蔣婷 劉軍 竇現(xiàn)鵬 陳國(guó)統(tǒng)

摘要：目的：探討乙型肝炎病毒（HBV）酶免檢測(cè)和核酸檢測(cè)的在無(wú)償獻(xiàn)血者篩查的應(yīng)用效果。方法：，研究時(shí)間2019年2月-2021年5月進(jìn)行無(wú)償獻(xiàn)血的1940名研究對(duì)象血清標(biāo)本，所有研究對(duì)象均接受酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)檢測(cè)和核酸檢測(cè);以金標(biāo)準(zhǔn)檢查為標(biāo)準(zhǔn)，比較兩種檢查方式的結(jié)果，敏感度、特異度、準(zhǔn)確率。結(jié)果：NAT檢測(cè)敏感度、特異度、準(zhǔn)確率均高于ELISA檢測(cè)，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05。結(jié)論：探討乙型肝炎病毒（HBV）核酸檢測(cè)的準(zhǔn)確度高，特異度、敏感度高，能夠及時(shí)反應(yīng)患者獻(xiàn)血者的HBV病毒感染情況，對(duì)臨床的診療無(wú)償獻(xiàn)血者篩查，保證臨床用血安全具有積極的作用。

關(guān)鍵詞：乙型肝炎病毒;酶免檢測(cè);核酸檢測(cè)

乙型肝炎是一種具有傳染，高發(fā)病率的一種疾病。乙型 肝 炎 病 毒 （ hepatitis B virus，HBV） 以血液傳播為主要傳播途徑，因此對(duì)于獻(xiàn)血者進(jìn)行乙型肝炎篩查是避免乙型肝炎病毒傳播，保證輸血安全的重要途徑。在臨床針對(duì)HBV病毒的篩查中，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) （enzyme - linked immunosor- bent assay，ELISA） 是常用的檢測(cè)手段，其特點(diǎn)具有價(jià)格低，檢查速度快，靈敏度高等特點(diǎn)。但是此種方法容易受到機(jī)體的HBV病毒感染的窗口期，病毒滴度低等多種因素影響而對(duì)檢查結(jié)果有影響。而乙型肝炎病毒核糖核酸（hepatitis B virus deoxyribonucleic acid，HBV - DNA）是通過(guò)病毒的DNA的復(fù)制、存在等直接反映的重要標(biāo)準(zhǔn)，可以更直觀的了解病毒的復(fù)制、傳染情況，更利于臨床對(duì)疾病的診療及監(jiān)測(cè)評(píng)估。本文主要探討乙型肝炎病毒（HBV）酶免檢測(cè)和核酸檢測(cè)的應(yīng)用效果，研究時(shí)間2019年2月-2021年5月，進(jìn)行無(wú)償獻(xiàn)血的1940名研究對(duì)象血清標(biāo)本，現(xiàn)整理如下。

1資料與方法

1.1一般信息

研究時(shí)間2019年2月-2021年5月，進(jìn)行無(wú)償獻(xiàn)血的1940名研究對(duì)象血清標(biāo)本，年齡20-65歲，平均（48.91±3.26）歲;男性1000名，女性940名;所有人員均知情且同意。

1.2方法

所有研究對(duì)象均采取2分血液樣本，其中一份進(jìn)行酶免檢測(cè)， 陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)： HBsAg > 0. 5 ng/ml，HBsAb >0.5 ng/ml，HBeAg >0.5 ng/ml，HBeAb >0.77 U/ml，HBcAb >4.57 U/ml。

另一份進(jìn)行NAT檢測(cè)，進(jìn)行低溫離心機(jī)下離心并在2～6 ℃冰箱保存待檢，先做 HBsAg 酶免試驗(yàn)篩查后再按上述實(shí)驗(yàn)規(guī)則標(biāo)準(zhǔn)篩選出的核酸標(biāo)本在72 h 內(nèi)完成 HBV 核酸檢測(cè)。核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)采用8混樣模式中的核酸檢測(cè)方法，為了確保檢測(cè)的準(zhǔn)確性，嚴(yán)格按照核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程和試劑說(shuō)明書(shū)中的要求進(jìn)行檢測(cè)。陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)： HBV -DNA 含量 （lg） >2. 7。

1. 3 觀察指標(biāo)

以金標(biāo)試紙法為參考，分析 ELISA、NAT 檢測(cè)HBV 的敏感度、特異度、準(zhǔn)確度。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理軟件SPSS24.0，完成數(shù)據(jù)分析，以（x±s）表示計(jì)量資料，并進(jìn)行t檢驗(yàn);以百分比表示計(jì)數(shù)資料，χ2檢驗(yàn)。以P<0.05的差異表示具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1兩種檢測(cè)與金標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)

2.2兩種檢測(cè)敏感度、特異度、準(zhǔn)確率比較

NAT檢查敏感度、特異度、準(zhǔn)確率均高于ELISA檢查，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05。

3討論

目前臨床利于輸血治療的血液來(lái)源主要為無(wú)償獻(xiàn)血，對(duì)于無(wú)償獻(xiàn)血的血源的健康性是保障輸血安全的重點(diǎn)。乙型肝炎是常見(jiàn)的一種血液傳染性疾病，對(duì)人體造成的損傷大。隨著近年來(lái)乙型肝炎的發(fā)病率呈現(xiàn)逐年上升的趨勢(shì)，對(duì)乙型肝炎病毒的有效檢測(cè)是保證輸血治療安全的重點(diǎn)。

目前臨床對(duì)于乙型肝炎病毒的檢測(cè)主要采用酶聯(lián)免疫檢測(cè)，ELISA檢測(cè)是通過(guò)抗體-抗原的特異性反應(yīng)，檢出制定病毒的存在，但ELISA檢測(cè)抗體有一定的濃度要求，病毒進(jìn)入人體后機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答反應(yīng)，需經(jīng)歷一段時(shí)間的病毒復(fù)制和抗體的產(chǎn)生才能被檢出，因此，該方法的檢測(cè)“窗口期”相對(duì)長(zhǎng)一些，一旦檢查結(jié)果顯示為陽(yáng)性，判斷則為乙型肝炎病毒感染。但是在實(shí)際的應(yīng)用中，可能會(huì)存在血液樣本非典型血清轉(zhuǎn)陽(yáng)、病毒變異以及低滴度抗原產(chǎn)生的情況，增加了漏檢風(fēng)險(xiǎn)。NAT是利用PCR擴(kuò)增的原理，將血液樣本中的病毒核酸進(jìn)行擴(kuò)增，使其含量增加到可以檢測(cè)出的水平的方法，若血液中存在未知病毒，則可通過(guò)核酸檢測(cè)技術(shù)檢測(cè)出病毒的存在，應(yīng)用以來(lái)，由于其靈敏度較高，特異性好，在臨床廣為應(yīng)用，但NAT技術(shù)對(duì)檢測(cè)人員的操作水平和血液樣本要求較高，出現(xiàn)假陽(yáng)性的比例較大。

本次研究結(jié)果顯示，NAT檢查敏感度、特異度、準(zhǔn)確率均高于ELISA檢查，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05。說(shuō)明探討乙型肝炎病毒（HBV）核酸檢測(cè)的準(zhǔn)確度高，特異度、敏感度高，能夠及時(shí)反應(yīng)患者無(wú)償獻(xiàn)血者的HBV病毒感染情況，對(duì)臨床的診療保證臨床用血安全具有積極的作用。

現(xiàn)階段我國(guó)血站的檢測(cè)流程主要為首先使用兩種以上的酶免試劑對(duì)血液樣本進(jìn)行酶免檢測(cè)，確定為合格的樣本再進(jìn)行一種試劑的核酸檢測(cè)，這種方法不僅能夠避免因試劑間差異和靈敏度不同造成的誤漏，而且能夠檢測(cè)出因處于窗口期病毒抗體量少造成的漏檢問(wèn)題，同時(shí)，由于核酸檢測(cè)的成本較高，也在一定程度上節(jié)約試劑成本。這就要求我們檢驗(yàn)人員應(yīng)加強(qiáng)對(duì)檢測(cè)工作的重視，加強(qiáng)檢測(cè)技術(shù)和知識(shí)的學(xué)習(xí)與培訓(xùn)，通過(guò)豐富的檢測(cè)經(jīng)驗(yàn)合理利用兩種檢測(cè)技術(shù)，不斷提高血液檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，確保血液供給的安全。

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