǎn)生加速了葉綠素的降解[23]。而低溫加薄膜包裝可以有效的抑制酶的活性,減少菜心葉綠素的損失。貯藏28 d,1-MCP+防霧抑菌膜、臭氧+防霧抑菌膜、防霧抑菌膜菜心的黃化指數(shù)和葉綠素含量分別為13.22%、14.61%、16.61%和0.236、0.226、0.183 mg/g。方差分析結(jié)果表明,不同處理方法對(duì)菜心黃化指數(shù)和葉綠素的影響差異極顯著(P<0.01)。黃化是影響菜心外觀與品質(zhì)的一個(gè)重要指標(biāo)。而薄膜包裝對(duì)菜心葉綠素保留有一定積極的影響。因此,菜心經(jīng)壓差預(yù)冷,采用1-MCP和臭氧處理都有利于葉綠素的保留和減緩黃化。
圖3 不同處理方法對(duì)菜心黃化指數(shù)和葉綠素的影響Fig.3 Effect of different treatment methods on yellow index and chlorophyll of Chinese flowering cabbage
在葉菜類蔬菜中,菜心的蛋白質(zhì)含量非常高,菜心采后可溶性蛋白質(zhì)1.125 mg/g。4種不同處理方法相比,CK處理的菜心可溶性蛋白含量在貯藏期間下降略高于其他處理組。貯藏28 d,1-MCP+防霧抑菌膜、臭氧+防霧抑菌膜、防霧抑菌膜菜心的可溶性蛋白和可溶性固形物含量分別為0.562、0.526、0.492 mg/g和3.33%、3.23%、3.43%。而菜心可溶性固形物含量在冷藏過(guò)程中隨著時(shí)間呈先升后下降趨勢(shì)。分析由于貯藏初期菜心體內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝旺盛,所含大分子被水解為小分子,導(dǎo)致可溶性固形物含量增加。而菜心在貯藏期間的水分流失也是影響菜心可溶性固形物一個(gè)重要原因。實(shí)驗(yàn)表明,低溫加1-MCP可以抑制菜心蛋白質(zhì)的下降[20],延長(zhǎng)菜心保質(zhì)期。
圖4 不同處理方法對(duì)菜心可溶性蛋白質(zhì)和固形物的影響Fig.4 Effect of different treatment methods on soluble solids of Chinese flowering cabbage
菜心中VC含量豐富,同時(shí)也可以反映出菜心組織細(xì)胞衰老的變化情況。但是VC極不穩(wěn)定極,易受外界影響而發(fā)生不可逆降解。菜心初始VC含量74.33 mg/100g,預(yù)冷后VC含量損失了1.34%。4種處理方法相比,CK組的菜心VC降解最快。貯藏28 d, 1-MCP+防霧抑菌膜、臭氧+防霧抑菌膜、防霧抑菌膜菜心VC含量分別為32.57、30.57、28.74 mg/100g。因此,菜心經(jīng)壓差預(yù)冷,采用1-MCP和臭氧處理都有利于更好保持菜心VC含量,采用防霧膜包裝貯藏在0 ℃下的菜心,都能很好地保持菜心的VC含量。
硬度是評(píng)價(jià)菜心新鮮程度的一個(gè)關(guān)鍵指標(biāo)。一般剛采摘后菜心質(zhì)感清脆,隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng),因呼吸作用等生理活動(dòng)以及不斷的衰老過(guò)程,故使菜心失水,導(dǎo)致細(xì)胞膨壓的減小,最終造成菜心硬度減小[24]。預(yù)冷前菜心硬度為39.4 N,4種不同處理方法相比,CK處理的菜心硬度在貯藏期間有明顯的下降。貯藏28 d, 1-MCP+防霧抑菌膜、臭氧+防霧抑菌膜、防霧抑菌膜菜心的硬度分別為27.4、27.6、25.4 N。實(shí)驗(yàn)表明,菜心經(jīng)1-MCP+防霧抑菌膜、臭氧+防霧抑菌膜處理都能更有利于減緩菜心軟化,延長(zhǎng)商品壽命。
本研究表明,沒(méi)有薄膜包裝的菜心冷藏商品壽命只有4 d左右。貯藏4 d后,菜心感官評(píng)分6.03分,接近商品性界限,菜心失水萎蔫,失重率、黃化指數(shù)高達(dá)8.9%、1.29%,營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)損失嚴(yán)重。而防霧膜包裝的菜心冷藏24 d時(shí),感官評(píng)分降至6.15分。接近商品性界限。1-MCP+防霧抑菌膜、臭氧+防霧抑菌膜處理菜心的商品壽命可延長(zhǎng)至30 d。冷藏28 d,1-MCP+防霧膜包裝處理的菜心感官評(píng)價(jià)、失重率、黃化指數(shù)、可溶性固形物、VC、葉綠素、可溶性蛋白含量分別為6.56分、4.17%、13.22%、3.33%、32.57 mg/100g、0.236 mg/g、0.562 mg/g,營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)略優(yōu)于臭氧+防霧膜包裝的菜心,和防霧抑菌膜處理相比,1-MCP+防霧抑菌膜對(duì)菜心黃化和葉綠素?fù)p失有著一定的抑制作用,同時(shí)也減少VC等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的損失,延長(zhǎng)菜心商品壽命。