• 
    

    
    

      99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看

      ?

      COVID-19恢復(fù)期晚期妊娠與未妊娠患者免疫功能的差異分析

      2021-04-20 02:14:14金志珊吳江華馮地路張青苗汪宏波
      關(guān)鍵詞:亞群核酸外周血

      金志珊,吳江華,馮地路,夏 霖,張青苗,汪宏波

      (華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院 a.婦產(chǎn)科;b.血液內(nèi)科,武漢 430022)

      新型冠狀病毒肺炎(Corona Virus Disease 2019,COVID-19)是由新型冠狀病毒(SARS-CoV-2)感染而引起的急性呼吸道傳染病,在我國屬于乙類傳染病,甲類管理,于2020年3月11日由WHO定義為疫情全球大流行。COVID-19為突發(fā)新型冠狀病毒,對(duì)其流行病學(xué)的了解不夠詳細(xì),現(xiàn)全球疫情肆虐,迫切需要COVID-19年齡及性別流行病學(xué)相關(guān)研究[1]。目前年輕女性及妊娠女性的流行病學(xué)數(shù)據(jù)尚無明確報(bào)道,其免疫狀態(tài)尚不清楚。根據(jù)現(xiàn)有報(bào)道[2-3]及華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院收治的26例COVID-19孕婦的預(yù)后分析,COVID-19孕婦均以輕型、普通型居多,重癥病例少見,危重及死亡未見相關(guān)報(bào)道[4],且孕產(chǎn)婦預(yù)后良好。但是,同齡COVID-19感染的未妊娠女性有死亡的相關(guān)報(bào)道。女性在妊娠狀態(tài)下,其免疫狀態(tài)不同,感染SARS-CoV-2后的反應(yīng)及預(yù)后亦不同,其免疫功能的變化對(duì)COVID-19的治療可能有重要意義。本研究通過檢測COVID-19感染恢復(fù)期的晚期妊娠患者與未妊娠患者外周血中淋巴細(xì)胞亞群及細(xì)胞因子變化,初步探討了解COVID-19感染合并晚期妊娠患者免疫狀況的變化規(guī)律。

      1 資料與方法

      1.1 一般資料 選取2020年1月30日至4月10日華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院收治的晚期妊娠合并COVID-19感染并成功分娩的患者18例,年齡24~40歲,平均(29.67±4.80)歲;選取同年齡段合并COVID-19感染的未妊娠女性17例,年齡24~41歲,平均(31.2±7.08)歲。兩組患者的排除標(biāo)準(zhǔn):合并既往血液系統(tǒng)疾病或惡性腫瘤疾病;3個(gè)月內(nèi)使用過可使血細(xì)胞形態(tài)明顯改變藥物。

      1.2 相關(guān)定義 核酸檢測轉(zhuǎn)陰時(shí)間:患者從發(fā)病開始到檢測到第一次核酸轉(zhuǎn)陰天數(shù)(核酸轉(zhuǎn)陰患者至少在本病區(qū)核酸檢測2次均為陰性,回顧第一次核酸檢測呈陰性時(shí)間,如患者入院后核酸已為陰性,無法明確轉(zhuǎn)陰時(shí)間,則去除該病例入組核酸轉(zhuǎn)陰時(shí)間的統(tǒng)計(jì))。住院天數(shù):住院當(dāng)天開始,根據(jù)我國診療指南達(dá)到出院標(biāo)準(zhǔn)出院當(dāng)天為止,且全部晚期妊娠患者均生產(chǎn)后恢復(fù)出院?;謴?fù)期:根據(jù)2020年3月3日國家衛(wèi)生健康委辦公廳發(fā)布的《新型冠狀病毒肺炎診療方案》試行第7版,患者達(dá)到出院標(biāo)準(zhǔn):(1)體溫恢復(fù)正常3天以上;(2)呼吸道癥狀明顯好轉(zhuǎn);(3)肺部影像學(xué)顯示急性滲出性病變明顯改善;(4)連續(xù)兩次痰、鼻咽拭子等呼吸道標(biāo)本核酸檢測陰性(采樣時(shí)間至少間隔24h)。實(shí)驗(yàn)組為終止妊娠前達(dá)到出院標(biāo)準(zhǔn),需在恢復(fù)期終止妊娠,采血時(shí)間為終止妊娠前;對(duì)照組為達(dá)到出院標(biāo)準(zhǔn)的未妊娠女性患者,采血時(shí)間為出院前。

      1.3 儀器及主要試劑 流式細(xì)胞儀(BD公司,F(xiàn)ACS Calibur)及CD3、CD4、CD8、CD19、CD56、CD45RA、CD62L、TCR γδ檢測試劑(流式細(xì)胞法-FITC/PE/PerCP/APC)。

      1.4 方法 臨床數(shù)據(jù)收集,包括鼻咽拭子核酸,細(xì)胞因子六項(xiàng)(IL-2,IL-4,IL-6,IL-10,TNF-α,IFN-γ6),淋巴細(xì)胞亞群分析(比例)。此外,行淋巴細(xì)胞絕對(duì)值計(jì)數(shù)的3組對(duì)象均清晨空腹抽取靜脈血2ml,EDTA抗凝。應(yīng)用熒光直接標(biāo)記法及流式細(xì)胞儀檢測外周血淋巴細(xì)胞亞群:CD3+(T淋巴細(xì)胞總體比例),B淋巴細(xì)胞(CD19+),NK細(xì)胞(CD3-CD56+),NKT細(xì)胞(CD3+CD56+),γδ T細(xì)胞(TCRγδ+),中樞記憶性T細(xì)胞[CM,EMRA(CD62L-/CD45RA+)];幼稚T細(xì)胞(NAIVE,CD62L+/CD45RA+)。

      1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS25.0軟件,采用兩組間獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

      2 結(jié) 果

      2.1 COVID-19感染未妊娠與晚期妊娠女性恢復(fù)期外周淋巴細(xì)胞亞群比例及細(xì)胞因子 COVID-19感染未妊娠與晚期妊娠女性的病毒轉(zhuǎn)陰天數(shù)和住院天數(shù)比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見表1。兩組的外周淋巴細(xì)胞亞群比例(CD3+總T淋巴細(xì)胞、CD4+淋巴細(xì)胞、CD8+淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞、NK淋巴細(xì)胞比值、CD4+T/CD8+T)以及細(xì)胞因子(IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ)比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

      表1 COVID-19感染未妊娠與晚期妊娠女性恢復(fù)期外周淋巴細(xì)胞亞群比例及細(xì)胞因子測定

      2.2 COVID-19未妊娠與晚期妊娠女性恢復(fù)期外周血淋巴細(xì)胞亞群絕對(duì)值對(duì)比分析 取3對(duì)COVID-19感染未妊娠與晚期妊娠女性恢復(fù)期外周血淋巴細(xì)胞亞群絕對(duì)值對(duì)比分析。結(jié)果顯示,晚期妊娠女性的自然殺傷細(xì)胞(natural killer cells,NK)數(shù)顯著低于未妊娠女性(P=0.005),晚期妊娠女性的自然殺傷T細(xì)胞(natural killer T cells,NKT)高于未妊娠女性(P=0.015);兩組的CD3+T細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞及γδT細(xì)胞均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(圖1)。

      圖1 COVID-19未妊娠與晚期妊娠女性恢復(fù)期外周血淋巴細(xì)胞亞群絕對(duì)值對(duì)比分析A:CD3+T細(xì)胞;B:CD4+T細(xì)胞;C:CD8+T細(xì)胞;D:γδ T細(xì)胞;E:NK細(xì)胞;F:NKT細(xì)胞

      2.3 COVID-19感染恢復(fù)期未妊娠與晚期妊娠女性外周血淋巴細(xì)胞CD4+T及CD8+T細(xì)胞亞群絕對(duì)計(jì)數(shù) 兩組的CD4+T及CD8+T細(xì)胞亞群計(jì)數(shù)(CM、EM、EMRA、NAIVE)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(圖2)。兩組的CD4+及CD8+的亞群比例比較,無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

      圖2 未妊娠組與晚期妊娠組COVID-19感染恢復(fù)期

      3 討 論

      妊娠時(shí)女性處于一種特殊的免疫耐受狀態(tài),為了防止妊娠期間的胎兒排斥反應(yīng),需對(duì)胎兒免疫耐受;同時(shí),母體免疫系統(tǒng)保護(hù)胎兒免受有害的內(nèi)源性和外源性抗原的影響,包括與病毒和細(xì)菌感染有關(guān)的抗原。正常妊娠期,通過抑制T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫而促進(jìn)母體環(huán)境對(duì)胎兒的維持[5],大多數(shù)細(xì)胞因子水平降低,特別是在妊娠最初的20周。妊娠早期外周血CD4+細(xì)胞亞群隨著HCG上升而下降,孕10~40+周CD4+細(xì)胞逐漸回升[6]。正常妊娠中晚期孕婦與未孕婦女比較,外周血中CD4+T淋巴細(xì)胞減少,CD8+T淋巴細(xì)胞基本不變,NK細(xì)胞有一定程度的下降[7]。目前還不清楚這種被抑制的免疫系統(tǒng)是否轉(zhuǎn)化為妊娠期間感染風(fēng)險(xiǎn)的增加。

      COVID-19感染者的淋巴細(xì)胞比例和數(shù)量減少,尤以CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)顯著減少為主,部分患者炎性細(xì)胞因子,如IL-6表達(dá)上調(diào)等[8]。本研究顯示,COVID-19感染恢復(fù)期晚期妊娠孕婦與同齡未妊娠女性的T淋巴細(xì)胞數(shù)量、比例,CD4、CD8亞型計(jì)數(shù)及比例,細(xì)胞因子六項(xiàng)比較,均無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞均為異質(zhì)性細(xì)胞群,可分為中樞記憶T細(xì)胞(CM),效應(yīng)記憶T細(xì)胞(EM),終末效應(yīng)T細(xì)胞(EMRA),幼稚T細(xì)胞(NAIVE)。本研究顯示,CM、EM、EMRA、NAIVE在COVID-19感染后女性中,其變化與妊娠無相關(guān)性。

      本研究結(jié)合武漢同濟(jì)醫(yī)院[2]及武漢市婦幼保健院[9]的研究,均沒有孕產(chǎn)婦死亡報(bào)道,且孕產(chǎn)婦預(yù)后均良好。有專家認(rèn)為,COVID-19患者病情突然加重,快速出現(xiàn)呼吸窘迫綜合征和多器官功能衰竭可能與“炎癥因子風(fēng)暴”相關(guān),患者血漿中IL-2、IL-7、IL-10、G-CSF、IP-10、MCP-1、MIP-1A和TNF-α顯著升高[10]。肺部免疫細(xì)胞處于過度活化狀態(tài),大量免疫細(xì)胞的浸潤和組織液的聚集會(huì)阻塞肺泡與毛細(xì)血管之間的氣體交換,從而導(dǎo)致急性呼吸窘迫綜合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)[11]。妊娠女性呈免疫抑制狀態(tài),免疫細(xì)胞難以過度活化,故而炎癥因子風(fēng)暴相對(duì)弱,ARDS出現(xiàn)情況少見。妊娠時(shí)期特殊的免疫狀態(tài),可能讓妊娠女性處于輕型及普通型,避免了向重型及危重型轉(zhuǎn)變。華中科技大學(xué)團(tuán)隊(duì)前期研究發(fā)現(xiàn),重癥患者的多種細(xì)胞因子僅在某一段時(shí)間內(nèi)有顯著上升,而在其他時(shí)間段與輕癥組無明顯差異[8]。本研究針對(duì)的是恢復(fù)期病例,可能其細(xì)胞因子的改變發(fā)生于發(fā)病早期,而恢復(fù)期患者的細(xì)胞因子已處于基本正常水平。本研究中單獨(dú)恢復(fù)期的兩組間細(xì)胞因子的比較無明顯差異,與以上研究相符。

      無論對(duì)于妊娠或非妊娠女性,盡早了解患者急性期的細(xì)胞因子狀態(tài),及早進(jìn)行相關(guān)的免疫治療,可能避免輕型和普通型發(fā)展成為重型或危重型。此結(jié)論還需更多的妊娠女性COVID-19急性期相關(guān)研究。本研究進(jìn)一步結(jié)果顯示,COVID-19感染后恢復(fù)期晚期妊娠與同齡女性比較,T淋巴細(xì)胞亞群無明顯差異,NK細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)減少,NKT細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)增加。NK細(xì)胞具有細(xì)胞毒效應(yīng),無需抗原預(yù)先致敏就能殺傷靶細(xì)胞。COVID-19感染患者較未感染者,NK細(xì)胞顯著下降[12],考慮原因:(1)患者本身存在免疫功能缺陷(孕婦本身NK水平相對(duì)低);(2)NK細(xì)胞對(duì)抗病毒發(fā)生消耗,未能得到及時(shí)補(bǔ)充;(3)病毒感染機(jī)體后,侵犯免疫系統(tǒng),破壞NK細(xì)胞或抑制NK細(xì)胞的生成[12]。隨著研究深入,NK細(xì)胞在適應(yīng)性免疫中作用不斷展現(xiàn),在一定情況下具有抑制病毒特異性T細(xì)胞的抗病毒作用。

      NKT細(xì)胞是一群不同尋常的T淋巴細(xì)胞,活化的NKT細(xì)胞具有介導(dǎo)天然免疫和特異性免疫應(yīng)答的功能,直接或間接參與機(jī)體的免疫應(yīng)答,發(fā)揮殺傷活性。一方面,NKT細(xì)胞活化可產(chǎn)生大量細(xì)胞因子,參與抗感染;另一方面,可活化其他淋巴細(xì)胞,參與抗感染。在病毒性肝炎的研究中,如NKT細(xì)胞或CD1d缺失,或者CD1d遞呈脂類抗原缺陷,HBV特異性的T細(xì)胞和B細(xì)胞應(yīng)答都會(huì)消失,病毒清除延遲。且胸腺肽α-1可富集NKT細(xì)胞,幫助清除感染病毒的細(xì)胞。然而,NKT在COVID-19中的角色不明,未見相關(guān)報(bào)道。

      以往認(rèn)為,孕婦抵抗力低,即對(duì)病毒的清除能力弱,病程時(shí)間較長。本研究中,COVID-19感染晚期妊娠女性與同齡女性的SARS-CoV-2的轉(zhuǎn)陰時(shí)間、住院時(shí)間無明顯差異,且住院時(shí)間包括晚期妊娠終止妊娠后恢復(fù)的時(shí)間。表明妊娠對(duì)于COVID-19來說并無劣勢(shì),但孕產(chǎn)婦的心理狀態(tài)是否對(duì)病情的恢復(fù)有影響[13],有待進(jìn)一步研究。本研究顯示,較COVID-19感染的非妊娠女性,COVID-19感染晚期妊娠NK細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)減少,NKT增加,但其是否改變了對(duì)病毒的清除能力,以及COVID-19對(duì)子代的影響,尚需進(jìn)一步探討。目前針對(duì)COVID-19無特效藥物,中西醫(yī)均給予免疫調(diào)節(jié)抗病毒藥物[14]。最近研究發(fā)現(xiàn),MSCs移植改善COVID-2019患者的預(yù)后可能是通過調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)[15]和促進(jìn)組織修復(fù)與再生。故針對(duì)性免疫治療可進(jìn)一步了解是否對(duì)NK及NKT細(xì)胞有調(diào)節(jié),為后續(xù)治療機(jī)制和臨床用藥提供一定的參考。

      妊娠合并COVID-19感染的危重癥人數(shù)相對(duì)少,可能是因早期發(fā)病時(shí)免疫功能抑制而表現(xiàn)為細(xì)胞因子風(fēng)暴弱,故表現(xiàn)為輕癥及普通型較多,危重癥少。妊娠合并COVID-19感染者對(duì)病毒的清除能力與同齡女性無明顯差異,是否得益于NK細(xì)胞減少的基礎(chǔ)上,繼發(fā)NKT細(xì)胞的增加,需后續(xù)進(jìn)一步研究。本研究僅針對(duì)恢復(fù)期患者免疫功能的研究,存在一定的偏差,不能代表急性期免疫應(yīng)答的情況。本研究樣本量少,屬于回顧性研究,且因病例數(shù)限制,未進(jìn)行不同孕周的淋巴細(xì)胞亞群的比較。

      猜你喜歡
      亞群核酸外周血
      TB-IGRA、T淋巴細(xì)胞亞群與結(jié)核免疫的研究進(jìn)展
      測核酸
      中華詩詞(2022年9期)2022-07-29 08:33:50
      全員核酸
      中國慈善家(2022年3期)2022-06-14 22:21:55
      甲狀腺切除術(shù)后T淋巴細(xì)胞亞群的變化與術(shù)后感染的相關(guān)性
      第一次做核酸檢測
      快樂語文(2021年34期)2022-01-18 06:04:14
      核酸檢測
      中國(俄文)(2020年8期)2020-11-23 03:37:13
      外周血T細(xì)胞亞群檢測在惡性腫瘤中的價(jià)值
      白血病外周血體外診斷技術(shù)及產(chǎn)品
      結(jié)腸炎小鼠外周血和結(jié)腸上皮組織中Gal-9的表達(dá)
      結(jié)腸炎小鼠外周血和結(jié)腸上皮組織中Gal-9的表達(dá)
      葵青区| 原阳县| 卢龙县| 金平| 高密市| 钦州市| 芮城县| 延庆县| 宾阳县| 嘉祥县| 海淀区| 呼伦贝尔市| 道真| 肃南| 北川| 抚顺市| 鄢陵县| 酒泉市| 怀柔区| 额敏县| 四子王旗| 远安县| 石屏县| 嘉黎县| 龙里县| 牡丹江市| 界首市| 绥宁县| 桃园县| 容城县| 那坡县| 蕉岭县| 元氏县| 双桥区| 格尔木市| 兴安盟| 宜阳县| 永年县| 池州市| 新疆| 阿拉善盟|