□ 李 熒 阜新市檢驗(yàn)檢測(cè)認(rèn)證中心
我國(guó)是農(nóng)業(yè)大國(guó),隨著時(shí)代的不斷前進(jìn),我國(guó)經(jīng)濟(jì)實(shí)力不斷增強(qiáng),使得人們開始重視食品安全問題。吳限鑫等人對(duì)糧油食品中常見的真菌毒素的毒性進(jìn)行了綜合分析,并分析了近年國(guó)內(nèi)外相關(guān)霉菌毒素限量及檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的修訂進(jìn)展[1]。翟晨等人對(duì)中國(guó)及歐盟的真菌霉素限量標(biāo)準(zhǔn)及種類進(jìn)行梳理,發(fā)現(xiàn)歐盟真菌毒素限量標(biāo)準(zhǔn)種類多于我國(guó),且考慮因素較為全面,并對(duì)我國(guó)現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)的修訂提出了建議[2]。對(duì)于保證糧油食品安全,真菌毒素檢測(cè)具有重要作用。如何提高糧油食品的真菌毒素檢測(cè)技術(shù),是我國(guó)食品安全相關(guān)研究人員需要密切關(guān)注的問題。
糧油中的真菌毒素由真菌代謝而來,對(duì)糧油的品質(zhì)有著重要影響。糧油食品是人類賴以生存的基礎(chǔ)物質(zhì),在其生產(chǎn)、加工、存儲(chǔ)、運(yùn)輸?shù)拳h(huán)節(jié)容易受到真菌毒素的污染,而真菌毒素會(huì)危害生物體的健康。糧油食品中常見的真菌毒素對(duì)人體可能造成的潛在危害有損傷臟器、抑制免疫系統(tǒng)、生殖異常、造成畸變和癌變等,因此真菌毒素一直是國(guó)內(nèi)外食品安全的重點(diǎn)關(guān)注問題。糧油食品中的真菌毒素不僅會(huì)對(duì)人體健康造成危害,對(duì)農(nóng)產(chǎn)品出口也會(huì)產(chǎn)生重要影響,因此,開展糧油食品的真菌毒素檢測(cè)技術(shù)研究具有重要意義。
目前國(guó)內(nèi)常用的糧油食品中真菌毒素的檢測(cè)方法有免疫分析法、薄層色譜法和儀器分析法。
免疫化學(xué)法不僅對(duì)特異抗體具有高選擇性還具有較高的靈敏度,是真菌篩選的常規(guī)檢測(cè)方法。
2.1.1 酶聯(lián)免疫分析法
酶聯(lián)免疫分析法(ELISA)是利用帶有酶標(biāo)記的抗原或抗體與待測(cè)抗體或抗原反應(yīng),生產(chǎn)酶—抗原—抗體復(fù)合物,然后加入底物,使酶—抗原—抗體復(fù)合物與底物反應(yīng),對(duì)反應(yīng)物的吸光度進(jìn)行測(cè)試,確定待測(cè)物質(zhì)的性質(zhì)和數(shù)量。酶聯(lián)免疫分析法可同時(shí)檢測(cè)大量樣品,且抗原抗體反應(yīng)具有特異性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)單,可自動(dòng)化且檢測(cè)結(jié)果較為準(zhǔn)確等優(yōu)勢(shì)。這種檢測(cè)方法的不足之處在于:關(guān)聯(lián)化合物可能發(fā)生交叉反應(yīng)、非特異性化合物結(jié)合以及吸附過程存在重現(xiàn)性不佳等問題,與色譜法相比,可能存在檢測(cè)過量的現(xiàn)象[1]。
2.1.2 膠體金免疫層析技術(shù)
膠體金免疫層析技術(shù)是一種用膠體金標(biāo)記抗體分析糧油食品中真菌毒素的方法。該方法主要根據(jù)顯色深度來比較試紙條的顏色,從而確定真菌毒素的性質(zhì)和含量。與酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)相比,該方法在判斷真菌毒素的數(shù)量和性質(zhì)方面較不準(zhǔn)確,常用于真菌毒素的快速檢測(cè)[2]。
2.1.3 放射免疫測(cè)定技術(shù)
放射免疫分析法(RIA)是一種用同位素標(biāo)記靶標(biāo)并加入特異性抗體檢測(cè)糧油食品中真菌毒素的方法。這種檢測(cè)方法的缺點(diǎn)是可能會(huì)對(duì)其他食品造成污染,檢測(cè)成本相對(duì)較高,所以目前在我國(guó)沒有得到廣泛應(yīng)用。
色譜檢測(cè)技術(shù)主要包括高壓液相色譜法、氣相色譜法和色譜—質(zhì)譜聯(lián)用法以及薄層色譜法。在現(xiàn)代儀器分析應(yīng)用中前兩者的應(yīng)用較為廣泛,色譜—質(zhì)譜聯(lián)用法結(jié)合了兩者的優(yōu)點(diǎn),在近幾年也逐漸成為檢測(cè)技術(shù)的熱點(diǎn)。色譜—質(zhì)譜聯(lián)用方法的前處理較為簡(jiǎn)單,無需進(jìn)行衍生化處理,有效節(jié)省了時(shí)間成本,該檢測(cè)方法的靈敏度極高,且結(jié)果準(zhǔn)確可靠,因此具有較好的應(yīng)用前景。
薄層色譜法(TLC)是首個(gè)用于檢測(cè)真菌毒素的色譜法,也是實(shí)驗(yàn)室中常見的真菌毒素檢測(cè)方法。該方法首先時(shí)提取樣品,再對(duì)樣品進(jìn)行濃縮處理,最后采用薄層分離。在紫外光下觀察,檢測(cè)分離物的熒光特性,最后是對(duì)真菌毒素進(jìn)行定性、定量分析。具有操作簡(jiǎn)單、成本低的優(yōu)點(diǎn)。但薄層色譜法所采用的試劑大多有毒,不利于操作人員的健康。且其準(zhǔn)確度較低、操作過程復(fù)雜、再現(xiàn)性較差,因此近年來在國(guó)際上真菌毒素檢測(cè)中的應(yīng)用逐漸減少。
本文介紹了幾種檢測(cè)糧油食品真菌毒素的常見方法,并對(duì)比了不同檢測(cè)方法的優(yōu)缺點(diǎn),望可為實(shí)際檢測(cè)過程提供一定參考。