王敏 毛明清 李男 加慧 夏書月

沈陽醫(yī)學(xué)院附屬中心醫(yī)院呼吸內(nèi)科110024

COPD 是一種具有氣流受限特征的慢性氣道炎癥性疾病，氣流受限不完全可逆，呈進(jìn)行性發(fā)展，其發(fā)病與肺部對(duì)有害氣體或有害顆粒尤其是吸煙引起的異常炎癥反應(yīng)有關(guān)[1]。據(jù)估計(jì)，目前全世界有超過3億人受到COPD 的影響，到2020年，全世界有6 800萬人死亡，其中470 萬人死于該病[2]。現(xiàn)今外泌體越來越被認(rèn)為是細(xì)胞間通訊、免疫調(diào)節(jié)、疾病診斷和預(yù)后循環(huán)生物學(xué)標(biāo)志物的重要載體[3]。許多研究報(bào)道，肺疾病患者的外泌體mi RNA 譜與健康人不同，因此外泌體mi RNA 似乎有潛力成為肺部疾病的非侵入性診斷生物標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)[4-6]。本文將介紹外泌體mi RNA 的概念及基本實(shí)驗(yàn)方法，并總結(jié)外泌體mi RNA 在COPD 的發(fā)生、發(fā)展中的作用。

1 外泌體mi RNA及其提取方法

1.1 外泌體及外泌體mi RNA 細(xì)胞可釋放具有膜結(jié)構(gòu)的多種小囊泡到胞外，這些細(xì)胞外囊泡有不同的亞群，可根據(jù)其生物發(fā)生和分泌機(jī)制的不同而分為外泌體，微囊泡和凋亡小體，其中外泌體是目前研究最熱的亞群[7]。外泌體是指包含了復(fù)雜RNA 和蛋白質(zhì)的小膜泡 (30～150 n m)，現(xiàn)今其特指直徑在40～100 n m 的盤狀囊泡[8]。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體，其主要來源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中[9]。近年來，外泌體及其mi RNA 在腫瘤、心血管、肝、肺、腎、血液系統(tǒng)疾病等領(lǐng)域的診斷、預(yù)后和治療方面顯示出良好的研究背景，且外泌體mi RNA 也極有潛力成為人類重大疾病的新型分子標(biāo)志物和治療靶標(biāo)[10]。mi RNA 是一類長度約19～24 nt的非編碼單鏈RNA，通過堿基互補(bǔ)配對(duì)的方式與靶基因的3'-UTR區(qū)部分或完全互補(bǔ)，剪切靶基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物或者抑制轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的翻譯，從而起到轉(zhuǎn)錄后調(diào)控靶基因表達(dá)的作用[11]。mi RNA 廣泛存在于動(dòng)物、植物、真菌及病毒的基因中，調(diào)控生物體生長發(fā)育和疾病發(fā)生等過程中相關(guān)基因的表達(dá)。mi RNA 的異常表達(dá)可能會(huì)導(dǎo)致生理狀態(tài)的異常和疾病的發(fā)生，在多種癌癥中，mi RNA 的表達(dá)水平會(huì)明顯改變，有可能起到原癌基因和抑癌基因的作用[12]。在呼吸系統(tǒng)疾病中，mi RNA 表達(dá)譜的臨床研究也有望促進(jìn)炎癥性呼吸疾病的診療進(jìn)展。

1.2 外泌體mi RNA 的提取、分離及檢測 同一mi RNA受不同提取方法的影響，在外泌體中檢出水平有所不同，不同方法影響RNA 片段分布和mi RNA 表達(dá)，未影響mi RNA 相對(duì)表達(dá)趨勢。黃依瑤等[13]通過采用超高速離心法+Trizol LS 法、Exo Quick+Sera Mir、TEI+TER 與Exo RNeasy試劑盒提取方法分離3例血清中外泌體總RNA(exo-RNA)，分析RNA 片段分布，檢測mi RNA 表達(dá)水平，結(jié)果表明Exo RNeasy 試劑盒僅需一步提取血清中exo-RNA，且提取RNA 條帶濃度較高，各mi RNA 表達(dá)水平較高，適用于大規(guī)模提取血清標(biāo)本進(jìn)行后續(xù)mi RNA 測序和q PCR 等實(shí)驗(yàn)。人體內(nèi)的循環(huán)mi RNA 之所以可以在外周血中穩(wěn)定存在而免于血液中核糖核酸酶的降解，是因?yàn)閙i RNA 被微泡、外泌體等囊泡包裹，或者與蛋白質(zhì)結(jié)合形成復(fù)合物，循環(huán)mi RNA 常規(guī)的提取方法是首先裂解包裹mi RNA 的膜結(jié)構(gòu)，再提取釋放入血清的游離mi RNA，但mi RNA 釋放入血液必定遭受各種干擾因素的降解，性質(zhì)極不穩(wěn)定，影響提取效率。針對(duì)以上問題，有研究提出首先從血清中分離出外泌體，使mi RNA 在被提取之前就已經(jīng)隨外泌體脫離血清了，從而大大增加了提取效率[14]。目前檢測外泌體內(nèi)mi RNA 的表達(dá)量的常用方法有Northern Blot標(biāo)準(zhǔn)檢測方法、實(shí)時(shí)定量PCR 檢測、微陣列芯片檢測和大規(guī)模測序。目前許多mi RNA 生物傳感方法需要繁瑣的樣本處理過程，包括提取總RNA，在很大程度上限制了它們?cè)谏镝t(yī)學(xué)和臨床研究中的應(yīng)用。Ra mshani等[15]提出了一種簡單、快速、無PCR 的集成微流體平臺(tái)，該平臺(tái)集成表面聲波裂解微流控芯片、濃度傳感微流控芯片和給予非平衡離子電流的動(dòng)膜傳感器，能夠?qū)ρ獫{中自由漂浮的mi RNAs和外泌體包含的mi RNAs進(jìn)行絕對(duì)定量 (＜10%的不確定性)，具有1 p m 的檢測敏感度，與傳統(tǒng)的RT-q PCR 方法不同，該技術(shù)不需要外泌體的提取、RNA純化、逆轉(zhuǎn)錄或擴(kuò)增。該平臺(tái)實(shí)驗(yàn)時(shí)間只有30 min，樣本量只需20 ml，大大減少了傳統(tǒng)RT-q PCR 技術(shù)的耗時(shí)耗量。同樣，Cao等[16]研究團(tuán)隊(duì)開發(fā)了一個(gè)集成的微流控指數(shù)滾動(dòng)循環(huán)放大平臺(tái)，用于直接在微加工樣品中檢測mi RNAs的敏感度和特異度，此方法的高敏感度立即解決了樣本消耗方面的挑戰(zhàn)。因此微流控芯片技術(shù)將為促進(jìn)mi RNA分析在生物學(xué)和臨床中的應(yīng)用提供一個(gè)有用的平臺(tái)。

2 mi RNA與COPD

2.1 mi RNA 與吸煙高危因素 COPD 的發(fā)病機(jī)制主要是慢性炎癥反應(yīng)、蛋白酶和抗蛋白酶失衡、氧化抗氧化失衡及氣道重塑，吸煙是導(dǎo)致這種異常炎癥反應(yīng)的最主要的因素。越來越多的研究報(bào)道，煙草刺激和COPD 發(fā)病相關(guān)的mi RNA 的差異表達(dá)有關(guān)。Héliot等[17]研究發(fā)現(xiàn)香煙煙霧提取物 (cigarette s moke extract，CSE)等刺激不僅可以影響細(xì)胞外囊泡的水平，還可以改變細(xì)胞外囊泡中特異性mi RNA 的表達(dá)。吸煙改變了人支氣管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid，BALF)中存在的細(xì)胞外囊泡的mi RNA 譜，從而影響周圍正常支氣管上皮細(xì)胞的狀態(tài)。通過對(duì)10名吸煙者和10名非吸煙者進(jìn)行了BALF 中細(xì)胞外囊泡的分離，比較2 組細(xì)胞外囊泡中存在的10 種mi RNA 的數(shù)量，對(duì)其進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)分析，討論了吸煙狀態(tài)的生物學(xué)意義，并評(píng)估BALF來源的細(xì)胞外囊泡中的mi RNA作為煙草暴露潛在生物標(biāo)志物的價(jià)值。研究表明，肺細(xì)胞外囊泡的組成和作用實(shí)際上取決于吸煙狀況，并且與煙草暴露對(duì)肺細(xì)胞的早期有害作用有關(guān)。

盡管研究表明，吸煙影響肺中mi RNA 的表達(dá)，并在COPD 的發(fā)展中發(fā)揮重要作用，但其確切的影響機(jī)制仍需進(jìn)一步研究。在一項(xiàng)研究中，與沒有氣流受限的吸煙者相比，COPD 患者的外周血單個(gè)核細(xì)胞有8 種mi RNAs(mi R-24-3p、mi R-93-5p、mi R-320a、mi R-320b、mi R-191-5p、let-7b-5p、mi R-342-3p 和 mi R-92a-3p)上 調(diào) 以 及3 種mi RNAs (mi R-3613-3p、mi R-1273g-3p 和 mi R-4668-5p)下調(diào)[18]。mi R-24-3p在單核細(xì)胞中持續(xù)高表達(dá)，在吸煙者中，mi R-93-5p主要在單核細(xì)胞中表達(dá)，而在COPD 患者中，mi R-93-5p在CD4+T 細(xì)胞、CD8+T 細(xì)胞和單核細(xì)胞中均表達(dá)。此外，他們還顯示，在COPD 患者中，CD8+T細(xì)胞是mi R-320a 和mi R-320b 表達(dá)增加的主要細(xì)胞類型[18]。在非吸煙者與吸煙者的比較中，一些差異表達(dá)的mi RNA 可能是由于吸煙者血液中存在不同的細(xì)胞類型 (T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞)，這些細(xì)胞釋放的細(xì)胞外囊泡/外泌體富含本研究發(fā)現(xiàn)的特定mi RNA。

Sundar等[19]驗(yàn)證了一些源自CSE 處理的人單核細(xì)胞(U937)的外泌體mi RNA，顯示大多數(shù)mi RNA 表達(dá)降低的 趨 勢 (mi R-let-7a-5p、mi R-let7i-5p、mi R-103a-3p 和mi R-151b)。他們發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組比較，CSE 處理的人類單核細(xì)胞 (傾向于下調(diào))和上皮細(xì)胞 (傾向于上調(diào))中，外泌體mi RNA 表達(dá)的方向性有很大差異。這表明在體外CSE誘導(dǎo)的細(xì)胞應(yīng)激過程中，外泌體mi RNA 的表達(dá)差異依賴的是不同的細(xì)胞類型。

Serban等[20]發(fā)現(xiàn)香煙煙霧暴露能夠提高人和小鼠血漿中的外泌體水平，以及原代人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞上清液中的外泌體水平，香煙煙霧暴露也改變了內(nèi)皮細(xì)胞外泌體的組成，增加了let-7d、mi R-191、mi R-126和mi R-125a的表達(dá)，內(nèi)皮細(xì)胞外泌體將這些mi RNA 傳遞給特化的巨噬細(xì)胞會(huì)影響凋亡細(xì)胞的清除。有研究認(rèn)為香煙煙霧誘導(dǎo)外泌體中的mi RNA 是具有選擇性的，而不是非特異性的反應(yīng)細(xì)胞內(nèi)的mi RNA 的表達(dá)，并且這些靶向效應(yīng)可能在吸煙者內(nèi)皮損傷和炎癥相關(guān)疾病的發(fā)病機(jī)制中起重要作用，如COPD。以上探討的外泌體mi RNA 在吸煙所致COPD 中差異表達(dá)的原因和作用，對(duì)于深入了解吸煙所致肺部疾病及COPD的分子機(jī)制，尋找吸煙所致機(jī)體損害的早期生物標(biāo)志物和防治措施提供了有力的證據(jù)。

2.2 外泌體mi RNA 與COPD 發(fā)病機(jī)制 COPD 是一種慢性異質(zhì)性疾病，其特征是持續(xù)和過度炎癥、氣道重塑、氣流受限和肺功能加速下降。外泌體通過旁分泌方式作用于支氣管上皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等鄰近細(xì)胞，導(dǎo)致黏液高分泌，成纖維細(xì)胞向肌成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化，巨噬細(xì)胞活化等，最終發(fā)生氣道重塑與肺氣腫[21-23]。Fujita等[24]研究，在CSE 作用下，原代人支氣管上皮細(xì)胞 (hu man bronchial epithelial cells，HBECs)衍生的細(xì)胞外囊泡可誘導(dǎo)原代成纖維細(xì)胞分化成肌成纖維細(xì)胞。經(jīng)驗(yàn)證得到，吸煙導(dǎo)致的HBECs細(xì)胞外囊泡中的mi R-210表達(dá)上調(diào)是導(dǎo)致肺成纖維細(xì)胞中這種表型改變的原因，并且在肺成纖維細(xì)胞中，mi R-210通過下調(diào)ATG7負(fù)調(diào)控自噬過程來參與mi R-210介導(dǎo)的成纖維細(xì)胞分化。同時(shí)Fujita等[25]研究得出，在肺成纖維細(xì)胞中，LC3和ATG5基因敲除的自噬抑制能夠誘導(dǎo)α-平滑肌肌動(dòng)蛋白和Ⅰ型膠原表達(dá)水平增加，并增強(qiáng)肌成纖維細(xì)胞的分化。高璇等[26]認(rèn)為，自噬是一個(gè)動(dòng)態(tài)的生物過程，在過程中某些產(chǎn)物的增多并不夠證明整個(gè)自噬過程是高水平進(jìn)行的，在COPD 患者及模型中觀察到的自噬標(biāo)記物的過表達(dá)正是自噬這一動(dòng)態(tài)過程在某一節(jié)點(diǎn)被阻斷，從而造成自噬中間產(chǎn)物堆積的表現(xiàn)，而延緩COPD 的進(jìn)展需將被阻斷的自噬過程繼續(xù)進(jìn)行，以清除侵入肺細(xì)胞的病原體、代謝廢物等，維持細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)。Li等[27]研究得出，外泌體mi R-21 在CSE 處理的HBECs中也可以促進(jìn)成纖維細(xì)胞向肌成纖維細(xì)胞分化，其作用機(jī)制是通過促進(jìn)低氧誘導(dǎo)因子1α 的表達(dá)而下調(diào)Von Hippel-Lindau蛋白，從而增加了膠原蛋白和α-平滑肌肌動(dòng)蛋白的水平。這些機(jī)制結(jié)合肌成纖維細(xì)胞分化在氣道重塑中的作用可能為COPD 的診斷和治療提供新的線索。

Wang等[28]研究指出，mi R-34可能抑制CD80和CD86的表達(dá)和干擾素α的分泌，進(jìn)而導(dǎo)致COPD 患者中的樹突狀細(xì)胞功能障礙，同時(shí)mi R-34c也被報(bào)道通過調(diào)節(jié)其靶基因HNF4和SERPINE1，與COPD 患者的肺氣腫嚴(yán)重程度密切相關(guān)[29]。Gupta等[30]研究表明氣道支氣管上皮細(xì)胞之間的外泌體mi R-34a/b/c參與調(diào)節(jié)氣道炎癥和纖維化過程。Ser ban等[20]提及香煙煙霧暴露使COPD 患者內(nèi)皮細(xì)胞外泌體來源的mi R-125a上調(diào)，但未闡明具體機(jī)制。王銳英[31]通過高通量測序發(fā)現(xiàn)mi R-125a-5p在COPD 中表達(dá)水平增高，mi R-125a-5p的升高促進(jìn)了COPD 中的巨噬細(xì)胞向M2型轉(zhuǎn)變，抗炎作用增加，分泌的促炎因子包括mi R-125a-5p的靶基因IL-16表達(dá)下調(diào)，從而推測mi R-125a-5p在COPD中可能發(fā)揮抗炎作用，是COPD 的保護(hù)因子，為COPD 提供新的治療靶點(diǎn)。此類報(bào)道證明了外泌體mi RNAs調(diào)節(jié)炎癥過程影響COPD 病程，反映了mi RNAs、炎癥調(diào)節(jié)及COPD 間的密切聯(lián)系。

2.3 外泌體mi RNA 與COPD 急性加重 急性加重是COPD 癥狀加重的發(fā)作，常與呼吸道感染同時(shí)發(fā)生。此外，病情加重會(huì)增加患者病情惡化的傾向，病情加重可能需要住院治療，這會(huì)增加COPD 的病死率，這種有害疾病的發(fā)展要求尋找能夠識(shí)別慢性阻塞性肺疾病急性加重 (acute exacerbation of chronic obstructive pul monary disease，AECOPD)的生物標(biāo)志物[32]。

Xie等[33]通過對(duì)41 名健康對(duì)照者，40 名無癥狀重度吸煙者和49 例COPD 患者的血清mi RNA 進(jìn)行分析后得出，無癥狀重度吸煙者和COPD 患者的血清mi R-21 和mi R-181a水平明顯高于健康對(duì)照組。他們認(rèn)為，血清mi R-21和mi R-181a 水平及其比值對(duì)預(yù)測重度無癥狀期COPD 的發(fā)展具有潛在的生物標(biāo)志物應(yīng)用價(jià)值。Xu等[34]證實(shí)，mi R-21在吸煙者和吸煙的COPD 患者外泌體中過表達(dá)，且 mi R-21 水平與第1 秒用力呼氣容積 (forced expiratory volu me at the first second，F(xiàn)EV1)/FVC呈正相關(guān)。由于血漿中mi RNA 的差異變化，測量外泌體mi RNA并不等同于測量mi RNA[35]。以上數(shù)據(jù)表明，血清和血清外泌體的mi R-21水平相似，經(jīng)Xu等[34]驗(yàn)證得出，血清外泌體mi R-21 與FEV1/FVC 之間的決定系數(shù)高于血清mi R-21與FEV1/FVC 之間的決定系數(shù)，提示血清外泌體mi R-21與FEV1/FVC之間存在可靠的相關(guān)性，有可能成為預(yù)測COPD 嚴(yán)重程度的生物標(biāo)志物。

Wang等[36]研究表明，長鏈非編碼RNA PVT1通過與mi R-146a的相互作用，協(xié)助COPD 的疾病管理和急性加重風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測。經(jīng)驗(yàn)證得到，mi R-146在AECOPD 患者中的表達(dá)最低，其次是穩(wěn)定的COPD 患者和健康對(duì)照者，它的預(yù)測使COPD 易感性降低，急性加重風(fēng)險(xiǎn)降低，同時(shí)，mi R-146a與AECOPD 患者和穩(wěn)定期COPD 患者的慢性阻塞性肺疾病全球倡議分期和炎癥細(xì)胞因子水平呈負(fù)相關(guān)。Sato等[37]進(jìn)一步研究得出，COPD 患者的肺纖維細(xì)胞中mi R-146a的表達(dá)水平降低，通過促進(jìn)靶基因COX-2 表達(dá)導(dǎo)致前列腺素2水平升高。前列腺素2是擴(kuò)大化和自我循環(huán)誘導(dǎo)衰老以及COPD 成纖維細(xì)胞炎癥的一個(gè)關(guān)鍵成分[38]。Alexander等[39]發(fā)現(xiàn)，來自樹突狀細(xì)胞的外泌體含有mi R-146a，它可以在體內(nèi)免疫細(xì)胞之間轉(zhuǎn)移，他們還證明，含有mi R-146a的外泌體降低了炎癥基因的表達(dá)，參與了急性肺損傷的發(fā)病機(jī)制。外泌體來源的mi R-146a是否參與COPD 的發(fā)病機(jī)制及分級(jí)有待進(jìn)一步研究，雖然目前沒有報(bào)道證實(shí)其他的外泌體mi RNA 與COPD 的嚴(yán)重程度有關(guān)，但外泌體mi RNA 在炎癥調(diào)節(jié)及COPD 發(fā)病機(jī)制中的作用越來越被重視。

2.4 外泌體mi RNA 與骨骼肌萎縮 COPD 不僅是一種局限于呼吸道和肺部的疾病，還是一種可以累及肺外各器官的全身疾病，特別是骨骼肌萎縮和功能障礙，是導(dǎo)致COPD 患者生活質(zhì)量下降和病死率增加的主要危險(xiǎn)因素[40]。近年來許多研究發(fā)現(xiàn)，在運(yùn)動(dòng)受限的COPD 患者中，約40%的患者肺功能并沒有嚴(yán)重受損，而表現(xiàn)為明顯的骨骼肌萎縮或功能障礙[18]。COPD 患者在疾病進(jìn)展中常伴有不明原因的體質(zhì)量下降，導(dǎo)致其運(yùn)動(dòng)受限，特別是中重度患者普遍存在不同程度的外周骨骼肌萎縮，表現(xiàn)為肌力、耐力的下降及易疲勞。目前有研究認(rèn)為，骨骼肌萎縮的機(jī)制可能與全身炎癥反應(yīng)及內(nèi)分泌紊亂、缺氧和高碳酸血癥、氧化應(yīng)激、營養(yǎng)不良、廢用性萎縮、使用類固醇藥物等相關(guān)[41]。目前一致認(rèn)為COPD 是一種全身多系統(tǒng)的炎性反應(yīng)性疾病，COPD 患者骨骼肌萎縮的發(fā)生是由多因素誘導(dǎo)、多種分子生物學(xué)機(jī)制參與的復(fù)雜過程，各種細(xì)胞因子及蛋白通路并非單獨(dú)起作用，可能在骨骼肌萎縮的機(jī)制中相互作用。目前骨骼肌萎縮的具體機(jī)制尚不明確，因此發(fā)現(xiàn)骨骼肌萎縮的非侵入性標(biāo)志物，可能為COPD 防治提供新的策略。

Donaldson 等[42]證實(shí)COPD 患者血漿中特異性micro RNA 表達(dá)減少與骨骼肌無力和肌纖維組成改變有關(guān)，具體來說，mi R-1與無脂肪質(zhì)量呈負(fù)相關(guān)，而mi R-499 水平與力量和股四頭?、裥屠w維比例直接相關(guān)。不局限于肌肉起源的mi R-16和mi R-122在患者和對(duì)照組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在早期COPD 患者中，血漿mi R-499與肌肉核因子κB p50相關(guān)，但與p65無關(guān)，而在較晚期COPD 患者中，血漿炎性細(xì)胞因子與mi R-206 相關(guān)。因此，COPD 患者血漿中肌肉特異性mi RNA 有可能成為骨骼肌萎縮活檢表型的候選生物標(biāo)志物。Bur ke等[43]研究了在輕度至中度COPD 患者與健康對(duì)照組中BALF和血清中外泌體mi RNA的表達(dá)差異，目的是研究這些已鑒定的mi RNA 對(duì)骨骼肌的影響，結(jié)果顯示COPD 血清中發(fā)現(xiàn)1 個(gè)顯著上調(diào)的mi RNA，在COPD BALF中發(fā)現(xiàn)4個(gè)顯著下調(diào)的mi RNA，并且他們利用in-silico分析，研究了這些失調(diào)的mi RNA 對(duì)基因表達(dá)的影響。這一發(fā)現(xiàn)涉及哺乳動(dòng)物雷帕霉素復(fù)合物1信號(hào)通路的靶基因，包括基因S6 K，骨骼肌消耗的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子。證實(shí)了外泌體mi RNA 的新作用，它可能驅(qū)動(dòng)COPD 患者的骨骼肌萎縮的發(fā)生。

3 總結(jié)與展望

本文總結(jié)了近年來關(guān)于外泌體mi RNA 的提取、分離和檢測方法，以及外泌體mi RNA 在COPD 發(fā)病進(jìn)程中的作用，探索其作為生物標(biāo)志物的潛力，以了解COPD 發(fā)病機(jī)制。特別是含有特定分子特征的外泌體，包括mi RNA，可能被臨床用作診斷和治療COPD 的新生標(biāo)志物。但其廣泛應(yīng)用于臨床方面，仍面臨許多困難，還需要對(duì)外泌體分離的方案進(jìn)行優(yōu)化和標(biāo)準(zhǔn)化，以減少由于技術(shù)問題造成的變異。某些特定的mi RNA 參與了COPD 的發(fā)病機(jī)制，并能夠通過胞外囊泡傳遞系統(tǒng)傳遞到疾病部位，影響慢性炎癥進(jìn)程[44-45]。它們可能成為治療COPD 的重要焦點(diǎn)，這將成為COPD 患者的福音。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突