祿璐,李曉鶯,何軍,米佳,閆亞美,張曦燕
國(guó)家枸杞工程技術(shù)研究所,寧夏農(nóng)林科學(xué)院枸杞工程技術(shù)研究所(銀川 750002)
枸杞(Lycium barbarumL.)系茄科枸杞屬落葉灌木,果實(shí)呈紅色,富含枸杞多糖、類胡蘿卜素、多種氨基酸、礦物質(zhì)元素及其他生物活性成分,具有抗氧化、養(yǎng)肝明目、提高機(jī)體免疫力等功效[1-2]。隨著“天然食療”的健康理念深入人心,枸杞鮮果市場(chǎng)需求旺盛。但目前,寧夏乃至全國(guó)的枸杞均以干果銷(xiāo)售為主,尤其是在夏季枸杞鮮果集中成熟的季節(jié),如不及時(shí)貯藏保鮮,果肉質(zhì)地軟化、滲汁,微生物快速繁殖,最終導(dǎo)致鮮果大量腐爛,造成枸杞鮮果資源浪費(fèi)。
目前,國(guó)內(nèi)外常用的保鮮方法有低溫冷藏、1-MCP處理、二氧化硫處理、二氧化氯處理、鈣處理、涂膜保鮮、氣調(diào)貯藏等[3-4],針對(duì)不同果蔬采后生理特點(diǎn),可采用兩種或多種方法結(jié)合的方式達(dá)到優(yōu)質(zhì)保鮮的效果。氣調(diào)包裝是近幾年迅速發(fā)展起來(lái)的保鮮技術(shù),其特點(diǎn)在于通過(guò)調(diào)節(jié)氧氣、二氧化碳、氮?dú)獗壤?,形成相?duì)密封的環(huán)境,以抑制細(xì)胞呼吸作用及代謝速率,從而延長(zhǎng)果蔬的保鮮期[5-10]。研究表明,通過(guò)降低氧氣體積分?jǐn)?shù)可抑制呼吸作用,減少有機(jī)物消耗,但在完全無(wú)氧的情況下,無(wú)氧呼吸強(qiáng),分解的有機(jī)物也較多,同樣不利于蔬菜水果保鮮。趙建華等[11]研究采后枸杞鮮果褐變與其活性氧代謝的關(guān)系,試驗(yàn)結(jié)果表明,低溫貯藏可有效延緩枸杞鮮果褐變進(jìn)程;施楊等[12]論述了枸杞鮮果采后不同物理、化學(xué)、生物方法對(duì)其保鮮鮮果的可行性,指出綜合型保鮮包裝技術(shù)發(fā)展前景。開(kāi)展氣調(diào)包裝對(duì)低溫貯藏的枸杞鮮果品質(zhì)的影響,確定最佳氣調(diào)包裝參數(shù),為枸杞保鮮領(lǐng)域提供理論支持,加快枸杞鮮果進(jìn)入國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)。
枸杞鮮果:品種為“寧農(nóng)杞9號(hào)”,寧夏農(nóng)林科學(xué)院園林場(chǎng)枸杞資源圃;殼聚糖(脫乙酰度80%~85%):食品級(jí),河北石家莊華昇科技有限公司;山梨酸鉀:食品級(jí),鄭州特正商貿(mào)有限公司;醋酸(≥99.8%):分析純,天津市大茂化學(xué)試劑廠;PPO、POD、抗壞血酸試劑盒:購(gòu)自蘇州科銘生物技術(shù)有限公司。
電子天平,梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司;PAL-1數(shù)顯糖度計(jì),日本ATAGO(愛(ài)拓)公司;柯尼卡美能達(dá)CM-5分光測(cè)色儀,日本柯尼卡美能達(dá)控股株式會(huì)社;AIGU數(shù)顯硬度計(jì),上海高致精密儀器有限公司;UV-755型紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì),北京分析儀器廠;MAP-HLX360全自動(dòng)盒式氣調(diào)包裝機(jī),蘇州森瑞保鮮設(shè)備有限公司。
1.2.1 枸杞鮮果預(yù)處理
純凈水中加入醋酸調(diào)節(jié)pH至4.0,配制1.0%殼聚糖溶液,加入0.1%山梨酸鉀混合,溶解、攪拌均勻,將枸杞鮮果放入,常溫浸泡30 s后取出,快速風(fēng)干。
1.2.2 不同氣調(diào)參數(shù)對(duì)枸杞鮮果保鮮效果的影響
根據(jù)前期預(yù)試驗(yàn),設(shè)置“氣調(diào)-Ⅰ”組:4% O2、12% CO2、85% N2(低O2-高CO2-低N2);設(shè)置“氣調(diào)-Ⅱ”組:4% O2、5% CO2、91% N2(低O2-低CO2-高N2);設(shè)置“空白組”包裝盒中氣體為自然空氣。分別對(duì)1.2.1小節(jié)處理后的枸杞鮮果進(jìn)行裝盒、填充氣體、密封包裝,于4 ℃貯藏。
1.2.3 各類指標(biāo)測(cè)定
枸杞鮮果不同氣調(diào)包裝處理后4 ℃條件下貯藏,每隔1 d,統(tǒng)計(jì)漲袋率;每隔3 d,每組分別打開(kāi)1盒,測(cè)定枸杞鮮果的色差、硬度、可溶性固形物、PPO酶活、POD酶活、VC質(zhì)量濃度。
1.2.4 感官跟蹤
記錄三組枸杞鮮果在貯藏期內(nèi)出現(xiàn)果柄變色分離、果實(shí)皺縮、滲汁等現(xiàn)象時(shí)間,統(tǒng)計(jì)匯總。
1.2.5 測(cè)定方法
1.2.5.1 色差測(cè)定
采用柯尼卡美能達(dá)CM-5分光測(cè)色儀進(jìn)行枸杞顏色特征分析。測(cè)量枸杞表面亮度(L)、紅度(a)和黃度(b),根據(jù)式(1)、(2)計(jì)算c值和h值。其中L表示亮度(0~100),L值由小到大,其亮度由黑色向白色明度移動(dòng);a值由負(fù)值向正值移動(dòng),其色彩表示從紅色到綠色之間的色彩指數(shù);b表示從黃色到藍(lán)色之間的色彩指數(shù),黃色為正值,藍(lán)色為負(fù)值;c代表色彩飽和度,c越大,則顏色的鮮艷度越高;h表示色度角,為0°~360°之間的顏色角,0°~90°為紅色、橙色和黃色,90°~180°為黃色、黃綠色和綠色,180°~270°為綠色、青色和藍(lán)色,270°~360°為藍(lán)色、紫色、洋紅色和紅色。每個(gè)樣品選取5個(gè)果實(shí)進(jìn)行測(cè)定。
1.2.5.2 硬度測(cè)定
硬度計(jì)接通電源,選擇“N”模式,取枸杞鮮果,拇指與食指分別固定枸杞尖端,速度平穩(wěn)向不銹鋼針刺穿,記下讀數(shù),測(cè)定5次。
1.2.5.3 可溶性固形物(SSC)測(cè)定
稱取10.0 g果實(shí),研磨至漿液,PAL-1手持式糖度計(jì)用蒸餾水校零,膠頭滴管吸取漿液潤(rùn)洗后,測(cè)定5次,讀數(shù),取平均值。
1.2.5.4 PPO、POD酶活測(cè)定
試劑盒法(分光光度計(jì)法),每個(gè)樣品做3組平行。
1.2.5.5 還原型抗壞血酸(prototype-ascorbic acid,AsA)測(cè)定
試劑盒法(分光光度計(jì)法),每個(gè)樣品做3組平行。
1.2.5.6 漲袋率測(cè)定
包裝盒表面凸起高度超過(guò)盒子平面0.5 cm,即為漲袋。每隔1 d檢查漲袋情況,累計(jì)疊加,漲袋率(N)按式(3)計(jì)算。
式中:M為漲袋數(shù)量;W為總盒數(shù)。
數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析采用 SPSS 21.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行Levene方差齊性檢驗(yàn),采用Games-Howell法對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行多重比較。
2.1.1 不同氣調(diào)參數(shù)對(duì)枸杞鮮果色澤的影響
不同氣調(diào)包裝參數(shù)對(duì)枸杞鮮果色澤(L值、a值、c值)的影響如表1~表3所示??瞻捉M、氣調(diào)-Ⅰ、氣調(diào)-Ⅱ組分別對(duì)應(yīng)的L值在貯藏期第1天均不存在顯著差異;從貯藏第5天起,氣調(diào)兩組枸杞鮮果的L值與空白組均存在顯著差異(p<0.05),其中第9天和第17天,氣調(diào)兩組之間存在顯著差異(p<0.05),綜合比較L值,氣調(diào)-Ⅱ組L值變化最平穩(wěn)。對(duì)于a值,三組起始貯藏期a值無(wú)差異,后續(xù)貯藏期,氣調(diào)兩組與空白組均存在顯著性差異(p<0.05),但氣調(diào)兩組a值變化不大;對(duì)于c值,除貯藏第1天和第5天外,氣調(diào)兩組與空白組的a值存在顯著性差異(p<0.05),特別是氣調(diào)-Ⅱ組變化較為平緩。因此,由色澤指標(biāo)可知,氣調(diào)-Ⅱ組枸杞鮮果的色澤與貯藏初期最為接近,果實(shí)鮮艷紅潤(rùn),貯藏17 d的枸杞鮮果如圖1所示。試驗(yàn)結(jié)果表明,氣調(diào)包裝可保持枸杞鮮果色澤,可能是密封環(huán)境有助于果實(shí)水分保持,也可能是低溫貯藏降低酶活,減少褐變發(fā)生程度,故而使果實(shí)最為接近初始色澤。
表1 不同氣調(diào)參數(shù)對(duì)枸杞鮮果色澤的影響(L值)
表2 不同氣調(diào)參數(shù)對(duì)枸杞鮮果色澤的影響(a值)
表3 不同氣調(diào)參數(shù)對(duì)枸杞鮮果色澤的影響(c值)
圖1 氣調(diào)-Ⅱ組低溫貯藏17 d的枸杞鮮果
2.1.2 不同氣調(diào)參數(shù)對(duì)枸杞鮮果硬度的影響
枸杞鮮果采摘后常溫放置2~3 d,會(huì)出現(xiàn)萎蔫、軟化等現(xiàn)象,類似葡萄“自溶”現(xiàn)象[13],細(xì)胞中的淀粉、果膠等物質(zhì)的降解導(dǎo)致果實(shí)軟化,呼吸作用使參與該化學(xué)反應(yīng)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)發(fā)生質(zhì)變,故果實(shí)硬度大小是果實(shí)是否軟化最直接的表現(xiàn)。一般與果實(shí)中果膠含量、呼吸代謝速率、各類酶活變化存在微妙復(fù)雜的關(guān)系。如圖2所示,三組枸杞鮮果的硬度變化基本相同,呈現(xiàn)下降趨勢(shì);貯藏17 d,氣調(diào)-Ⅱ組硬度與第一天相比變化不大,而空白組和氣調(diào)-Ⅰ組貯硬度分別減小23.3%和9.1%,這可能是空白組外界氧氣含量相對(duì)較高、細(xì)胞失水等因素導(dǎo)致;因此,氣調(diào)-Ⅱ組參數(shù)對(duì)保持果實(shí)硬度效果較好。
圖2 不同氣調(diào)參數(shù)對(duì)枸杞鮮果硬度的影響
2.1.3 不同氣調(diào)參數(shù)對(duì)枸杞鮮果可溶性固形物(SSC)的影響
相關(guān)研究表明,果實(shí)采后呼吸代謝活動(dòng)仍有序進(jìn)行,乙烯等內(nèi)源激素可顯著提高果實(shí)細(xì)胞呼吸速率,導(dǎo)致SSC含量降低[14-15],但弱氧環(huán)境下,可一定程度上抑制細(xì)胞呼吸速率。如圖3所示,空白組和氣調(diào)組枸杞鮮果其SSC含量變化均呈現(xiàn)先升高后下降趨勢(shì)。在貯藏第9天時(shí),各組果實(shí)中SSC含量最高,可能是由于果實(shí)中果膠等物質(zhì)被水解,使SSC含量升高,又被細(xì)胞代謝利用后,含量下降;在17 d時(shí),氣調(diào)組鮮果SSC含量均高于空白組,與初始值相差不大,故氣調(diào)包裝更適合枸杞鮮果保鮮。
圖3 不同氣調(diào)參數(shù)對(duì)枸杞鮮果可溶性固形物的影響
2.1.4 不同氣調(diào)參數(shù)對(duì)枸杞鮮果多酚氧化酶(PPO)的影響
多酚氧化酶是引起果蔬酶促褐變的主要酶類,其活性越高,果蔬越易發(fā)生褐變[16]。由圖4可知,空白組和氣調(diào)組酶活變呈遞減趨勢(shì),在貯藏期的前9 d,氣調(diào)組酶活下降速率大于空白組,后8 d三組酶活下降速率變化緩慢。至第17天,三組枸杞鮮果PPO酶活分別為68.2,58.0和54.4 U/(min·g),此時(shí),空白組仍保持較高酶活,氣調(diào)組酶活與貯藏第1天相比顯著下降(p<0.05)。結(jié)合色澤測(cè)定與感官評(píng)定,空白組枸杞鮮果較氣調(diào)兩組,果實(shí)色澤較深,與較高的PPO酶活有一定關(guān)系,也可能是果實(shí)水分損失所致。
圖4 不同氣調(diào)參數(shù)對(duì)枸杞鮮果PPO活性的影響
2.1.5 不同氣調(diào)參數(shù)對(duì)枸杞鮮果過(guò)氧化物酶(POD)的影響
過(guò)氧化物酶與植物細(xì)胞呼吸作用、光合作用及生長(zhǎng)素氧化等均有關(guān)系,尤其是在老化的植物組織中活性較高,幼嫩組織中活性較弱。由圖5可知,氣調(diào)組枸杞鮮果POD酶活均呈現(xiàn)減小趨勢(shì),空白組先升高后下降,貯藏17 d后,空白組、氣調(diào)-Ⅰ組、氣調(diào)-Ⅱ組酶活分別為初始酶活的42.1%,31.4%和25.3%。由此可見(jiàn),氣調(diào)包裝對(duì)POD酶活有明顯抑制作用[17],但POD酶活降低對(duì)果實(shí)在貯藏期抵御微生物侵害能力等特性是否有影響還有待研究。
圖5 不同氣調(diào)參數(shù)對(duì)枸杞鮮果POD活性的影響
2.1.6 不同氣調(diào)參數(shù)對(duì)枸杞鮮果VC的影響
VC質(zhì)量分?jǐn)?shù)是衡量果蔬品質(zhì)的一個(gè)重要指標(biāo),質(zhì)量分?jǐn)?shù)越高,果蔬越新鮮,尤其是夏季,果實(shí)采摘后VC質(zhì)量分?jǐn)?shù)損失較快。由圖6所示,3組枸杞鮮果的VC質(zhì)量分?jǐn)?shù)隨貯藏時(shí)間均降低,尤其是在第5~第9天,空白組枸杞鮮果VC質(zhì)量分?jǐn)?shù)降低速率最大,至貯藏17 d,分別降至34.7,41.2和47.9 mg/100 g,相比較,氣調(diào)-Ⅱ組枸杞鮮果的VC質(zhì)量分?jǐn)?shù)保持最好[18-19]。
圖6 不同氣調(diào)參數(shù)對(duì)枸杞鮮果VC質(zhì)量分?jǐn)?shù)的影響
2.1.7 漲袋率
氣調(diào)包裝密封后,包裝盒表面內(nèi)凹0.5~1.0 cm,貯藏一段時(shí)間后,3組枸杞鮮果均呈現(xiàn)不同程度漲袋情況,表面凸起0.3~0.5 cm左右,通過(guò)跟蹤觀察貯藏期內(nèi)不同氣調(diào)參數(shù)包裝下枸杞鮮果包裝盒漲情況,統(tǒng)計(jì)結(jié)果如表4所示。貯藏5 d,3組包裝盒均未出現(xiàn)漲氣現(xiàn)象;空白組在貯藏第7天,出現(xiàn)漲氣現(xiàn)象,漲袋率為10%,氣調(diào)-Ⅰ組和Ⅱ組分別在第9和第11天出現(xiàn)漲袋現(xiàn)象,漲袋率均為5%;至第17天,空白組漲袋率達(dá)到40%,氣調(diào)-Ⅰ組和Ⅱ組漲袋率均為10%,但氣調(diào)-Ⅱ組使?jié)q袋發(fā)生時(shí)間推遲。此外,漲袋現(xiàn)象的發(fā)生與枸杞鮮果采摘后預(yù)處理清洗不充分有直接關(guān)系,果實(shí)表面殘留部分野生酵母菌,在氣調(diào)包裝密封后,野生酵母菌進(jìn)行微弱的兼性好氧呼吸,無(wú)氧情況下作用于糖類物質(zhì),產(chǎn)生酒精和CO2,造成漲袋。因此,做好漿果類水果貯藏保鮮前的預(yù)處理可大大降低氣調(diào)包裝漲氣情況的發(fā)生。
表4 不同氣調(diào)包裝下枸杞鮮果的漲袋率 單位:%
為跟蹤各組枸杞鮮果品質(zhì),跟蹤4 ℃貯藏條件下,將貯藏期延長(zhǎng)至25 d,每隔1 d,查看不同處理組枸杞鮮果情況,結(jié)果如表5所示??瞻捉M在第9天出現(xiàn)果柄泛黃,在第12天果實(shí)萎蔫皺縮,在第14天部分鮮果果柄分離,在第16天部分果實(shí)腐爛滲汁;氣調(diào)-Ⅰ組在貯藏第23天,個(gè)別盒底出現(xiàn)液體;氣調(diào)-Ⅱ組在第20天個(gè)別果實(shí)出現(xiàn)果柄分離現(xiàn)象,但至跟蹤期結(jié)束,未發(fā)現(xiàn)滲汁情況。
表5 貯藏期內(nèi)不同氣調(diào)包裝下枸杞鮮果感官品質(zhì)變化
基于各類理化指標(biāo),結(jié)合感官跟蹤,相比較,氣調(diào)-Ⅱ組氣體參數(shù)配比更適合枸杞鮮果貯藏。
研究是在殼聚糖復(fù)合劑涂膜枸杞鮮果保鮮技術(shù)的基礎(chǔ)上,開(kāi)展氣調(diào)包裝,通過(guò)跟蹤測(cè)定貯藏期內(nèi)枸杞鮮果的色澤、硬度、可溶性固形物、多酚氧化酶、過(guò)氧化物酶、VC質(zhì)量濃度各理化指標(biāo)、感官指標(biāo)及漲袋率情況,獲得最佳氣調(diào)參數(shù)。結(jié)果表明:在4%O2、5% CO2、91% N2的條件下低溫4℃貯藏,可進(jìn)一步抑制果實(shí)細(xì)胞呼吸作用和細(xì)胞壁降解酶的活性,減小VC損失,維持果實(shí)色澤、硬度,延緩果實(shí)衰老,使枸杞鮮果的保鮮期延長(zhǎng)至20 d,且果實(shí)色澤鮮艷,飽滿圓潤(rùn),果柄翠綠,具有良好的感官品質(zhì)。此外,枸杞品種、成熟度、保鮮前預(yù)處理清洗充分等對(duì)枸杞氣調(diào)保鮮也有較大影響,這些還需進(jìn)一步研究分析。