免疫親和層析技術(shù)檢測(cè)食品安全

張家琪 王沁園 曹芙榕 王海默 徐晨

摘 要：免疫親和層析技術(shù)是食品安全檢測(cè)技術(shù)之一，主要應(yīng)用于生物大分子的分離、純化。在食品安全的檢測(cè)中，對(duì)許多大分子蛋白質(zhì)等有較準(zhǔn)確的檢測(cè)效果。可以根據(jù)抗原抗體可以特異性結(jié)合的特性，有針對(duì)性的檢測(cè)某種物質(zhì)在食品中是否存在或存在的量有多少。

關(guān)鍵詞：免疫親和層析;應(yīng)用;發(fā)展

Abstract： immunoaffinity chromatography is one of the food safety detection technologies， which is mainly used in the separation and purification of biomacromolecules. In the detection of food safety， it has a more accurate detection effect on many macromolecular proteins. It can be used to detect the presence or quantity of a substance in food according to the specific binding characteristics of antigen and antibody.

Key words： development of immunoaffinity;chromatography

免疫親和層析技術(shù)的原理

親和層析是一種吸附層析，是利用生物大分子間作用，將具有親和力的配體固定在一個(gè)不溶性基質(zhì)上，利用分子間特異性的親和力來分離純化目標(biāo)物[1]，免疫親和層析柱是利用抗體與其相應(yīng)的抗原之間存在高度親和性與高度特異性的特點(diǎn)，將抗原或是抗體固定到層析柱上，將含有抗原或抗體的樣品上樣，然后利用有效手段和溶劑將固定到層析柱上的抗原或是抗體進(jìn)行洗滌和洗脫，將雜質(zhì)洗掉，將特異性結(jié)合的目標(biāo)物質(zhì)洗脫下來[2]。

免疫親和層析技術(shù)在食品安全檢測(cè)中已經(jīng)有了許多應(yīng)用，免疫親和層析技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用離不開免疫親和柱的發(fā)展和作用。

免疫親和柱

免疫親和柱（IAC）是利用免疫親和層析原理制成的用于純化、富集目標(biāo)分離物的免疫親和柱，它可以簡(jiǎn)化樣品提取的過程，并能提高樣品的純度，對(duì)目標(biāo)物能起到很好的分離、純化富集的作用，所以IAC常被用作待測(cè)樣品的前處理。免疫親和柱的發(fā)展經(jīng)歷了較為倉(cāng)時(shí)間的發(fā)展，我國(guó)免疫親和柱法的研究和發(fā)展不僅離不開早期國(guó)外科學(xué)家的探索，更離不開我國(guó)科學(xué)家用于實(shí)踐的精神。國(guó)外學(xué)者Axen等從利用溴化氰活化的瓊脂糖作為載體開始，接著Van等于1987年首次制備出凈化豬肉中的氯霉素的免疫親和柱，此后利用免疫親和柱進(jìn)行樣品前處理的技術(shù)在醫(yī)藥和食品檢測(cè)領(lǐng)域廣泛盛行，我國(guó)李衛(wèi)崗等[3]將自制的抗黃曲霉毒素B1的抗體與溴化氰活化的瓊脂糖4B偶聯(lián)，制成免疫親和柱用于分離、純化，富集小分子物質(zhì)獲得成功，這無疑為我國(guó)其他領(lǐng)域進(jìn)一步研究免疫親和柱法，打下了良好的基礎(chǔ)。[4]

免疫親和柱可以得到認(rèn)可，與它的特性密不可分。IAC比普通的親和色譜具有更高的親和力、可逆性和特異性[5]，它最大優(yōu)點(diǎn)在于可以得到較高純度的目標(biāo)活性物質(zhì)，且操作步驟簡(jiǎn)單，花費(fèi)時(shí)間也較少，IAC是用于分離、純化的方法中效率比較高的方法之一。只要掌握好抗原與抗體的初濃度，抗原與抗體之間的親和力和抗原與抗體是否容易解離這三個(gè)方面，就能夠利用IAC的優(yōu)良特性分離、純化得到高純度的目標(biāo)活性物質(zhì)。

免疫親和層析的應(yīng)用

免疫親和層析因?yàn)椴僮骱?jiǎn)單、可定量分析、可以簡(jiǎn)單化樣品處理過程和檢測(cè)時(shí)間等優(yōu)點(diǎn)，近幾年的應(yīng)用范圍日益壯大，已經(jīng)廣泛應(yīng)用于環(huán)境保護(hù)、醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)、食品衛(wèi)生等領(lǐng)域，對(duì)各類樣本中的毒素、獸藥殘留等具有很高的純化、富集效率，已成為和睦多領(lǐng)域中重要的前處理手段之一。[6-10]

發(fā)展前景

免疫親和技術(shù)不需要使用大量的有機(jī)溶劑，對(duì)操作人員的健康不會(huì)造成極大的危害，有因?yàn)樗鄬?duì)更容易掌控，所以，正處于飛速發(fā)展的免疫親和層析技術(shù)未來一定會(huì)應(yīng)用在更多的發(fā)展領(lǐng)域。不管是對(duì)生活還是生產(chǎn)都會(huì)起到一個(gè)推動(dòng)其向著更好、更安全的方向發(fā)展

參考文獻(xiàn)：

[1] 陸健.蛋白質(zhì)純化技術(shù)及應(yīng)用[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005，137-139.

[2] PRASSOPOULOUE，KATIKOUP，GEORGANTELIS D，et al.Detection of okadaic acid and related esters in? mussels during diarrhetic shellfish poisoning （DSP） episodes in Greece using the mouse bioassay， the? PP2A inhibition assay and HPLC with fluorimetric detection[J].Toxicon，2009，53（2）：214-27.

[3] 李衛(wèi)崗，魯長(zhǎng)豪，葉梅君，等.黃曲霉毒素 Bl 免疫親和柱的制備研究[J].中國(guó)公共衛(wèi)生學(xué)報(bào)，1992，6（11）：361-362.

[4] 李琳. 大田軟海綿酸免疫親和柱的開發(fā)及初步應(yīng)用[D].吉林大學(xué)，2015.

[5] 魏文忠，魏琴.免疫親和柱技術(shù)在糧油衛(wèi)生安全檢測(cè)中的應(yīng)用研究[J].糧食科技與經(jīng)濟(jì).2014，2（39）：32-35.

[6] 吳長(zhǎng)青，馮俊，沈浥，張玉柱.動(dòng)物源性食品中抗生素殘留的分類及檢測(cè)方法的研究進(jìn)展[J].食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào)，2019，10（21）：7126-7132.

[7] 李唐，黃永震，姜艷芬，張彥明，賀花.動(dòng)物性食品藥物殘留的檢測(cè)方法和防控對(duì)策[J].食品工業(yè)，2019，40（07）：260-265.

[8] 楊杰程，劉丁溪，郭抗抗，周宏超.動(dòng)物性食品中磺胺類藥物殘留檢測(cè)方法研究進(jìn)展[J].畜牧與獸醫(yī)，2019，51（06）：134-139.

[9] 李琳. 大田軟海綿酸免疫親和柱的開發(fā)及初步應(yīng)用[D].吉林大學(xué)，2015.

[10] 王劉慶，姜冬梅，王瑤，王蒙.果品及其制品中赭曲霉毒素A污染的發(fā)生、控制和檢測(cè)[J].食品科學(xué)，2018，39（23）：289-298.

作者簡(jiǎn)介：

姓名（出生年、性別）：張家琪 1998年 女，籍貫：山東省榮成市，職稱和學(xué)歷：大學(xué)本科，研究方向或?qū)I(yè)：水產(chǎn)養(yǎng)殖學(xué)。

第二作者： 王沁園

第三作者：曹芙榕 第四作者：王海默? 第五作者：徐晨