食品檢測(cè)中有機(jī)磷農(nóng)藥的常用檢測(cè)方法應(yīng)用研究

于貴全

蘭陵縣檢驗(yàn)檢測(cè)中心 山東臨沂 277700

農(nóng)藥在農(nóng)作物生產(chǎn)過(guò)程中有著重要的應(yīng)用，農(nóng)藥的使用可以有效的防止農(nóng)作物的病蟲(chóng)害，提高農(nóng)作物產(chǎn)量，但是當(dāng)前有機(jī)磷農(nóng)藥濫用問(wèn)題比較突出，造成農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留超標(biāo)。農(nóng)藥殘留超標(biāo)會(huì)帶來(lái)比較嚴(yán)重的食品安全問(wèn)題，近年來(lái)食品安全問(wèn)題頻繁出現(xiàn)，嚴(yán)重威脅了人民的身體健康，人們?cè)絹?lái)越重視食品安全問(wèn)題?，F(xiàn)代生活節(jié)奏越發(fā)越快，而貿(mào)易往來(lái)越發(fā)頻繁快捷，因此食品安全檢測(cè)手段也朝著現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)方向發(fā)展。本文對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥的常用檢測(cè)方法進(jìn)行了探討[1]。

1 色譜法

色譜法是比較常用的農(nóng)藥檢測(cè)方法，其工作原理是根據(jù)分析物質(zhì)在流動(dòng)相和固定相之間分配系數(shù)來(lái)實(shí)現(xiàn)不同物質(zhì)的分離，然后將分析物質(zhì)的濃度轉(zhuǎn)化為電流、電壓等信號(hào)，最終計(jì)算出所要測(cè)量物質(zhì)的濃度。在有機(jī)磷農(nóng)藥檢測(cè)方面，色譜法具有比較廣泛的應(yīng)用，高效液相色譜法、氣相色譜法和薄層色譜法都可以應(yīng)用于有機(jī)磷農(nóng)藥的檢測(cè)，下面對(duì)這三種方法進(jìn)行介紹[2]。

1.1 高效液相色譜法（HPLC）

近年來(lái)高效液相色譜（HPLC）技術(shù)越發(fā)成熟，在各種物質(zhì)中微量性農(nóng)藥的檢測(cè)中有了越來(lái)越廣泛的應(yīng)用。相較于氣相色譜法，液相色譜法具有多方面的優(yōu)點(diǎn)，不僅具有更高的靈敏度，同時(shí)檢測(cè)速度也更快，具有更好的分離效能，應(yīng)用范圍也更加廣泛。在進(jìn)行有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥檢測(cè)過(guò)程中，諸如水胺硫磷、甲胺磷、敵百蟲(chóng)等有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥對(duì)熱不穩(wěn)定，容易裂解變質(zhì)，以及克線磷等有機(jī)磷農(nóng)藥沸點(diǎn)太高而不易氣化，都可以使用HPLC 來(lái)進(jìn)行檢測(cè)。例如，邵金良等采用基質(zhì)固相分散萃取技術(shù)—高效液相色譜法檢測(cè)番茄中的6類(lèi)有機(jī)磷農(nóng)藥，結(jié)果顯示加標(biāo)回收率均超過(guò)了80．00%，且相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均不超過(guò)10．00%[3]。

1.2 薄層色譜法（TLC）

薄層色譜法（TLC）是一種應(yīng)用非常廣泛的檢測(cè)方法，這主要是由于其具有微量、快速的特點(diǎn)。TLC 的工作原理如下：首先根據(jù)待測(cè)物的性質(zhì)選擇合適的溶劑進(jìn)行提取，然后使其在薄層硅膠板上分離展開(kāi)，然后再經(jīng)過(guò)純化濃縮，在顯色后將其和標(biāo)準(zhǔn)有機(jī)磷農(nóng)藥比較Rf 值，從而對(duì)其進(jìn)行定性。薄層色譜法便于掌握，而且操作簡(jiǎn)單，能夠準(zhǔn)確定性，因此在有機(jī)磷農(nóng)藥的檢測(cè)中具有比較廣泛的應(yīng)用[4]。

1.3 氣相色譜法（GC）

氣相色譜法是應(yīng)用最為廣泛的儀器檢測(cè)方法之一，其是建立在傳統(tǒng)的檢測(cè)方法之中，綜合了傳統(tǒng)檢測(cè)方法的優(yōu)點(diǎn)，又加以創(chuàng)新而來(lái)的。應(yīng)用氣相色譜法檢測(cè)有機(jī)磷農(nóng)藥的主要步驟如下，首先根據(jù)待測(cè)物的性質(zhì)選擇合適的溶劑進(jìn)行提取，然后經(jīng)過(guò)濃縮和純化，然后將其注入到色譜柱中，不同的有機(jī)磷農(nóng)藥會(huì)在固定相中實(shí)現(xiàn)分離，然后經(jīng)過(guò)程序升溫氣化，再進(jìn)入到檢測(cè)器檢測(cè)，最終描繪出氣相色譜圖。不同的有機(jī)磷農(nóng)藥可以根據(jù)保留時(shí)間來(lái)進(jìn)行定性，然后根據(jù)峰面積或者是峰高和標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)照來(lái)進(jìn)行定量。應(yīng)用氣相色譜法檢測(cè)有機(jī)磷農(nóng)藥，可以檢測(cè)熱穩(wěn)定性較好，同時(shí)又比較容易氣化的有機(jī)磷農(nóng)藥，其可以一次性測(cè)量多個(gè)組分，具有較高的靈敏度和準(zhǔn)確性，檢測(cè)也比較方便快捷。AOAC 對(duì)大部分有機(jī)磷農(nóng)藥，如乙拌磷、豐索磷、馬拉硫磷、對(duì)硫磷等都建立了氣相色譜的檢測(cè)方法，且檢測(cè)效果都十分良好。例如，南京熙等利用氣流式微注射萃取——?dú)庀嗌V結(jié)合氫火焰檢測(cè)器測(cè)定蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留，28 中有機(jī)磷農(nóng)藥線性相關(guān)系數(shù)超過(guò)0．99，檢出限可以達(dá)到0．3-1．2μg/kg。

2 免疫法

免疫法也可以用于有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥的檢測(cè)，相較于上述幾種檢測(cè)方法，免疫法具有一些獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。免疫法是基于抗原體的反應(yīng)進(jìn)行檢測(cè)的，其能夠?qū)悠分写嬖诘奈⒘课镔|(zhì)進(jìn)行準(zhǔn)確的檢測(cè)，由于抗原抗體反應(yīng)具有敏感性和特異性等特點(diǎn)，免疫法具有就較高的準(zhǔn)確性，當(dāng)前這種檢測(cè)方法已經(jīng)獲得了非常普遍的應(yīng)用，應(yīng)用這種方法進(jìn)行有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥的檢測(cè)時(shí)，只需要獲得特異性的抗體就可以了。例如，Marcos J．C．et al． 研究了農(nóng)藥毒死蜱的多克隆抗體和單克隆抗體的研究，交叉反應(yīng)顯示所有的抗體對(duì)毒死蜱的芳香環(huán)都有特異性，并對(duì)細(xì)胞融合的雜交瘤特性和功能性進(jìn)行了研究[5]。

3 酶抑制法

酶抑制法利用有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥的毒理機(jī)理來(lái)進(jìn)行有機(jī)磷農(nóng)藥的檢測(cè)，應(yīng)用這種方法可以抑制乙酸膽堿酶的活性，從而降低酶分解乙酰膽堿的速度，或者使其停止，在反應(yīng)過(guò)程中反應(yīng)程度可以使用一些規(guī)則的特定顏色來(lái)反應(yīng)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥的檢測(cè)，利用這種方法對(duì)樣品中的農(nóng)藥進(jìn)行快速的檢測(cè)，人們對(duì)這種方法進(jìn)行了大量的研究，現(xiàn)在已經(jīng)開(kāi)發(fā)除了酶膜生物傳感器和快速檢測(cè)儀等。通過(guò)酶抑制法進(jìn)行農(nóng)藥檢測(cè)，不僅操作簡(jiǎn)便、效率高，同時(shí)不需要使用昂貴的儀器，因此在大批樣品篩選檢測(cè)以及現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)中具有重要的應(yīng)用，這種方法對(duì)于各類(lèi)有機(jī)磷農(nóng)藥的靈敏度存在一定的差別，相較于其它檢測(cè)方法檢測(cè)效率也比較低，在回收率和重復(fù)性方面也存在于一定問(wèn)題，還需要進(jìn)一步完善。