劉峰 李永強(qiáng) 余鈞劍 顧楠

(上海市水產(chǎn)研究所，上海市水產(chǎn)技術(shù)推廣站，上海 200433)

羅非魚是全球重要的養(yǎng)殖魚類，2018年養(yǎng)殖產(chǎn)量達(dá)到603萬(wàn)t[1]，其中中國(guó)的羅非魚年產(chǎn)量達(dá)到162萬(wàn)t[2]。羅非魚具有顯著的兩性生長(zhǎng)差異，雄性羅非魚生長(zhǎng)速度比雌性快20%～50%[3]。羅非魚性成熟較早，一般4～6個(gè)月即可達(dá)到性成熟，此后雌性羅非魚每月產(chǎn)卵1～2次，生長(zhǎng)速度顯著下降，并會(huì)在養(yǎng)殖池中自然繁育出大量魚苗，嚴(yán)重影響商品魚的生產(chǎn)及出池規(guī)格，因此，采用全雄苗種進(jìn)行養(yǎng)殖已成為羅非魚養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的主要趨勢(shì)。目前，羅非魚全雄苗種的生產(chǎn)技術(shù)主要有兩種：一是采用雄性激素誘導(dǎo)生產(chǎn)全雄羅非魚，二是采用雄性?shī)W利亞羅非魚(ZZ基因型)與雌性尼羅羅非魚(XX基因型)進(jìn)行雜交繁育的種間雜交。但這兩種技術(shù)均有缺陷。采用雄性激素進(jìn)行誘導(dǎo)的技術(shù)由于需要投入大量的性激素，已被包括我國(guó)在內(nèi)的大多數(shù)國(guó)家禁止使用；而種間雜交獲得的全雄苗及近期選育的GIFT等尼羅羅非魚品系相對(duì)生長(zhǎng)速度緩慢，生產(chǎn)效益較低。近年來(lái)，采用具有YY基因型的超雄魚作為父本進(jìn)行遺傳全雄尼羅羅非魚苗種生產(chǎn)已成為行業(yè)的發(fā)展方向[4]。

早期的超雄羅非魚選育主要在莫桑比克羅非魚中進(jìn)行[5]。近年來(lái)已有采用超雄尼羅羅非魚選育的相關(guān)報(bào)道，主要采用測(cè)交方法進(jìn)行超雄魚的鑒定與篩選[6]。然而，由于超雄羅非魚選育周期長(zhǎng)、技術(shù)難度大、子代雄性率不穩(wěn)定等原因，遺傳全雄羅非魚至今仍難以大規(guī)模推廣。上海市水產(chǎn)研究所自2011年開始進(jìn)行超雄尼羅羅非魚的選育，采用吉富尼羅羅非魚作為基礎(chǔ)群體，以雌性化的XY個(gè)體為母本、普通XY個(gè)體為父本進(jìn)行繁育，開發(fā)性別特異性分子標(biāo)記篩選獲得YY超雄尼羅羅非魚，并進(jìn)行了YY超雄魚的雌性化誘導(dǎo)、規(guī)?；庇投啻x育。為了評(píng)估全雄尼羅羅非魚的養(yǎng)殖性能，本試驗(yàn)中，采用上海市水產(chǎn)研究所選育的超雄魚為父本、吉富羅非魚為母本，進(jìn)行了遺傳全雄尼羅羅非魚的繁育及試驗(yàn)性養(yǎng)殖，對(duì)遺傳全雄尼羅羅非魚與吉富羅非魚的生長(zhǎng)性狀及雄性率進(jìn)行了比較。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

吉富羅非魚為上海市水產(chǎn)研究所保存的GIFT品系尼羅羅非魚多代選育后代，超雄羅非魚為上海市水產(chǎn)研究所在該吉富羅非魚群體基礎(chǔ)上選育獲得的具有YY基因型的超雄魚群體。以超雄魚為父本、吉富羅非魚為母本，繁育獲得遺傳全雄尼羅羅非魚苗種；以吉富羅非魚為父本和母本，繁育獲得吉富羅非魚苗種。

試驗(yàn)用苗種的繁育在上海市水產(chǎn)研究所實(shí)驗(yàn)室大棚的水泥池中進(jìn)行，繁殖池的面積為20 m2，池深1 m，每口池放養(yǎng)10尾雌魚、3尾雄魚，保持水溫在26～28 ℃。種魚放養(yǎng)后約15 d開始見苗，將魚苗撈出放入面積為10 m2的苗種池中，培育至適當(dāng)?shù)囊?guī)格后用于養(yǎng)殖比較試驗(yàn)。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 池塘養(yǎng)殖對(duì)比試驗(yàn)

魚苗生長(zhǎng)至約20日齡、體長(zhǎng)達(dá)到3～5 cm后，于2018年6月14日—9月22日在上海市奉賢區(qū)藍(lán)海水產(chǎn)發(fā)展有限公司進(jìn)行2個(gè)群體的池塘養(yǎng)殖對(duì)比試驗(yàn)。2口試驗(yàn)池塘面積均為500 m2，水深約1.2 m，分別放養(yǎng)遺傳全雄尼羅羅非魚和吉富羅非魚，每口池塘放養(yǎng)2 000尾。養(yǎng)殖前期，投喂天邦飼料公司生產(chǎn)的羅非魚1號(hào)粉碎料，1個(gè)月后，根據(jù)個(gè)體規(guī)格改投1號(hào)或2號(hào)顆粒料。1號(hào)料的粗蛋白質(zhì)、脂肪、粗纖維含量分別為28%、4%、15%，2號(hào)料的粗蛋白質(zhì)、脂肪、粗纖維含量分別為26%、4%、15%。每日投喂2次，上、下午各1次，投飼量根據(jù)天氣和魚的攝食情況等進(jìn)行調(diào)整。設(shè)置固定投飼點(diǎn)，采用人工拋投的方式，當(dāng)大部分個(gè)體飽食散開后停止投喂，記錄各池的投飼量。每30 d更換20%池水，保持水質(zhì)清新良好。每口池塘安裝1臺(tái)750 W水車式增氧機(jī)，每晚開機(jī)增氧5～6 h，防止水體缺氧。放苗當(dāng)日及放苗后的第50、100天，從每口池中隨機(jī)撈取30尾魚，進(jìn)行全長(zhǎng)、體長(zhǎng)、體高、體質(zhì)量的測(cè)量。

1.2.2 網(wǎng)箱養(yǎng)殖對(duì)比試驗(yàn)

網(wǎng)箱養(yǎng)殖對(duì)比試驗(yàn)于2018年8月30日—10月14日在上海市水產(chǎn)研究所的試驗(yàn)塘進(jìn)行。當(dāng)2個(gè)群體的苗種生長(zhǎng)至45日齡、體質(zhì)量達(dá)到18～19 g時(shí)，各撈取部分個(gè)體剪鰭標(biāo)記，采用條件完全相同的3個(gè)網(wǎng)箱進(jìn)行同箱養(yǎng)殖對(duì)比試驗(yàn)。每個(gè)網(wǎng)箱面積為6 m2，水深1 m，網(wǎng)目大小為1 cm×1 cm，放置于靜水池塘中央。每個(gè)網(wǎng)箱投放魚種100尾，2個(gè)群體各50尾。在同一網(wǎng)箱中，2個(gè)群體的個(gè)體分別剪除不同側(cè)的腹鰭以作區(qū)分。投喂天邦飼料公司生產(chǎn)的羅非魚2號(hào)料，每日投喂2次，上、下午各1次。當(dāng)大部分個(gè)體飽食散開后停止投喂。網(wǎng)箱中配置渦輪式增氧機(jī)持續(xù)增氧，以防止水體缺氧，試驗(yàn)期間未更換池水。魚種投放當(dāng)日，測(cè)量所有個(gè)體的初始體長(zhǎng)、體高、體寬、體質(zhì)量，之后每15 d進(jìn)行1次隨機(jī)抽樣測(cè)量，至45 d后試驗(yàn)結(jié)束時(shí)進(jìn)行最后1次測(cè)量。抽樣測(cè)量時(shí)，從每一網(wǎng)箱的2個(gè)群體中各隨機(jī)撈取30尾魚進(jìn)行體長(zhǎng)、體高、體寬、體質(zhì)量的測(cè)定。

1.2.3 雄性率比較

試驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)2個(gè)群體的雄性率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。池塘養(yǎng)殖對(duì)比試驗(yàn)結(jié)束后，從2個(gè)群體各隨機(jī)抽取100尾個(gè)體進(jìn)行性別鑒定；網(wǎng)箱養(yǎng)殖對(duì)比試驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)所有個(gè)體進(jìn)行性別鑒定。鑒定時(shí)，先根據(jù)生殖孔外觀進(jìn)行初步鑒定：雌性的生殖突起頂端較圓，產(chǎn)卵管和輸尿管各具1個(gè)開口；雄性的生殖突起頂端較尖，輸精管與輸尿管共用1個(gè)開口。為確保性別鑒定的準(zhǔn)確性，對(duì)各個(gè)體進(jìn)行解剖，并根據(jù)性腺形態(tài)結(jié)構(gòu)進(jìn)一步確定性別：雌性的性腺較粗，呈紡錘狀，肉眼可見顆粒狀的卵母細(xì)胞；雄性的性腺較細(xì)，呈帶狀，無(wú)顆粒狀結(jié)構(gòu)。

1.2.4 數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行分析。所有結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。采用單因素方差分析比較結(jié)果的顯著性，設(shè)顯著性水平為0.05，極顯著水平為0.01。

各項(xiàng)統(tǒng)計(jì)指標(biāo)的計(jì)算公式如下：

飼料系數(shù)=總投飼量/凈增重

(1)

日增重(g/d)=(終末體質(zhì)量-初始體質(zhì)量)/養(yǎng)殖天數(shù)

(2)

成活率(%)=存活數(shù)/總放養(yǎng)數(shù)×100

(3)

雄性率(%)=雄性個(gè)體數(shù)/個(gè)體總數(shù)×100

(4)

2 結(jié)果

2.1 池塘養(yǎng)殖比較

放苗當(dāng)日及放苗后第50、100天各項(xiàng)生長(zhǎng)相關(guān)性狀的測(cè)量結(jié)果見表1。遺傳全雄群體、吉富群體的初始體質(zhì)量分別為2.76、2.74 g，2個(gè)群體間全長(zhǎng)、體長(zhǎng)、體高、體質(zhì)量的差異均不顯著(P>0.05)；養(yǎng)殖至第50、100d時(shí)，遺傳全雄群體全長(zhǎng)、體長(zhǎng)、體高、體質(zhì)量的均顯著大于吉富群體(P<0.05)。養(yǎng)殖至第100天時(shí)，遺傳全雄群體的平均體質(zhì)量為558.00 g，吉富群體的的平均體質(zhì)量為501.80 g，遺傳全雄群體的生長(zhǎng)速度比吉富群體快11.26%。

表1 2個(gè)羅非魚群體池塘養(yǎng)殖生長(zhǎng)性狀比較Tab.1 Comparison on culture performance of two tilapia populations cultured in ponds

根據(jù)2個(gè)群體在不同時(shí)間點(diǎn)測(cè)得的體質(zhì)量數(shù)據(jù)，繪制生長(zhǎng)曲線圖。由圖1可見，遺傳全雄群體的體質(zhì)量增長(zhǎng)速度快于吉富群體，2個(gè)群體的平均體質(zhì)量增長(zhǎng)均在養(yǎng)殖試驗(yàn)50 d后加速。

圖1 兩個(gè)羅非魚群體池塘養(yǎng)殖生長(zhǎng)曲線Fig.1 Growth curve of two tilapia populations cultured in ponds

養(yǎng)殖100 d后，將2口池塘內(nèi)的試驗(yàn)魚全部起捕，稱取各池魚的總體質(zhì)量，統(tǒng)計(jì)各池的存活數(shù)。遺傳全雄群體所在池塘于7月中旬因暴雨導(dǎo)致少量魚苗逃逸，共起捕1 845尾，成活率為92.25%；吉富群體共起捕1 956尾，成活率97.80%。

遺傳全雄群體的總體質(zhì)量為1 027.9 kg，凈增重1 022.38 kg；吉富群體總體質(zhì)量為983.9 kg，凈增重978.42 kg。養(yǎng)殖期間，遺傳全雄群體共投喂飼料1 010 kg，飼料系數(shù)為0.99；吉富群體共投喂飼料990 kg，飼料系數(shù)為1.01。

2.2 網(wǎng)箱養(yǎng)殖結(jié)果比較

遺傳全雄、吉富群體的初始平均體質(zhì)量分別為18.51 g和19.00 g，二者差異不顯著。于魚種投放后的第15、30、45天抽樣測(cè)量試驗(yàn)魚的體質(zhì)量，并繪制兩個(gè)群體的生長(zhǎng)曲線(見圖2)。由圖2可見，遺傳全雄群體的體質(zhì)量增長(zhǎng)速度快于吉富群體。

圖2 兩個(gè)羅非魚群體網(wǎng)箱養(yǎng)殖生長(zhǎng)曲線Fig.2 Growth curve of two tilapia populations cultured in cages

經(jīng)過(guò)45 d的同箱養(yǎng)殖，2個(gè)群體體長(zhǎng)、體高、體寬、體質(zhì)量的測(cè)量結(jié)果見表2。遺傳全雄、吉富群體的平均體質(zhì)量分別為144.69 g和125.91 g，二者差異極顯著(P<0.01)，遺傳全雄群體的生長(zhǎng)速度比吉富群體快18.02%；遺傳全雄、吉富群體的日增重分別為2.80、2.37 g，差異極顯著(P<0.01)。2個(gè)群體的成活率分別為99.33%、98.00%，差異不顯著(P>0.05)。

表2 兩個(gè)羅非魚群體同箱養(yǎng)殖比較Tab.2 Comparison on culture performance of two tilapia populations cultured in cages

2.3 雄性率比較

養(yǎng)殖對(duì)比試驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)2個(gè)群體的雄性率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，結(jié)果見表3。池塘及網(wǎng)箱養(yǎng)殖的遺傳全雄群體中均未發(fā)現(xiàn)雌性個(gè)體，雄性率為100%；而吉富群體的平均雄性率為52.30%。

表3 兩個(gè)羅非魚群體雄性率比較Tab.3 Comparison of male rates of two tilapia populations

3 討論

3.1 遺傳全雄尼羅羅非魚雄性率

以超雄魚為父本進(jìn)行遺傳全雄羅非魚苗種生產(chǎn)，雄性率是評(píng)估全雄苗種性狀的主要指標(biāo)之一。羅非魚性成熟早、繁殖力強(qiáng)，投放的苗種中即便混入少量雌性個(gè)體，也會(huì)在養(yǎng)殖后期繁育出大量魚苗，導(dǎo)致飼料嚴(yán)重浪費(fèi)、養(yǎng)殖成本增加。此外，雌性羅非魚的生長(zhǎng)速度顯著慢于雄性羅非魚，也嚴(yán)重影響了低雄性率群體的生長(zhǎng)性狀。目前，國(guó)內(nèi)養(yǎng)殖的非激素誘導(dǎo)全雄羅非魚苗種主要為雄性?shī)W利亞羅非魚與雌性尼羅羅非魚雜交生產(chǎn)的奧尼羅非魚，其雄性率通常為90%～95%[7-8]。本研究采用上海市水產(chǎn)研究所選育的超雄尼羅羅非魚作為父本，繁育獲得的尼羅羅非魚苗種雄性率達(dá)到100%，表明該超雄群體繁育的苗種已達(dá)到全雄商品苗要求，適合作為遺傳全雄苗種進(jìn)行推廣。

3.2 遺傳全雄尼羅羅非魚生長(zhǎng)性狀

生長(zhǎng)性狀是養(yǎng)殖魚類最重要的性狀之一，直接決定其養(yǎng)殖周期和養(yǎng)殖成本。羅非魚是主要起源于非洲的熱帶魚類，在我國(guó)長(zhǎng)江及以北區(qū)域均不能自然越冬，生長(zhǎng)期短，越冬成本高，嚴(yán)重制約了該魚在我國(guó)的推廣應(yīng)用。近年來(lái)市場(chǎng)上出現(xiàn)的尼羅羅非魚新品種“鷺雄1號(hào)”，全長(zhǎng)2～3 cm的苗種經(jīng)5～6個(gè)月的養(yǎng)殖，體質(zhì)量可達(dá)到600 g以上[9]；羅偉等[10]對(duì)34個(gè)吉富羅非魚家系進(jìn)行了97 d的池塘同池養(yǎng)殖比較試驗(yàn)，各家系的初始體質(zhì)量為25～100 g，收獲體質(zhì)量為343～588 g。本試驗(yàn)中，筆者采用常規(guī)池塘養(yǎng)殖方式，投放體長(zhǎng)3～5 cm的遺傳全雄苗種，經(jīng)過(guò)100 d的飼養(yǎng)，平均體質(zhì)量達(dá)到558.00 g，表明繁育獲得的遺傳全雄苗種經(jīng)過(guò)3個(gè)多月養(yǎng)殖即可上市，無(wú)需越冬養(yǎng)殖，遺傳全雄尼羅羅非魚生長(zhǎng)速度快、成本低，具有在長(zhǎng)江流域及北方生長(zhǎng)期短的區(qū)域當(dāng)年養(yǎng)成的潛力。此外，本試驗(yàn)中的同箱養(yǎng)殖比較結(jié)果也顯示，遺傳全雄尼羅羅非魚的生長(zhǎng)速度比國(guó)內(nèi)普遍養(yǎng)殖的吉富羅非魚快18.02%，具有較大的生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)及良好的養(yǎng)殖推廣前景。