劉東濤，李 兵，孫 坤

消化性潰瘍(peptic ulcer， PU)是指胃腸道黏膜在某種情況下被胃酸和(或)胃蛋白酶消化而造成的潰瘍，臨床上以上腹部疼痛、反胃和反酸等為主要癥狀[1-2]。PU主要包括胃潰瘍和十二指腸潰瘍，胃酸和(或)胃蛋白酶的消化作用是潰瘍形成的基本因素。幽門螺桿菌(helicobacter pylori， HP)是PU主要致病菌，占80%以上[3]。HP感染可損傷胃黏膜屏障，進(jìn)而造成PU。既往研究證實(shí)，胃泌素(gastrin， GS)釋放增多可造成胃酸分泌增加，胃酸分泌增加可導(dǎo)致胃蛋白酶原Ⅰ(pepsinogen Ⅰ， PGⅠ)分泌增多[4]。另有研究發(fā)現(xiàn)，HP感染PU患者血清中腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α， TNF-α)水平顯著上升，可作為診斷HP感染PU的重要指標(biāo)[5]。本研究分析血清PGⅠ、胃泌素-17(gastrin-17， GS-17)及TNF-α水平與HP感染PU的相關(guān)性，以期為臨床診斷HP感染PU提供新思路。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年4月—2020年5月崇州市人民醫(yī)院收治的符合納入及排除標(biāo)準(zhǔn)的PU 132例的臨床資料。132例均因上消化道癥狀就診，其中胃潰瘍59例，十二指腸潰瘍73例。根據(jù)有無HP感染將PU 132例分為HP感染PU組(75例)和無HP感染PU組(57例)兩組。HP感染PU組中胃潰瘍29例，十二指腸潰瘍46例；無HP感染PU組中胃潰瘍30例，十二指腸潰瘍27例。另選取同期在該院進(jìn)行體檢的健康體檢者47例作為健康體檢組(均行實(shí)驗(yàn)室或胃鏡檢查，皆無HP感染和PU)。3組性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)及合并疾病比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表1，具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)同意執(zhí)行。

表1 有無HP感染PU和健康體檢者3組一般資料比較

1.2納入及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①PU 132例均經(jīng)胃鏡活組織病理檢查證實(shí)PU及有無HP感染；②皆臨床資料完整；③無其他惡性疾病；④入組前15 d無抑酸劑、抗生素和胃黏膜保護(hù)劑使用史；⑤患者和(或)其家屬均簽署相關(guān)知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①近6個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)腦血管疾病者；②合并免疫系統(tǒng)和血液系統(tǒng)疾病者；③過敏體質(zhì)者；④合并胃食管腫瘤或胃食管反流病者。

1.3檢測方法 血清PGⅠ、GS-17及TNF-α水平均采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法檢測，PGⅠ和GS-17試劑盒購自上海西唐生物科技有限公司，TNF-α試劑盒購自美國 R&D公司。所有入組者檢查前禁食8 h以上，于清晨空腹抽取3 ml靜脈血，抗凝、離心，隨后將分離的血清置-20℃保存。試驗(yàn)時(shí)取出血清，置于37℃溫浴箱中進(jìn)行孵化，同時(shí)將PGⅠ、GS-17及TNF-α試劑盒分別取出，等到其溫度升至28℃為止，配制標(biāo)準(zhǔn)品液，接著加洗滌液，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線并加樣，將反應(yīng)板利用透明膠密封保存，然后洗板4～7次，將50 μl第一抗體工作液置于37℃反應(yīng)板上60 min，再次洗板后，將100 μl酶標(biāo)抗體工作液置于37℃反應(yīng)板上60 min，接著再洗板，再將100 μl底物液置于37℃溫浴箱中反應(yīng)10 min，同時(shí)在反應(yīng)板上加50 μl終止液，最后將反應(yīng)板置于酶標(biāo)儀里。將波長設(shè)定為450 nm，測吸光度值，將所測得吸光度值減去空白值，得出數(shù)值作為計(jì)算的數(shù)值；根據(jù)所測得樣品吸光度值在標(biāo)準(zhǔn)曲線圖上查出相應(yīng)血清PGⅠ、GS-17及TNF-α水平。

1.4觀察指標(biāo) 比較HP感染PU組、無HP感染PU組和健康體檢組3組血清PGⅠ、GS-17及TNF-α水平，HP感染PU組和無HP感染PU組不同潰瘍類型患者血清PGⅠ、GS-17及TNF-α水平；采用Logistic回歸分析探討血清PGⅠ、GS-17及TNF-α水平與HP感染PU的關(guān)系；采用受試者工作特征(ROC)曲線分析血清PGⅠ、GS-17、TNF-α檢測及三者聯(lián)合檢測對HP感染PU的診斷價(jià)值。

2 結(jié)果

2.1HP感染PU組、無HP感染PU組和健康體檢組血清PGⅠ、GS-17及TNF-α水平比較 HP感染PU組、無HP感染PU組和健康對照組3組血清PGⅠ、GS-17及TNF-α水平總體比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。HP感染PU組和無HP感染PU組血清PGⅠ、GS-17和TNF-α水平均高于健康體檢組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(HP感染PU組：t=31.693、P<0.001，t=32.687、P<0.001，t=30.420、P<0.001；無HP感染PU組：t=13.395、P<0.001，t=41.622、P<0.001，t=14.625，P<0.001)。HP感染PU組血清PGⅠ、GS-17和TNF-α水平高于無HP感染PU組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=28.820、P<0.001，t=18.028、P<0.001，t=26.075、P<0.001)，見表2。

表2 有無HP感染PU和健康體檢者3組血清PGⅠ、GS-17及TNF-α水平比較

2.2HP感染PU組和無HP感染PU組不同潰瘍類型患者血清PGⅠ、GS-17和TNF-α水平比較 HP感染PU組胃潰瘍患者血清GS-17水平低于十二指腸潰瘍患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；胃潰瘍患者和十二指腸潰瘍患者血清PGⅠ和TNF-α水平比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。無HP感染PU組胃潰瘍患者和十二指腸潰瘍患者血清PGⅠ、GS-17和TNF-α水平比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。HP感染PU組胃潰瘍患者血清PGⅠ、GS-17和TNF-α水平均高于無HP感染PU組胃潰瘍患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=13.659、P<0.001，t=13.139、P<0.001，t=17.363、P<0.001)。HP感染PU組十二指腸潰瘍患者血清PGⅠ、GS-17和TNF-α水平亦均高于無HP感染PU組十二指腸潰瘍患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=12.978、P<0.001，t=29.996、P<0.001，t=16.336、P<0.001)。見表3。

2.3血清PGⅠ、GS-17及TNF-α水平與HP感染PU關(guān)系 以HP感染PU為因變量，血清PGⅠ、GS-17及TNF-α水平為自變量行Logistic回歸分析， 結(jié)果顯示血清PGⅠ>70 U/ml、GS-17>55 pg/ml及TNF-α>10 ng/ml是HP感染PU的危險(xiǎn)因素(P<0.01)。見表4。

表3 HP感染PU組和無HP感染PU組不同潰瘍類型患者血清PGⅠ、GS-17及TNF-α水平比較

表4 血清PGⅠ、GS-17及TNF-α水平與HP感染PU關(guān)系的Logistic回歸分析結(jié)果

2.4血清PGⅠ、GS-17、TNF-α檢測及三者聯(lián)合檢測對HP感染PU診斷價(jià)值 ROC曲線分析結(jié)果顯示，血清PGⅠ、GS-17、TNF-α檢測及三者聯(lián)合檢測對HP感染PU診斷價(jià)值的曲線下面積分別為0.747、0.732、0.801及0.829，三者聯(lián)合檢測對HP感染PU的診斷價(jià)值最佳，見圖1、表5。

圖1 血清PGⅠ、GS-17、TNF-α檢測及三者聯(lián)合檢測對HP感染PU診斷價(jià)值的ROC曲線

表5 血清PGⅠ、GS-17、TNF-α檢測及三者聯(lián)合檢測對HP感染PU診斷價(jià)值的ROC曲線分析結(jié)果

3 討論

PU是一種慢性消化系統(tǒng)疾病，好發(fā)于胃及十二指腸，大部分PU患者是因HP感染所致[6]。胃部黏膜HP感染時(shí)，會(huì)改變正常黏膜防御因素和侵襲因素平衡。Eisdorfer等[7]研究指出，HP感染PU是發(fā)生食管癌和胃癌的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。目前，國際癌癥研究會(huì)認(rèn)為HP感染是胃癌的重要致癌因素之一[8]。根除HP感染或使HP感染由陽轉(zhuǎn)陰是臨床上治療HP感染PU的主要原則。

胃蛋白酶原是胃蛋白酶的活性前體，在pH<5.0時(shí)活化為胃蛋白酶，可反映胃黏膜的形態(tài)及功能[9]。根據(jù)其生化和免疫化學(xué)特征可分為PGⅠ和胃蛋白酶原Ⅱ，主要由胃黏膜泌酸腺上主細(xì)胞分泌，進(jìn)入胃腔后在酸性環(huán)境中活化形成胃蛋白酶，對消化道黏膜組織可產(chǎn)生自身消化作用[10]。HP感染早期可引起慢性淺表性胃炎、胃潰瘍及十二指腸潰瘍等，后期可導(dǎo)致慢性萎縮性胃炎和癌前病變等，HP感染PU在不斷發(fā)展過程中會(huì)伴有胃蛋白酶原變化[11-12]。Yang等[8]報(bào)道發(fā)現(xiàn)，HP感染PU患者胃酸分泌會(huì)增強(qiáng)，而胃酸的酸性程度與PGⅠ的活性關(guān)系密切。有學(xué)者通過對日本人群HP 感染慢性萎縮性胃炎和胃癌關(guān)系的研究發(fā)現(xiàn)，血清PGⅠ水平受HP 感染的影響，血清HP 抗體陽性患者PGⅠ水平明顯高于血清HP 抗體陰性患者[13]。GS-17由胃竇G細(xì)胞分泌，可以直接反映胃竇部黏膜健康狀況，和胃酸分泌成負(fù)反饋機(jī)制，可間接評估胃體部黏膜健康狀況[14]。有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，HP感染后可分解尿酸產(chǎn)生氨或鹽酸，刺激胃壁組織引起生長抑素分泌不足，并使GS-17分泌增加[15]。TNF-α由單核-吞噬細(xì)胞系統(tǒng)產(chǎn)生及分泌，是炎癥反應(yīng)的起始因子，可刺激機(jī)體合成大量的促炎因子，引起炎性細(xì)胞移動(dòng)，同時(shí)使胃黏膜局部微血管處于內(nèi)凝血狀態(tài)，導(dǎo)致胃黏膜損傷[16]。Nishida等[17]研究發(fā)現(xiàn)，TNF-α在HP感染PU患者中的表達(dá)高于無HP感染PU患者。Bagheri等[18]研究則表明，TNF-α水平升高可作為不同菌型HP感染PU的重要診斷指標(biāo)。本研究結(jié)果顯示，HP感染PU組和無HP感染PU組血清PGⅠ、GS-17和TNF-α水平均高于健康體檢組，HP感染PU組血清PGⅠ、GS-17和TNF-α水平高于無HP感染PU組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。表明血清PGⅠ、GS-17及TNF-α水平升高與HP感染PU有關(guān)。

HP感染是誘發(fā)PU的重要危險(xiǎn)因素之一。本研究結(jié)果顯示，HP感染PU組胃潰瘍和十二指腸潰瘍患者血清PGⅠ、GS-17和TNF-α水平均高于無HP感染PU組胃潰瘍和十二指腸潰瘍患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；Logistic回歸分析結(jié)果顯示，血清PGⅠ>70 U/ml、GS-17>55 pg/ml及TNF-α>10 ng/ml是HP感染PU的危險(xiǎn)因素。表明血清PGⅠ、GS-17和TNF-α水平與HP感染PU有一定相關(guān)性。這可能是由于HP感染后可分解尿素產(chǎn)生氨或鹽酸，刺激胃壁組織增加GS-17分泌，同時(shí)刺激炎性因子釋放而加重胃壁黏膜損傷,而GS-17分泌增加可進(jìn)一步引起胃酸分泌增多，PGⅠ釋放增加，進(jìn)而加重對胃壁黏膜組織的損傷，形成一個(gè)惡性循環(huán)[19]。

本研究進(jìn)一步采用ROC曲線分析血清PGⅠ、GS-17、TNF-α檢測及三者聯(lián)合檢測對HP感染PU的診斷價(jià)值，結(jié)果顯示血清PGⅠ、GS-17、TNF-α檢測及三者聯(lián)合檢測對HP感染PU診斷價(jià)值的曲線下面積分別為0.747、0.732、0.801及0.829，三者聯(lián)合檢測對HP感染PU的診斷價(jià)值最佳。提示血清PGⅠ、GS-17和TNF-α三者聯(lián)合檢測可作為診斷HP感染PU的有效手段。

綜上所述，血清PGⅠ、GS-17及TNF-α水平升高與HP感染PU有一定相關(guān)性，三者聯(lián)合檢測對HP感染PU的診斷價(jià)值最佳。但由于本研究納入樣本量較少，試驗(yàn)結(jié)果難免存在偏倚，后續(xù)需擴(kuò)大樣本量進(jìn)一步研究，以獲得更為準(zhǔn)確的試驗(yàn)結(jié)果。